Sintesi e calibrazione di nanosonde fosforescenti per l'imaging di ossigeno nei sistemi biologici
Summary
Vi presentiamo i principi delle misure di ossigeno da tempra fosforescenza e la progettazione commento su nanosensori dendritiche porfirina-based per l'imaging di ossigeno nei sistemi biologici.
Abstract
Misurazione dell'ossigeno da tempra fosforescenza [1, 2] è costituito dai seguenti passi: 1) la sonda viene consegnato nel mezzo di interesse (es. sangue o liquido interstiziale), 2) l'oggetto viene illuminato con luce di lunghezza d'onda appropriata al fine di eccitare la sonda nel suo stato di tripletto, 3) la fosforescenza emessa è raccolta, e suo sviluppo nel tempo viene analizzato per produrre la vita fosforescenza, che viene convertita in concentrazione di ossigeno (o pressione parziale, pO<sub> 2</sub>). La sonda non deve interagire con l'ambiente biologico e, in alcuni casi da 4) espulso dal supporto al completamento di misura. Ognuno di questi passi impone requisiti relativi alla progettazione molecolare delle sonde fosforescenti, che costituiscono l'unica componente invasiva del protocollo di misurazione. Qui passiamo in rassegna la progettazione di dendritiche nanosensori fosforescenti per misure di ossigeno nei sistemi biologici. Le sonde sono costituite da Pt o Pd porfirina-based polyarylglycine (AG) dendrimeri, modificato marginalmente con polietilenglicole (PEG) i residui. Per un efficace eccitazione a due fotoni, capolinea del dendrimeri possono essere modificate con due fotoni cromofori antenna, che catturano l'energia di eccitazione e smistarli verso i nuclei tripletta delle sonde tramite intramolecolari FRET (Förster Resonance Energy Transfer). Ci descrivono le proprietà fotofisiche chiave delle sonde e del presente protocollo dettagliate sulla calibrazione.
Protocol
Acknowledgements
Sostegno delle sovvenzioni EB007279 e HL081273 dagli Stati Uniti NIH Si ringrazia.
Materials
| Abbreviation | Full name |
| NMP | N-methylpyrrolidinone |
| TFA | trifluoroacetic acid |
| DIPEA | diisopropylethylamine |
| HBTU | 2-(1H-benzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate |
| DMSO | dimethylsulfoxide |
| CDMT | CDMT=1-chloro-3,5-dimethoxytriazine |
| NMM | NMM=N-methylmorfoline |
References
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