I Vivo Elektroporation: En stedsspecifik metode til at transfekte zebrafisk
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Durovic, T., et al. Elektroporation metode til In Vivo Levering af Plasmid DNA i voksen zebrafisk Telencephalon. J. Vis. Exp. (2019).
Denne video beskriver in vivo elektroporation, som er en teknik til DNA-levering i ependymogliale celler hos voksne zebrafisk.
Protocol
1. Elektroporation Fjern fisken fra injektionsopsætningen, mens du stadig holder den i svampen. Fordyb indersiden af spidsen af elektroderne i ultralydsgelen. Dæk fisken telencephalon med en lille mængde ultralyd gel. Placer fiskehovedet mellem elektroderne, og placer den positive elektrode på den ventrale side af fiskens hoved og den negative elektrode på dorsalsiden (Figur 1C), mens fiskens krop stadig er i svampen. Dette indstiller retningen af strømmen af…
Representative Results
Figur 1: Skematisk repræsentation af koronade del af den everted zebrafisk telencephalon. (A) Ordning med en koronarsektion af zebrafisktelncephalon, der fremhæver placeringen af ependymogliale celler, som er forende ventrikulær overflade og opbygning af ventral ventrikelvæggen. Dorsal ependymal lag bygger bro mellem de to halvkugler og dækker hjertekammer (V), der ligger i mellem to cellelag: ependy…
Materials
| Ultrasound gel | SignaGel, Parker laboratories INC | 15-60 | Electrode Gel |
| BTX Tweezertrodes Electrodes | Platinum Tweezertrode, BTX Harvard Apparatus | 45-0486 | 1mm diameter |
| Electroporation device | BTX ECM830 Square Wave Electroporation System, BTX Harvard Apparatus | 45-0662 |
Cite This Article
In Vivo Electroporation: A Site-Specific Method to Transfect Zebrafish. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20193, doi: (2023).