في الجسم الحي التثقيب الكهربائي: طريقة خاصة بالموقع لنقل أسماك الزرد

In This Article

Abstract

المصدر: Durovic, T., et al. طريقة التثقيب الكهربائي لتوصيل الحمض النووي البلازميد في الجسم الحي في الدماغ الزرد البالغ. J. Vis. Exp. (2019).

يصف هذا الفيديو التثقيب الكهربائي في الجسم الحي ، وهي تقنية لتوصيل الحمض النووي إلى الخلايا البطانية الدبقية في أسماك الزرد البالغة.

Protocol

< p class = "jove_title" >1. التثقيب الكهربائي

قم بإزالة السمك من إعداد الحقن مع الاستمرار في الاحتفاظ به في الإسفنجة.
اغمر الجانب الداخلي من طرف الأقطاب الكهربائية في هلام الموجات فوق الصوتية.
قم بتغطية telencephalon السمكة بكمية صغيرة من هلام الموجات فوق الصوتية.
ضع رأس السمكة بين الأقطاب الكهربائية ، مع وضع القطب الموجب على الجانب البطني من رأس السمكة والقطب السالب على الجانب الظهري (الشكل 1 ج) ، مع الاستمرار في إمساك جسم السمكة في الإسفنجة. هذا يحدد اتجاه تدفق التيار الضروري للتثقيب الكهربائي للبسط العظمي الموجود في المنطقة تحت البطينية.
اضغط على الأقطاب الكهربائية برفق وبدقة ضد telencephalon (الشكل 1 C). إدارة التيار بدواسة القدم. أمسك الأقطاب الكهربائية في مكانها حتى تنتهي النبضات الخمسة.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

figure-results-1
الشكل 1: تمثيل تخطيطي للقسم الإكليلي لسمك الزرد المقطوع. (أ) مخطط القسم الإكليلي من الدماغ البطاني الزرد ، مع تسليط الضوء على موضع الخلايا البطانية الدبقية ، والتي تبطن سطح البطين وتبني جدار البطين البطني. تربط الطبقة البطانية الظهرية بين نصفي الكرة الأرضية وتغطي البطين (V) ، الموجود بين طبقتين من الخلايا: البطاني الدبقي والعصاني العصبي. (ب) على اليسار ، صورة لرأس الزرد مأخوذة من الأعلى ،...