Summary

技术收集人舌菌状(味道)乳头

Published: September 18, 2010
doi:

Summary

基本味觉转导的分子机制方面的知识最近享受到了重大进展,主要是由于使用动物模型。然而,在味觉的灵敏度和特异性哺乳动物认股权证在人体组织的研究广泛​​的多样性。我们描述了一个活检技术,收集从对人舌乳头的生活品位细胞。

Abstract

味觉是人类生活的关键。通知将潜在摄入的食物质量的身体和刺激,准备消化道的消化代谢过程。对了解早期生物化学和分子事件的基本味道传导(检讨,布雷斯林和斯佩克特,2008年1)正在取得稳步进展。然而,迄今取得的进展在很大程度上导致动物模型。然而,由于在受体特异性和受体密度显着差异有所不同物种之间,人类的味道传导只会被理解,使用人类的味道组织。在这里,我们描述了一个活检技术,人类菌状乳头,可见圆形粉红色的前结构,收集包含味蕾直径约0.5毫米。这些切片乳头被用于多种用途,包括可行的味蕾细胞的分离 ,原位杂交,免疫组织化学,并通过分子生物学技术的,识别特定味道的新型蛋白质。

Protocol

1。介绍和一般注意事项一般程序包括一个小的(1厘米2)面积的前舌背表面,去除一个(6-8)(味)的菌状乳头的数量,麻醉面积使用一个弯曲的弹簧微局部麻醉 – 剪刀(麦弗逊式Vannas类型#简5603,Roboz,罗克维尔,医学博士)。删除的菌状乳头约0.25 毫米的 3个。有很少的非乳头(味道)去除上皮组织的每个乳头。新乳头的形式,在这一领域经过3至5个星期,…

Discussion

使用人体细胞的一个显着的优势是其特殊性。在这里详细介绍的过程提供了来自人类的味觉受体细胞的分离舌组织。这些味觉细胞,可用于分子生物学研究,试图发现味觉信息传导的重要分子,监测活动,以刺激味觉细胞的钙成像研究。此外,此过程中提供的舌组织可与各种技术, 如原位杂交免疫组织化学分析,并允许捕捉如聚合酶链反应(PCR)技术,包括实时定量单细胞PCR的分…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

这项工作是支持由美国国立卫生研究院R21 DC03969 – 01(日本国)。我们感谢弗里茨Lischka博士捕获RT – PCR检测显示在图4B和先生,贝利和S.女士阿拉尔孔技术援助执行单一的味蕾细胞,博士Tauf Huque。 M.亚尼纳Pepino是一个NIDAT32 DA07313华盛顿大学医学院,圣路易斯,MO(Cottler,LB PI)支持的一个老乡。

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
McPherson-Vannas. Curved, sharp cutting edge 5mm. Comb, tip width 0.2 mm overall length 3″   Roboz Surgical Instruments Co., Inc. Gaithersburg, MD 20898 RS-5603, Roboz  
Small Dumont forceps   Roboz Surgical Instruments Co. RS-4915, Roboz  

References

  1. Breslin, P. A., Spector, A. C. Mammalian taste perception. Curr Biol. 26 (4), R148-R155 (2008).
  2. Miller, I., Doty, R. I., Dekker, M. Anatomy of the peripheral taste system. Handbook of Olfaction and Gustation. , 521-547 (1995).
  3. . Figure 12.67. Gray’s Anatomy: The Anatomical Basis of Medicine and Surgery. , (1995).
  4. Huque, T., Cowart, B. J., Dankulich-Nagrudny, L., Pribitkin, E. A., Bayley, D. L., Spielman, A., Feldman, I., S, R., Mackler, . Sour ageusia in two individuals implicates ion channels of the ASIC and PKD families in human sour taste perception at the anterior tongue. PLoS One. 4 (10), e7347-e7347 (2009).
  5. MacDonald, J. F., Mody, I., Salter, M. W., Spielman, A. I., Spielman, A. I., Brand, J. G. Patch-clamping of taste cells in mouse. Experimental Cell Biology of Taste and Olfaction. , 329-332 (1995).

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Cite This Article
Spielman, A. I., Pepino, M. Y., Feldman, R., Brand, J. G. Technique to Collect Fungiform (Taste) Papillae from Human Tongue. J. Vis. Exp. (42), e2201, doi:10.3791/2201 (2010).

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