Summary

Визуализация бьющееся сердце в Drosophila</em

Published: September 28, 2009
doi:

Summary

Техника, необходимые для визуализации бьющееся сердце в личинок и взрослых<em> Drosophila</em> Представлены. Каждая стадия развития требует иной методологии.

Abstract

<em> Drosophila</em> Сердце недавно стала хорошей модельной системой для изучения генетических, клеточных и молекулярных механизмов, лежащих в мышечной функции сердца. Ключевым шагом в изучении функции сердца в лету находит способ получить доступ к сердцу таким образом, который сохраняет свою функцию миогенной то же время позволяя бьющееся сердце органов, которые должны соблюдаться и зарегистрированы. Две различные методы наблюдения и записи бьющееся сердце в обоих личинки и взрослых<em> Drosophila</em> Описаны здесь. Наши полу-нетронутыми подготовки использованием взрослых мух позволяет четкой визуализации органов брюшной сердца без вмешательства со стороны пигментированные кутикулу и вышележащих жира тела. Для записи личиночной сердце бьется необходимо обездвижить личинка, которая минимизирует стенки тела движений тем самым снижая сердце движений, которые не связаны с инфарктом сокращений. Наши методики производить стабильный имаго и личинок подготовку сердце, что может победить в течение нескольких часов со скоростью 1-3 Гц.

Protocol

Перед тем как начать Взрослые сердца Недавно подготовить искусственные гемолимфы (АГ) раствор, содержащий 108 Na +, 5 мМ К +, 2 мМ Ca 2 +, 8 мм MgCl 2, 1 мМ NaH 2 4 PO, 4мм NaHCO 3, 10 мМ сахарозы, 5 мМ трегалозы, 5 мМ HEPES (рН 7,1, все реагенты из Sigma Chemicals). Сахарозы и тр?…

Discussion

Модель Drosophila оказался мощный генетический инструмент, который был использован для решения различных научных вопросов, начиная от эмбрионального развития к обучению и память. В последнее время этот универсальный организм модели был использован для исследования генетики функции серд?…

Acknowledgements

КО проводится при поддержке гранта от Американской ассоциации сердца.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Micro Dissecting Spring Scissors (curved)   Roboz RS-5611 Good for gross cuts (Step 3)
Micro Dissecting Spring Scissors (straight)   Roboz RS-5620  
Dumont #55 forceps   Fine Science Tools 11295-51  
Dumont #5 forceps   Fine Science Tools 11295-10  
Glass Capillaries, 100ul   VWR 53432-921  
Glass Capillaries, fine   Science Products GB100T8P  
Pipette Puller   Sutter Equipment P-97 Both horizontal and vertical pipette pullers will work
Plastic tubing   Tygon R-3603 1/16” inner diameter for 100μl capillaries
Plastic tubing   Tygon R-3603 1/32” inner diameter for small capillaries
Histoacryl® tissue adhesive   B.Braun, Melsungen    

References

  1. Ocorr, K., Reeves, N., Wessells, R. J., Fink, M., Chen, H. -. S. V., Akasaka, T., Yasuda, S., Metzger, J., Giles, W., Posakony, J. W., Bodmer, R. KCNQ potassium channel mutations cause cardiac arrhythmias in Drosophila that mimic the effects of aging. Proc Natl Acad Sci U S A. 104, 3943-3948 (2007).
  2. Broadie, K. S., Bate, M. Development of the embryonic neuromuscular synapse of Drosophila melanogaster. J Neurosci. 13, 144-166 (1993).
check_url/1425?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Vogler, G., Ocorr, K. Visualizing the Beating Heart in Drosophila. J. Vis. Exp. (31), e1425, doi:10.3791/1425 (2009).

View Video