Method Article

החדרה ישירה של קנה הנשימה אל הריאות מומסים עכבר

DOI:

10.3791/1941

⸱

August 29th, 2010

 ,  ,  , 
1Department of Physiology, Emory University, 2Center for Respiratory Health, Emory University, 3Department of Medicine, Emory University

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Instillations Intratracheal לספק מומסים ישירות לריאות. הליך זה מטרות אספקת instillate לתוך אזורים דיסטלי של הריאה, ולכן שולבו לעתים קרובות במחקרים שמטרתם ללמוד alveoli. אנו מספקים הישרדות פרוטוקול מפורט לביצוע instillations intratracheal בעכברים.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Instillations Intratracheal לספק מומסים ישירות לריאות. הליך זה מטרות אספקת instillate לתוך אזורים דיסטלי של הריאה, ולכן שולבו לעתים קרובות במחקרים שמטרתם ללמוד alveoli. אנו מספקים הישרדות פרוטוקול מפורט לביצוע instillations intratracheal בעכברים. שימוש בגישה זו, ניתן למקד את המסירה של מומסים מבחן או מוצקים (כגון ריאות ותרופות, פעילי שטח, וירוסים oligonucleotides קטנים) לתוך הריאות דיסטלי. Instillations קנה הנשימה עשוי להיות מתודולוגיה מועדפת, על פרוטוקולים משאיפת שעשויים בעיקר היעד בדרכי הנשימה העליונות ואולי לחשוף את החוקר לחומרים העלולים להיות מסוכנים. בנוסף, באמצעות פרוטוקול החדרה קנה הנשימה, בעלי חיים יכולים להתאושש באופן מלא בהליך פולשני. זה מאפשר ביצוע מדידות פיזיולוגיות לאחר מכן על חיות הבדיקה, או התקנה מחדש באמצעות בעלי חיים זהה. כמות instillate שהוכנסו הריאה צריכה להיקבע בזהירות מאוזנת אוסמוטי על מנת להבטיח התאוששות של בעלי חיים. בדרך כלל, 30-75 נפח instillate μL יכול להיות מוחדר ריאות העכבר.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. הרדמה

  1. הרדמה עכברים עם isoflurane עשוי להקל על הטיפול בבעלי חיים באיפוק לפני מתן הרדמה intraperitaneally. באמצעות הרדמה נשאפים עשויה או לא עשויה להיות מתאים מחקר מסוים: לקבוע תחילה את ההשפעה של שימוש isoflurane, או כל חומר הרדמה אחר, על מחקר ריאות המוצע.
  2. להרדים חיות עם isoflurane. הוידאו מציג את השימוש של החדר מאדה isoflurane להגדיר 2% isoflurane מעורבב עם חמצן. אם אין לך תא isoflurane, אתה יכול לחילופין באמצעות תקן פתוח ושחרר טכניקות חשיפה. הקף חולדות בתוך צנצנת פעמון (או מיכל מתאים אחר....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Instillations Intratracheal שימשו מספר מחקרים שונים כדי להעריך את הרעילות של תרכובות מבחן (6), לגרום נזק ריאות מכתשיים (4, 7), להחליף חומרים פעילי שטח (8), כמו גם לשנות ביטוי גנים באמצעות מסירת oligonucleotides קטן ישירות לתוך ריאה (5). כרגע אנחנו בוחנים את השימוש של הקניית 1) חומר זרחני חיזור רגישה לתוך הריאות על מנת למדוד סטרס חמצוני in vivo בתנאים נורמליים pathophysiological, וכן 2) הקניית אינדיקטורים ניאון עם חומרים פרמקולוגיים, וקטורים DNA, וירוסים ו / או microRNA כדי להעריך .......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עבודה זו נתמכה על ידי NIH K99 HL09222601 וה-S & R קרן Ryaji פרס Uneo הוענק MNH.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
איזופלורןוובסטר וטרינרי14043-220-05
קסילזיןלויד, בע"מיישום תרופות חדש לבעלי חיים #139-236
קטמיןביוניש פארמה67457-001-10
Nairזמין בחנויות הפארם
1 מ"ל SubQ מזרקBD Biosciences30959726 5/8 G
4-0 תפר ניילוןEthicon Inc.1894ז. עונה 30

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Driscoll, K. E., Costa, D. L., Hatch, G., Henderson, R., Oberdorster, G., Salem, H., Schlesinger, R. B. Intratracheal instillation as an exposure technique for the evaluation of respiratory tract toxicity: uses and limitations. Toxicol Sci. 55, 24-35 (2000).
  2. Helms, M. N., Jain, L., Self, J. L., Eaton, D. C.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Intratracheal InstillationMouse LungTracheal ExposureSolute DeliverySurgical ProcedureAnesthesia ProtocolWound ClosureLung Fluid ClearanceFluorescent CompoundBody Weight Dosing

Related Articles