Freeze-Cracking van nematoden: een methode om inwendige wormweefsels bloot te leggen voor vlekken

Abstract

Bron: Zhang, N., et al. The C. elegans Intestine As a Model for Intercellular Lumen Morphogenesis and In Vivo Polarized Membrane Biogenesis at the Single-cell Level: Labeling by Antibody Staining, RNAi Loss-of-function Analysis and Imaging. Drs. J. Vis. Exp. (2017).

Deze video beschrijft freeze-cracking, een methode om C. elegans weefsels toegankelijk te maken voor antilichaamkleuring door de nagelriem te verstoren.

Protocol

Dit protocol is een fragment uit Zhang et al, The C. elegans Intestine As a Model for Intercellular Lumen Morphogenesis and In Vivo Polarized Membrane Biogenesis at the Single-cell Level: Labeling by Antibody Staining, RNAi Loss-of-function Analysis and Imaging, J. Vis. Exp. (2017). Antilichaamkleuring van de C. elegans darm Fixatie Neem een schone glazen glijbaan en gebruik poly-L-lysine om een…

Materials

Antibody staining
poly-L-lysine	Sigma	P5899
Methanol	Fisher Scientific	A452-4
Acetone	Fisher Scientific	A949SK-4
Permount	Fisher Scientific	SP15-100
Microscope slides	Fisher Scientific	4448
Microscope coverslips (22×22-1)	Fisher Scientific	12-542-B
M9 Medium			lab made
OP50 bacteria	CGC