Прямая трахеи инстилляции растворов в легких мышей
Summary
Интратрахеального инстилляции растворов доставить непосредственно в легкие. Эта процедура цели доставку instillate в дистальных отделах легких, и поэтому часто включены в исследования, направленные на изучение альвеол. Мы предоставляем подробный протокол выживания для выполнения интратрахеального инстилляции у мышей.
Abstract
Интратрахеального инстилляции растворов доставить непосредственно в легкие. Эта процедура цели доставку instillate в дистальных отделах легких, и поэтому часто включены в исследования, направленные на изучение альвеол. Мы предоставляем подробный протокол выживания для выполнения интратрахеального инстилляции у мышей. Используя этот подход, можно адресной доставки тест растворенных веществ или твердых веществ (таких, как рак легких терапии, поверхностно-активные вещества, вирусы, и малых олигонуклеотидов) в дистальных легких. Трахеи инстилляций может быть предпочтительным методологии, более ингаляции протоколов, которые могут в первую очередь цель верхних дыхательных путей и, возможно, разоблачить следователя потенциально опасных веществ. Кроме того, при использовании протокола трахеи инстилляции, животные могут полностью восстановиться от неинвазивные процедуры. Это позволяет сделать последующие физиологических измерений на подопытных животных, или переустановки с использованием тех же животных. Количество instillate введен в легких должны быть тщательно определены и осмотически сбалансированным, чтобы обеспечить животным восстановления. Как правило, 30-75 мкл объема instillate может быть введен в мышь легких.
Protocol
Discussion
Интратрахеального инстилляции были использованы в нескольких различных исследований для оценки токсичности тестируемых соединений (6), вызывают альвеолярного повреждения легких (4, 7), замените поверхностно-активные вещества (8), а также изменяют экспрессию генов через доставку неболь?…
Acknowledgements
Эта работа была поддержана NIH K99 HL09222601 и S & R Фонд Ryaji Uneo премия присуждена MNH.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Isoflurane | Webster Veterinary Sterling , MA | 14043-220-05 | ||
| Xylazine | Lloyd Laboratories Shenandoah, IA | New Animal Drug Application #139-236 | ||
| Ketamine | Bioniche Pharma Lake Forest, IL | 67457-001-10 | ||
| Nair | Available at drug stores | |||
| 1mL SubQ Syringe | BD Syringe Franklin Lakes, NJ | 309597 | 26 5/8 G | |
| 4-0 Nylon Suture | Ethicon San Lorenzo, Puerto Rico | 1894G.S30 |
References
- Driscoll, K. E., Costa, D. L., Hatch, G., Henderson, R., Oberdorster, G., Salem, H., Schlesinger, R. B. Intratracheal instillation as an exposure technique for the evaluation of respiratory tract toxicity: uses and limitations. Toxicol Sci. 55, 24-35 (2000).
- Helms, M. N., Jain, L., Self, J. L., Eaton, D. C. Redox regulation of epithelial sodium channels examined in alveolar type 1 and 2 cells patch-clamped in lung slice tissue. J Biol Chem. 283, 22875-22883 (2008).
- Helms, M. N., Self, J., Bao, H. F., Job, L. C., Jain, L., Eaton, D. C. Dopamine activates amiloride-sensitive sodium channels in alveolar type I cells in lung slice preparations. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 291, L610-L618 (2006).
- Iyer, S. S., Ramirez, A. M., Ritzenthaler, J. D., Torres-Gonzalez, E., Roser-Page, S., Mora, A. L., Brigham, K. L., Jones, D. P., Roman, J., Rojas, M. Oxidation of extracellular cysteine/cystine redox state in bleomycin-induced lung fibrosis. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 296, L37-L45 (2009).
- Li, T., Folkesson, H. G. RNA interference for alpha-ENaC inhibits rat lung fluid absorption in vivo. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 290, L649-L660 (2006).
- Sager, T., Porter, D., Robinson, V., Lindsley, W., Schwegler-Berry, D., Castranova, V. An improved method to disperse nanoparticles for in vitro and in vivo investigation of toxicity. Nanotoxicol. 1, 118-129 (2007).
- Xu, J., Gonzalez, E. T., Iyer, S. S., Mac, V., Mora, A. L., Sutliff, R. L., Reed, A., Brigham, K. L., Kelly, P., Rojas, M. Use of senescence-accelerated mouse model in bleomycin-induced lung injury suggests that bone marrow-derived cells can alter the outcome of lung injury in aged mice. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 64, 731-739 (2009).
- Yeh, T. F., Lin, H. C., Chang, C. H., Wu, T. S., Su, B. H., Li, T. C., Pyati, S., Tsai, C. H. Early intratracheal instillation of budesonide using surfactant as a vehicle to prevent chronic lung disease in preterm infants: a pilot study. Pediatrics. 121, e1310-e1318 (2008).
