Larval лимфы Гланд вскрытие: Изоляция Drosophila гемоцитов производства органа
Published: April 30, 2023
Abstract
Источник: Реймельс, Т. А. и Пфлегер, C.M. Методы изучения лимфатических желез и гемоцитов в Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (2016).
Это видео описывает Дрозофила лимфатической железы-основной сайт гематопоизиса в личинке мухи-и показывает пример протокола для вскрытия и установки органа для иммуногистохимии и флуоресцентной визуализации.
Protocol
Этот протокол является выдержкой из Реймельса и Пфлегер, Методы изучения лимфатических желез и гемоцитов в Drosophila Larvae, J. Vis. Exp. (2016). 1. Ларвал лимфланд иммуногистохимия ПРИМЕЧАНИЕ: Лимфатическая железа расположена примерно на треть д…
Representative Results
Рисунок 1: В Виво Кристаллическая меланизация клеток. A) Личинки были помещены индивидуально в трубы ПЦР до нагрева. Красные стрелки указывают на личинки, которые не находятся в нижней части труб. B) Типичный кр?…
Materials
| PBS tablets | MP Biomedicals | 2810305 | |
| dissecting dish | Corning | 7220-85 | |
| microcentrifuge tube | Denville | C2170 | |
| silicone dissecting pad, made from Sylgard 184 kit | Krayden (distributed through Fisher) | NC9644388 (Fisher catalog number) | Made in petri dish by mixing components of Sylgard elastomer kit according to manufacturer instructions. |
| stereomicroscope | Morrell Instruments (Nikon distributor) | mna42000, mma36300 | Nikon models SMZ1000 and SMZ645 |
| tissue wipe | VWR | 82003-820 | |
| forceps | Electron Microscopy Sciences | 72700-DZ | |
| p200 pipette | Eppendorf | 3120000054 | |
| formaldehyde | Fisher | BP531-500 | |
| Triton | Fisher | BP151-500 | |
| Tween 20 | Fisher | BP337-500 | |
| bovine serum albumin | Rocky Mountain Biologicals | BSA-BSH-01K | |
| normal goat serum | Sigma | G9023-10ML | |
| normal donkey serum | Sigma | D9663-10ML | |
| 200 proof ethanol | VWR | V1001 | |
| N-propyl gallate | MP Biomedicals | 102747 | |
| glycerol | VWR | EM-4750 | |
| DAPI (4',6-diamidino-2-phenylindole) | Fisher | 62248 | |
| microscope cover glass, 18 mm circular | Fisher | 12-545-100 | |
| glass microscope slides | Fisher | 22-034-980 | |
| 24-well plate | Corning | 351147 | |
| disposable transfer pipet | Fisher | 13-711-9AM | |
| fluorescence microscope | Zeiss | Axio Imager.Z1 |
Cite This Article
Larval Lymph Gland Dissection: Isolating the Drosophila Hemocyte-Producing Organ. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20117, doi: (2023).