Lesión neuronal inducida por láser de dos fotones: un método para observar la degeneración y regeneración del axón en larvas de drosophila

Abstract

Fuente: Li, D., et al. A Drosophila In Vivo Injury Model for Studying Neuroregeneration in the Peripheral and Central Nervous System. J. Vis. (2018).

Este video describe la ablación láser de dos fotones de axones en una larva de Drosophila melanogaster y un protocolo de ejemplo para inducir lesiones e imagen del sitio de lesiones.

Protocol

Este protocolo es un extracto de Li et al., A Drosophila In Vivo Injury Model for Studying Neuroregeneration in the Peripheral and Central Nervous System, J. Vis. Exp. (2018). 1. Lesión de dos fotones e imágenes confocales Configuración del microscopioNOTA: Se utilizó un microscopio de escaneo láser confocal con un láser de dos fotones para este experimento, pero otros sistemas con una configuración equivalente tambi…

Representative Results

Figura 1: La regeneración del axón de la neurona da en la periferia muestra especificidad de la clase. (A y B) Dibujo esquemático que muestra la posición de las larvas. (C) Dibujo esquemático de la clase III da neuronas. (D) Los axones de la clase III da neurons ddaF, etiquetados con 19-12-Gal4, UAS-CD4-tdGFP, repo-Gal80/+, no pueden volver a crecer. (E</stro…

Materials

Diethyl ether, ACS reagent, anhydrous	Acros Organics	AC615080010
Halocarbon 27 Oil	Genesee Scientific	59-133
Propionic Acid	J.T.Baker	U33007
Cover Glasses: Rectangles	Fisher Scientific	12-544-D	50 mm X 22 mm
Zeiss LSM 880 laser scanning microscope	Zeiss
Zen software	Zeiss
Chameleon Ultra II	Coherent