Ex vivo mekanisk belastning av senan

Summary

En ny in vitro-system för samtidig laddning fyra senor i kulturen beskrivs.

Abstract

Skador på senor (t.ex. handleden tendinit, epicondyltis) på grund av överanvändning är vanliga i idrottsaktiviteter och på arbetsplatsen. De flesta är förknippade med repetitiva, hög aktivitet kraft handen. Mekanismerna av cellulära och strukturella skador på grund av cykliska belastning är inte kända. Syftet med denna video är att presentera ett nytt system som samtidigt kan lasta fyra senor i vävnadskultur. I videon beskrivs metoderna för sterilt skörd och hur senor lastas på ett fastspänningssystem som sedan doppas i media och hålls vid 37 ° C. En klämma är fast medan den andra flyttas med ett linjärt ställdon. Senan dragkraften övervakas med en lastcell i serie med den mobila klämman. Ställdonen styrs med ett LabView-program. De fyra senor kan upprepade laddas med olika mönster av lastning, repetitionsfrekvens, lastnings-och längd. Fylla kan fortsätta några minuter till 48 timmar. I slutet av lastning, är de senor bort och mitten av substansen utvinns för biokemiska analyser. Detta system möjliggör för undersökning av effekterna av belastning mönster på genuttryck och strukturella förändringar i senan. I slutändan kan mekanismer för skador på grund av överanvändning vara studier med resultaten gäller för behandling och prevention.

Protocol

Tillägg media CO 2-oberoende medier med fetalt bovinserum, L-glutamin, antibiotika, och askorbinsyra Alikvotera 40 ml i 50 ml centrifugrör (1 för varje senan) Alikvotera 10 ml i 15 rör ml centrifugrör (1 för varje senan) Sterilisera kirurgiska instrument, lakan autoklav, pincetter och momentnyckel i autoklav Sterilisera klämmor och kraft tips mikrometer genom att blötlägga i 70% etanol över en natt Harvest senor från bakbenen av kaninen. Kanin borde ha dödshjälp …

Discussion

Videon presenterar ett nytt system för samtidig laddning av upp till fyra leva senor i vävnadskultur. Typiska lastning löptider är 2 till 48 timmar. Efter lastning, är de senor bort och behandlas för genuttryck. Systemet gör det möjligt för undersökning av effekten av lastning mönster på förändringar i gener associerade med degenerativa förändringar i senan. Dessa experiment kan ge lite insikt i mekanismer för skador i samband med repetitiva lastning. De ger också insikt i belastning som kan orsaka vävnadsskada. Ytterst k…

Materials

Custom 4 Linear Actuator loading system Warm water bath 50 ml tubes tendons (rabbit) Sterile media