ניתוח המדרש מטיסת מבוגר: שיטה לבודד את מערכת העיכול
Published: April 30, 2023
Abstract
מקור: טאק, H.M., ואח ‘. בידוד תאי גזע מעיים מן מידגוט Drosophila למבוגרים על ידי FACS ללמוד התנהגות תאי גזע במהלך ההזדקנות. ג’יי ויס אקספ. (2014).
בסרטון זה, אנו מדגישים ניתוח של המעי Drosophila הבוגר ואוסף של midguts מתאים דיסוציאציה של תא יחיד FACS על מנת לבודד תאי גזע במעיים.
Protocol
פרוטוקול זה הוא קטע מתוך טאק ואח ‘,בידוד תאי גזע מעיים מן מידגוטים Drosophila למבוגרים על ידי FACS ללמוד התנהגות תאי גזע במהלך ההזדקנות, J. Vis. Exp. (2014). שים לב: אם פרוטוקול זה משמש לראשונה לבידוד ISCs על-ידי מיון FAC, הפקדים הבאים הם חובה כדי להגדיר ב?…
Materials
| Forceps: Dumont, Inox Biologie #5 | Fine Science Tools | 11252-20 | |
| SefarNitex 03-150um/38 (35 µm nylon mesh) | Sefar | 3A03-0150-102-00 | |
| Falcon 5 ml Round Bottom Polystyrene Test Tube with Cell Strainer Snap Cap | Corning | 352235 | |
| Polymax 1040 | Heidolph | 543-42210-00 | |
| Albumin from bovine serum (BSA) | Sigma | A4503-50G | |
| 0.5% Trypsin-EDTA | Invitrogen | 15400-054 | Trypsin obtained from a different company most likely has a different activity and the duration of the trypsin digest has to be adjusted accordingly. |
| SYTOX Blue Dead Cell Stain for flow cytometry | Life Technologies | S34857 | |
| RNAlater Stabilization Solution | Life Technologies | AM7023 | Other solutions, e.g., Trizol can be used for subsequent RNA isolation |
| FACSAria II cell sorter | Becton Dickinson | Turn on one hour prior to sorting |
Cite This Article
Dissection of the Midgut from an Adult Fly: A Method for Isolating the Digestive Tract. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20150, doi: (2023).