Technique pour collecter des fongiformes (goût) Papilles de la langue de l'homme
Summary
La connaissance des mécanismes moléculaires sous-jacents de transduction gustative a récemment connu des avancées significatives, en grande partie due à l'utilisation de modèles animaux. Cependant, la grande diversité de la sensibilité gustative et la spécificité des études de mammifères justifie dans les tissus humains. Nous décrivons une technique de biopsie pour collecter les cellules gustatives de vie des papilles sur la langue humaine.
Abstract
Le sens du goût est essentiel pour la vie humaine. Il informe l'organisme sur la qualité des aliments qui seront potentiellement ingérée et stimule les processus métaboliques qui préparent le tube digestif pour la digestion. Des progrès constants ont été accomplis vers la compréhension des événements précoces biochimiques et moléculaires sous-jacents transduction du goût (pour une revue, Breslin et Spector, 2008 1). Toutefois, les progrès à ce jour a largement résulté de modèles animaux. Pourtant, depuis des différences marquées dans la spécificité du récepteur et de la densité des récepteurs varient selon les espèces, transduction du goût humaine ne sera compris en utilisant des tissus humains goût. Nous décrivons ici une technique de biopsie à recueillir humaine fongiformes papilles, visibles comme arrondies roses structures antérieures, d'environ 0,5 mm de diamètre qui contiennent les papilles. Ces papilles sont biopsiés utilisées à plusieurs fins, y compris l'isolement de cellules viables papilles, l'hybridation, l'immunohistochimie in situ et, grâce à des techniques de biologie moléculaire, l'identification de nouvelles protéines goût spécifique.
Protocol
Discussion
Un avantage notable à partir de cellules humaines est leur spécificité. La procédure décrite ici en détail fournit des tissus langue pour l'isolement de cellules réceptrices de goût d'êtres humains. Ces cellules du goût peut être utilisé pour des études moléculaires, cherchant à découvrir des molécules importantes pour la transduction des informations goût, et pour les études d'imagerie calcique qui surveillent l'activité des cellules du goût à des stimuli. En outre, les tissus lang…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ce travail a été soutenu par le NIH R21 DC03969-01 (au JGB). Nous remercions le Dr Fritz Lischka pour capturer des cellules simples papilles, le Dr Tauf Huque pour réaliser la RT-PCR de la figure 4B et Monsieur D. Bayley et Mme S. Alarcon d'assistance technique. M. Yanina pépino est un homme soutenu par un NIDAT32 DA07313 Washington University School of Medicine, St Louis, MO (Cottler, LB PI).
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| McPherson-Vannas. Curved, sharp cutting edge 5mm. Comb, tip width 0.2 mm overall length 3″ | Roboz Surgical Instruments Co., Inc. Gaithersburg, MD 20898 | RS-5603, Roboz | ||
| Small Dumont forceps | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-4915, Roboz |
References
- Breslin, P. A., Spector, A. C. Mammalian taste perception. Curr Biol. 26 (4), R148-R155 (2008).
- Miller, I., Doty, R. I., Dekker, M. Anatomy of the peripheral taste system. Handbook of Olfaction and Gustation. , 521-547 (1995).
- . Figure 12.67. Gray’s Anatomy: The Anatomical Basis of Medicine and Surgery. , (1995).
- Huque, T., Cowart, B. J., Dankulich-Nagrudny, L., Pribitkin, E. A., Bayley, D. L., Spielman, A., Feldman, I., S, R., Mackler, . Sour ageusia in two individuals implicates ion channels of the ASIC and PKD families in human sour taste perception at the anterior tongue. PLoS One. 4 (10), e7347-e7347 (2009).
- MacDonald, J. F., Mody, I., Salter, M. W., Spielman, A. I., Spielman, A. I., Brand, J. G. Patch-clamping of taste cells in mouse. Experimental Cell Biology of Taste and Olfaction. , 329-332 (1995).
