माउस ब्रेन microcirculation के intravital माइक्रोस्कोपी एक बंद कपालीय विंडो का उपयोग
Summary
Intravital pial microcirculation में अस्थायी और स्थानिक hemodynamic और भड़काऊ घटनाओं का पालन माइक्रोस्कोपी.
Abstract
यह प्रयोगात्मक मॉडल के लिए तीव्र और जीर्ण, शारीरिक और pathophysiological hemodynamic, भड़काऊ और चयापचय की स्थिति के दौरान माउस pial microcirculation आकलन में vivo प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी में उपयोग के लिए डिजाइन किया गया था. एक बंद कपाल विंडो चूहों की बाईं parieto – पश्चकपाल प्रांतस्था पर रखा गया है. स्थानीय microcirculation महामारी और प्रतिदीप्ति रोशनी, और जहाजों के व्यास और लाल रक्त (आरबीसी) सेल वेग प्रदर्शन कर रहे हैं की माप का उपयोग कर खिड़की के माध्यम से वास्तविक समय में दर्ज की गई है. आरबीसी वेग वास्तविक समय पार सहसंबंध और / या फ्लोरोसेंट लेबल एरिथ्रोसाइट्स का उपयोग मापा जाता है. ल्युकोसैट और प्लेटलेट pial और जहाजों छिड़काव और संवहनी रिसाव के मूल्यांकन के लिए पालन albumin FITC और विरोधी CD45-TxR एंटीबॉडी के रूप में प्रतिदीप्ति लेबल मार्करों की मदद के साथ बना रहे हैं. Microcirculation बार – बार कई दिनों में वीडियो दर्ज कर सकते हैं. हम पहली बार करीब खिड़की मस्तिष्क intravital माइक्रोस्कोपी pial प्लाज्मोडियम berghei Anka संक्रमण के दौरान चूहों में गतिशील परिवर्तन का पालन करने और दिखाने कि मुख्यमंत्री की अभिव्यक्ति microcirculatory वाहिकासंकीर्णन द्वारा विशेषता dysfunctions के साथ जुड़ा हुआ है, रक्त में गहरा कमी microcirculation अध्ययन के लिए इस्तेमाल किया प्रवाह और अंततः संवहनी पतन.
Protocol
Discussion
intravital माइक्रोस्कोपी यहाँ वर्णित विधि माउस में pial microcirculation की विस्तृत अवलोकन के लिए एक अद्वितीय और शक्तिशाली उपकरण प्रदान करता है. यह जुमा व्यक्तिगत arterioles और venules और पोत व्यास, आरबीसी वेग, रक्त प्रवाह, पालन और leuko…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस काम अनुदान R01 HL87290, R01-HL87290-S1 और LJMC करने के लिए R01-AI082610 से राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान के द्वारा समर्थित किया गया था.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Isoflurane | Baxter | FDG9623 | ||
| Carbocyanine dye Dil | Molecular Probes | D306 | ||
| Albumin-FITC | Sigma-Aldrich | A9771 | ||
| Anti-CD45-TxR Ab | Invitrogen | MCD4517 | ||
| P. berghei ANKA-GFP | MR4 | MRA-865 |
References
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