Drosophila Burrowing and Tunneling Assay: een methode om weefselhypoxie bij vlieglarven te beoordelen

Abstract

Bron: Qiang, K.M., et al. A Burrowing/Tunneling Assay for Detection of Hypoxia in Drosophila melanogaster Larvae. J.Vis. Exp. (2018).

Deze video toont een methode om hypoxie bij Drosophila-larven te testen door hun graaf- en tunnelcapaciteiten te beoordelen. Met behulp van deze techniek kunnen onderzoekers larven met zuurstoftekort onderscheiden van larven met ontwikkelingsachterstanden. Het voorbeeldprotocol demonstreert de instellingen voor deze test.

Protocol

Dit protocol is een fragment uit Qiang et al., A Burrowing/Tunneling Assay for Detection of Hypoxia in Drosophila melanogaster Larvae, J. Vis. Exp. (2018). 1. Bereiding van larven Zet twee of meer dagen voor aanvang van de test kruisen van de gewenste experimentele en controlecombinaties (minimaal 20 vrouwtjes en 10 mannetjes elk) in eierschaaltjes zoals beschreven door Wieschaus en Nusslein-Volhard, maar gebruik 50 ml polypropyleen beakers…

Materials

REAGENTS
Dehydrated yeast
Frozen grape juice concentrate	Welch's		Available at most large supermarkets
Glacial acetic acid	Sigma-Aldrich	320099
Drosophila agar	Apex Bioresearch Products	66-103
Methyl-para-hydroxybenzoate	Apex Bioresearch Products	20-658
EQUIPMENT
50 ml polypropylene beakers
6.0 cm disposable Petri dishes	Falcon	08757100B
10 cm disposable plastic Petri dishes	E+K Scientific	EK-24104
Plastic microspatulas	Corning Incorporated	3012
Bent teasing needle	Nasco	S08848MH
Dissecting microscope			Any microscope with 10-30X magnification