La normalización nació para tomografía de fluorescencia de proyección óptica de imágenes de todo corazón
Summary
Le sugerimos un enfoque normalizado para Nacido Tomografía de Proyección Óptica (BnOPT) que da cuenta de las propiedades de absorción de las muestras de imágenes para obtener reconstrucciones de fluorescencia precisa y cuantitativa tomográfica. Usamos el algoritmo propuesto para reconstruir la distribución de fluorescencia de la sonda molecular dentro de los órganos de pequeños animales.
Abstract
Tomografía por proyección óptica es una técnica de imagen tridimensional que se ha introducido recientemente como una herramienta de imagen sobre todo en la biología del desarrollo y estudios de expresión génica. La técnica hace que la muestra biológica ópticamente transparente, en primer lugar a la deshidratación y después colocar en una mezcla de alcohol bencílico y benzoato de bencilo en una proporción de 2:1 (Babb o Murray solución s abierto). La técnica hace que las muestras biológicas ópticamente transparente, en primer lugar a la deshidratación en soluciones de etanol clasificado luego colocarlos en una mezcla de alcohol bencílico y benzoato de bencilo en una proporción de 2:1 (Babb o solución clara Murray s) para borrar. Después de que el proceso de compensación de la contribución de la dispersión en la muestra se puede reducir considerablemente y de hecho casi insignificante, mientras que la contribución de la absorción no puede ser eliminada por completo. Al tratar de reconstruir la distribución de la fluorescencia en la muestra investigada, esta contribución afecta a las reconstrucciones y conduce, inevitablemente, a los artefactos de la imagen y los errores de cuantificación .. Mientras que la absorción podría reducirse aún más con una permanencia de varias semanas o meses en los medios de compensación, esto conducirá a una pérdida progresiva de la fluorescencia y un tiempo de procesamiento de la muestra exageradamente largo. Esto es cierto cuando la reconstrucción de los agentes de contraste exógenos (agentes de contraste molecular), así como el contraste endógenos (por ejemplo, la reconstrucción de la expresión genética proteínas fluorescentes).
Protocol
Acknowledgements
C. Vinegoni reconoce el apoyo de los Institutos Nacionales de Salud (NIH) de subvención 1-SR1-EB006432.
References
- Sharpe, J., Ahlgren, U., Perry, P., Hill, B., Ross, A., Hecksher-Sorensen, J., Baldock, R., Davidson, D. Optical projection tomography as a tool for 3D microscopy and gene expression studies. Science. 296, 541-544 (2002).
- Lee, K., Avondo, J., Morrison, H., Blot, L., Stark, M., Sharpe, J., Bangham, A., Coen, E. Visualizing plant development and gene in three dimensions using optical projection tomography. Plant Cell. 18, 2145-2156 (2006).
- Oldham, M., Sakhalkar, H., Wang, Y. M., Guo, P. Y., Oliver, T., Bentley, R., Vujaskovic, Z., Dewhirst, M. Three-dimensional imaging of whole rodent organs using optical computed and emission tomography. J. Biomed. Opt. 12, 1-10 (2007).
- Ntziachristos, V., Weissleder, R. Experimental three-dimensional fluorescence reconstruction of diffuse media by use of a normalized Born approximation. Opt. Lett. 26, 893-895 (2001).
