Lesione neurale indotta da laser a due fotoni: un metodo per osservare la degenerazione e la rigenerazione dell'assone nelle larve di Drosophila
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Li, D., et al. J. Vis. Exp. (2018).
Questo video descrive l’ablazione laser a due fotoni degli assoni in una larva di Drosophila melanogaster e un protocollo di esempio per indurre lesioni e immagini il sito della lesione.
Protocol
Questo protocollo è un estratto da Li et al., A Drosophila In Vivo Injury Model for Studying Neuroregeneration in the Peripheral and Central Nervous System, J. Vis. Exp. 1. Lesioni da due fotoni e imaging confocale Configurazione del microscopioNOTA: Per questo esperimento è stato utilizzato un microscopio a scansione laser confocale con un laser a due fotoni, ma saranno sufficienti anche altri sistemi con una configurazi…
Representative Results
Figura 1: La rigenerazione dell’assone neuronale da neurone nella periferia mostra la specificità della classe. (A e B) Disegno schematico che mostra la posizione delle larve. (C) Disegno schematico dei neuroni di classe III da. (D) Gli assoni dei neuroni da di classe III ddaF, etichettati con 19-12-Gal4, UAS-CD4-tdGFP, repo-Gal80/+, non riescono a ricrescere. (E…
Materials
| Diethyl ether, ACS reagent, anhydrous | Acros Organics | AC615080010 | |
| Halocarbon 27 Oil | Genesee Scientific | 59-133 | |
| Propionic Acid | J.T.Baker | U33007 | |
| Cover Glasses: Rectangles | Fisher Scientific | 12-544-D | 50 mm X 22 mm |
| Zeiss LSM 880 laser scanning microscope | Zeiss | ||
| Zen software | Zeiss | ||
| Chameleon Ultra II | Coherent |
Cite This Article
Two-Photon Laser-Induced Neural Injury: A Method to Observe Axon Degeneration and Regeneration in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20108, doi: (2023).