تمتعت معرفة الآليات الجزيئية الكامنة وراء تنبيغ ذوقي مؤخرا تقدما كبيرا ، إلى حد كبير بسبب استخدام النماذج الحيوانية. ومع ذلك ، فإن التنوع الواسع في حساسية الذوق والنوعية بين الدراسات أوامر الثدييات في الأنسجة البشرية. وصفنا تقنية خزعة لجمع الخلايا الحية من طعم حليمات اللسان على الإنسان.
Abstract
حس الذوق أمر بالغ الأهمية للحياة البشرية. أن يبلغ الهيئة عن نوعية الأطعمة التي سيتم تناولها ويحتمل أن يحفز عمليات التمثيل الغذائي التي تعد القناة الهضمية للهضم. ويجري إحراز تقدم مطرد نحو فهم الأحداث البيوكيميائية والجزيئية الكامنة في وقت مبكر تنبيغ الذوق (للمراجعة ، وبريسلين سبيكتور ، 2008 1). ومع ذلك ، فقد أدى التقدم المحرز حتى الآن إلى حد كبير من النماذج الحيوانية. حتى الآن ، لأن الاختلافات الواضحة في نوعية وكثافة مستقبلات مستقبلات تختلف بين الأنواع ، لن الإنسان طعم تنبيغ أن يفهم باستخدام الأنسجة البشرية الذوق. نحن هنا وصف الأسلوب خزعة لجمع كمئي الحليمات البشرية وظاهرة للعيان وتقريب الهياكل الأمامية الوردي ، ونحو 0.5 مليمتر في القطر التي تحتوي على براعم الذوق. وتستخدم هذه الحليمات الخزعة لأغراض عدة بما في ذلك عزل خلايا قابلة للحياة طعم برعم ، في الموقع المناعية ، والتهجين ، من خلال تقنيات البيولوجيا الجزيئية ، وتحديد البروتينات الرواية طعم خاص.
Protocol
1. مقدمة واعتبارات عامة الإجراء عامة ينطوي التخدير الموضعي لمنطقة (1 سم 2) صغير من السطح الظهري الأمامي من اللسان ، تليها إزالة عدد (6-8) من كمئي (الذوق) الحليمات من تلك المنطقة تخدير باستخدام المنحني الدقيقة الربيع – المقص (ماكفر?…
Discussion
ميزة واحدة بارزة لاستخدام الخلايا البشرية وخصوصيتها. الإجراء الموصوفة هنا بالتفصيل يوفر الأنسجة اللسان لعزل الخلايا مستقبلات التذوق من البشر. ويمكن استخدام هذه الخلايا طعم للدراسات الجزيئية ، والتي تسعى إلى اكتشاف جزيئات هامة للإنتقال المعلومات طعم ، والتصوير للد…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة DC03969 R21 – 01 (لJGB). نشكر الدكتور فريتز Lischka لالتقاط الخلايا وحيدة براعم التذوق ، والدكتور زاهد الحق Tauf لأداء RT – PCR هو مبين في الشكل 4B ، والسيد والسيدة د. بايلي الاركون S. للمساعدة التقنية. M. يانينا Pepino زميل مدعومة DA07313 NIDAT32 كلية الطب بجامعة واشنطن ، سانت لويس ، MO (كوتلر ، LB PI).
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
McPherson-Vannas. Curved, sharp cutting edge 5mm. Comb, tip width 0.2 mm overall length 3″
Roboz Surgical Instruments Co., Inc. Gaithersburg, MD 20898
MacDonald, J. F., Mody, I., Salter, M. W., Spielman, A. I., Spielman, A. I., Brand, J. G. Patch-clamping of taste cells in mouse.Experimental Cell Biology of Taste and Olfaction. , 329-332 (1995).
Spielman, A. I., Pepino, M. Y., Feldman, R., Brand, J. G. Technique to Collect Fungiform (Taste) Papillae from Human Tongue. J. Vis. Exp. (42), e2201, doi:10.3791/2201 (2010).