Abstract
Kilde: Wang L. et. al., Pasientavledede heterogene Xenograft Modell av bukspyttkjertelkreft Ved hjelp av sebrafisk larver som verter for komparativ legemiddelvurdering. J. Vis. Utt. (2019).
Denne videoen beskriver teknikken for å lage en sebrafiskpasient avledet xenograftmodell. I prøveprotokollen vurderer vi effektiviteten av stoffene Gemcitabine og Navitoclax på bukspyttkjertelen tumor xenograft modell.
Protocol
1. Injisere blandet celle suspensjon i sebrafisken Tilsett 10x trikainoppløsning i E3-vann for å bedøve sebrafisk larver og overføre larver (fra trinn 2.3) til injeksjonsplaten fylt av modifisert E3 (E3 med 1 g / L glukose og 5 mmol / L L-glutamin). Fyll 25 μL blandet celle suspensjon i mikro kapillærene nål og sett nålen inn i mikroinjeksjon manipulator. Still inn injeksjonstrykk og tid. Injiser 50-80 celler (~8 nL) i eggeplommesekken på 48 hk sebrafisk. …
Materials
| L-glutamine | GIBCO | 21051024 | |
| Gemcitabine | Gemzan | ||
| Methylcellulose | Sigma | M0262 | |
| Navitoclax(ABT-263) | Selleck | S1001 | Bcl-xL inhibitor |
| Equipment | |||
| Microinjector | NARISHIGE | ||
| Confocal Microscope | LEICA | SP8 | 0.00 |
Cite This Article
Zebrafish Patient-Derived Xenograft (zPDX): A Cancer Model. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20198, doi: (2023).