Summary

הדמיה של פליטת אור upregulation הרן-1 Oxygenase בנוהל גואה שא

Published: August 28, 2009
doi:

Summary

גואה שא, גירוד הסינית המסורתית לעור טיפולית, גורם תת עורית extravasation כלי הדם דם. אנו מדווחים פרוטוקול של פליטת אור הדמיה של HO-1-<em> בלוציפראז</em> העכברים הטרנסגניים להוכיח כי גואה שא upregulates heme oxygenase-1 (HO-1) באיברים רבים.

Abstract

גואה שה היא טיפול סינית מסורתית עממית המעסיקה העור מגרד לגרום תת עורית extravasation כלי הדם דם וחבלות. פרוטוקול עבור דימות אופטי bioluminescent של HO-1-<em> בלוציפראז</em> העכברים הטרנסגניים דיווח כתב היד הזה מספק מהירה<em> In vivo</em> Assay של upregulation של heme oxygenase-1 (HO-1) ביטוי גנים בתגובה ההליך גואה שא. HO-1 כבר זמן רב ידוע לספק cytoprotection נגד סטרס חמצוני. Upregulation של HO-1, מוערך על ידי פלט פליטת אור, היא חשבה לייצג תגובה antioxidative למוצרים המוגלובין במחזור שפורסמו על ידי גואה שא. גואה שא היה מנוהל על ידי תנועות חוזרות ונשנות של קצה כף חלקה על העור משומנים על הגב או גוף אחר חלק ממוקד של עכבר מהונדס עד דימום נקודתי (שטפי דם קיסם) או ecchymosis (חבורות) מעיד על extravasation של נימי דם תת עורי נצפתה. אחרי גואה שא, הדמיה הפעלות פליטת אור בוצעו יומי במשך כמה ימים כדי לעקוב אחר הדינמיקה של הביטוי 1-HO באיברים פנימיים רבים.

Protocol

נקבה HO-1-בלוציפראז העכברים הטרנסגניים (גיל 4-6 שבועות) ניתן לרכוש חוות Taconic, Inc עם ההגעה, עכברים ממוקמים מתקן דיור חיה לפחות 4 ימים על מנת לאפשר לינה. הכנה הדמיה פליטת אור: <li style=";text-ali…

Discussion

תמלול של HO-1, ועין מתנהלת בצורה של heme oxygenase, הוא שהוגברו על ידי גורמים רבים, כולל heme, מי חמצן, קרינה UV, היפוקסיה, ומדגיש פיזית. הדמיה הגוף כגון פרוטוקול דיווח HO 1-פליטת אור מספק תמונת מצב מהירה של הביטוי HO-1 מערכתית באיברים רבים. אצל בעלי חיים קטנים, הדמיה פליטת אור מאפשר רגי…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

ק 'וונג, וונג STC נתמכים על ידי למימון מתוך פונקציונליים הדמיה מולקולרית מרכז, Brigham and החולים לנשים
ק 'וונג, וונג STC נתמכים על ידי המרכז ביוטכנולוגיה and Informatics, בית החולים המתודיסטית מכון המחקר, Weill Cornell Medical College.
KK קוונג, אני חן, JQ רן נתמכים על ידי מימון של א Athinoula Martinos מרכז ביו הדמיה, בית החולים הכללי במסצ'וסטס.
Lenuta Kloetzer, בריידן קואו נתמכים על ידי מימון מהמרכז לחקר Neuroenteric, בית החולים הכללי במסצ'וסטס
המחברים מודים בני הזוג. ש ו X. זנג שו הדמיה אופטית של המעבדה, בריגהאם ובית החולים לנשים לעזרה טכנית.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Luciferin   Caliper P/N 122796 Previously Xenogen
IVIS 100   Caliper   Previously Xenogen

References

  1. Zhang, W. Selection of potential therapeutics based on in vivo spatiotemporal transcription patterns of heme oxygenase-1. J Mol Med. 80, 655-6564 (2002).
  2. Zhang, W. Rapid in vivo functional analysis of transgenes in mice using whole body imaging of luciferase expression. Transgenic Res. 10, 423-434 (2001).
  3. Contag, C. H., Stevenson, D. K. In vivo patterns of heme oxygenase-1 transcription. J Perinatol. 21, 119-1124 (2001).
  4. Nielsen, A., Knoblauch, N. T., Dobos, G. J., Michalsen, A., Kaptchuk, T. J. The effect of Gua Sha treatment on the microcirculation of surface tissue: a pilot study in healthy subjects. Explore (NY). 3, 456-466 (2007).
  5. Schwickert, M. E., Saha, F. J., Braun, M., Dobos, G. J. Gua Sha for migraine in inpatient withdrawal therapy of headache due to medication overuse. Forsch Komplementmed. 14, 297-300 (2007).
  6. Tsai, P. S., Lee, P. H., Wang, M. Y. Demographics, training, and practice patterns of practitioners of folk medicine in Taiwan: a survey of the Taipei metropolitan area. J Altern Complement Med. 14, 1243-1248 (2008).
  7. Nielsen, A. Gua sha research and the language of integrative medicine. J Bodyw Mov Ther. 13, 63-72 (2009).
  8. Contag, C. H. Visualizing gene expression in living mammals using a bioluminescent reporter. Photochem Photobiol. 66, 523-531 (1997).
  9. Cui, K., Xu, X., Zhao, H., Wong, S. T. A quantitative study of factors affecting in vivo bioluminescence imaging. Luminescence. 23, 292-295 (2008).
  10. Shibahara, S., Yoshida, T., Kikuchi, G. Mechanism of increase of heme oxygenase activity induced by hemin in cultured pig alveolar macrophages. Arch Biochem Biophys. 197, 607-617 (1979).
  11. Lee, P. J. Hypoxia-inducible factor-1 mediates transcriptional activation of the heme oxygenase-1 gene in response to hypoxia. J Biol Chem. 272, 5375-5381 (1997).
  12. Maines, M. D. The heme oxygenase system: a regulator of second messenger gases. Annu Rev Pharmacol Toxicol. 37, 517-554 (1997).
  13. Wunder, C., Potter, R. F. The heme oxygenase system: its role in liver inflammation. Curr Drug Targets Cardiovasc Haematol Disord. 3, 199-208 (2003).
  14. Hoekstra, K. A., Godin, D. V., Cheng, K. M. Protective role of heme oxygenase in the blood vessel wall during atherogenesis. Biochem Cell Biol. 82, 351-359 (2004).
  15. Yang, N. C., Lu, L. H., Kao, Y. H., Chau, L. Y. Heme oxygenase-1 attenuates interleukin-1beta-induced nitric oxide synthase expression in vascular smooth muscle cells. J Biomed Sci. 11, 799-809 (2004).
  16. Morse, D., Choi, A. M. Heme oxygenase-1: from bench to bedside. Am J Respir Crit Care Med. 172, 660-670 (2005).
  17. Ryter, S. W. Protective functions of heme oxygenase-1 and carbon monoxide in the respiratory system. Antioxid Redox Signal. 9, 2157-2173 (2007).
  18. Wilson, K., Yu, J., Lee, A., Wu, J. C. In vitro and in vivo bioluminescence reporter gene imaging of human embryonic stem cells. J Vis Exp. , (2008).
  19. Calabrese, V. Vitagenes, dietary antioxidants and neuroprotection in neurodegenerative diseases. Front Biosci. 14, 376-397 (2009).
  20. Contag, P. R., Olomu, I. N., Stevenson, D. K., Contag, C. H. Bioluminescent indicators in living mammals. Nat Med. 4, 245-247 (1998).
check_url/1385?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Kwong, K. K., Kloetzer, L., Wong, K. K., Ren, J., Kuo, B., Jiang, Y., Chen, Y. I., Chan, S., Young, G. S., Wong, S. T. Bioluminescence Imaging of Heme Oxygenase-1 Upregulation in the Gua Sha Procedure. J. Vis. Exp. (30), e1385, doi:10.3791/1385 (2009).

View Video