부분 결합하여 마우스 경동맥 동맥에있는 방해 흐름 유발 죽상 경화증과 경동맥 내피로부터 RNA 분리의 간단한 방법의 모델
Summary
이것은 일반적인 마우스 경동맥의 intraplaque 네오 – vascularization (4 주)와 방해 흐름 조건 및 후속 죽상 경화증 개발 (2 주) 원인 부분 경동맥 내고 수술을 설명합니다. 우리는 또한 고순도 내피 RNA를 제공하고, 경동맥 intima에서 RNA의 분리의 소설 방법을 설명합니다.
Abstract
잘 알려진 가까운 협회에도 불구하고, atherogenesis에 방해 흐름을 연결하는 직접적인 증거가 부족했습니다. 우리는 최근 경동맥 부분 결합 방식의 수정된 버전을 사용해야 [1,2]는 심하게 마우스 일반적으로 경동맥의 낮은 oscillatory 흐름 조건 방해 흐름의 두 주요 특성을 유도 것을 보여주기 위해. 이 모델을 사용, 우리는 방해 흐름이 실제로 Apolipoprotein E의 녹아웃 마우스에서 신속하고 강력한 죽상 경화증의 개발 [3] 단서가 확실한 증거를 제공하고 있습니다. 우리는 또한 마우스 경동맥 intima [3]에서 고순도로 내피 RNA 준비하는 방법을 개발했습니다. 이 마우스 모델과 방법을 사용하여, 우리는 그 부분 내고는 사주에 의해 그러한 intraplaque neovascularization 같은 복잡한 병변 형성의 기능과 함께 hyperlipidemic 마우스 모델에서 2 주내에 강력하고 빠른 atheroma의 형성에 의해 다음, 일주일에 내피 기능 장애의 원인이 발견했습니다. 이 급속한<em> 생체내에</em> 모델과 내피 RNA 준비 방법은 혈관 생물학과 질병의 흐름에 의존 규정을 기본 분자 메커니즘을 결정하는 데 사용할 수 있습니다. 또한, 그것은 상당히 감소 학습 기간의 내피 기능 장애와 죽상 경화증을 대상으로 다양한 치료 개입을 테스트하는 데 사용할 수 있습니다.
Protocol
Discussion
이 절차에서는 외부 경동맥, 내부 경동맥, 후두 동맥과 우수한 갑상선 동맥을 포함한 일반적인 경동맥의 모든 지점의 적절한 신분증이 필요합니다. 시연으로 초음파를 사용하여 유동 패턴을 확인하는 것도 중요합니다. 우리의 경험 손에, 500 개 이상의 생쥐의 초음파 연구에 따라 부분 내고 수술의 성공 비율은 90 %보다 낫습니다. 경동맥 내막 RNA 준비 들어, 첫 번째 단계 재관류 후 경동맥의 모양에…
Acknowledgements
이 작품은 과학, 기술 및 S. 한국의 교육부에서 NIH 기금 HL87012 (HJ), HL75209 (HJ), UO1HL80711 (DH, DG, HJ) 및 세계 클래스 대학 프로젝트 (HJ)의 기금에 의해 지원되었다.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Normal Saline (0.9% sodium chloride) | Baxter | 2B1323 | ||
| Insulin syringe (3/10 ml 29g syringe) | Tyco Health care | 8881600145 | ||
| HBSS | Cellgro, Mediatech, Inc. | 21-023 | ||
| miRNeasy mini kit (including, QIAzol) | QIAGEN | 217004 | ||
| Vevo 770 High-Resolution Micro-Imaging System | Visualsonics | a.Visualsonics 770 system b.Imaging stage c.Vevo integrated rail system d.RMV scan head for mice |
or similar system | |
| 6-0 Silk Suture, sterile | Covidien | s-1172 c2 | ||
| Small scissors | Roboz | RS-5675 | or similar | |
| Dissecting Forceps | Roboz | RS-5005 | or similar | |
| Tissue Mend II | Webster Vet Supply | 07-856-7946 |
References
- Korshunov, V. A., Berk, B. C. Flow-induced vascular remodeling in the mouse: a model for carotid intima-media thickening. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 23 (12), 2185-2191 (2003).
- Sullivan, C. J., Hoying, J. B. Flow-dependent remodeling in the carotid artery of fibroblast growth factor-2 knockout mice. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 22 (7), 1100-1105 (2002).
- Nam, D. Partial carotid ligation is a model of acutely induced disturbed flow, leading to rapid endothelial dysfunction and atherosclerosis. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 297 (4), H1535-H1543 (2009).
