UV-bestrålning: En metod för att integrera extrakromosommatriser

Abstract

Källa: Mariol, M.C m.fl. Ett snabbt protokoll för att integrera extrakromosommatriser med hög överföringshastighet i C. elegans-genomet. J. Vis. Exp. (2013). 

Mikroinjektion av transgener resulterar vanligtvis i C. elegans stammar med stora extrachromosomal arrays, vilket resulterar i varierande uttryck och överföring av transgen.  UV-bestrålning kan inducera kromosomintegration av matrisen och stabilare transgeneöverföring.

Protocol

Detta protokoll är ett utdrag från Mariol et al, A Rapid Protocol for Integrateing Extrachromosomal Arrays With High Transmission Rate into the C. elegans Genome, J. Vis. Exp. (2013). 1. UV-bestrålning och återhämtning av transgena maskar Mask bestrålning: Välj 30-100…

Representative Results

Tabell 1. Jämförelse av standard och förbättrade protokoll för extrachromosomal arrays integration i C. elegans genomet. Två ickeintegrerade transgener som sänder med ungefär samma frekvens integrerades med hjälp av standarden eller det förbättrade protokollet. Den största skillnaden ligger i det faktum att i standardprotokollet utförs en skärm av…

Materials

U.V. cross-linker	Fischer Scientific		Wavelength 254 nm
Microscope SteREO Discovery V8	Carl Zeiss, Inc.
Petri dishes, 60 mm	CML	BPS55E6
Platinium wire 0.25 mm	Alfa Aesar	6/4/7440	To make a pick for worms