Summary

人間の舌から茸(味)乳頭を収集する手法

Published: September 18, 2010
doi:

Summary

味覚伝達の分子メカニズムの知識は、最近、主な原因動物モデルを使用して、大きな進歩を遂げました。しかしながら、ヒト組織における哺乳類のワラントの研究間の味の感度と特異性の広い多様性。私たちは、人間の舌で乳頭からの生活の味細胞を収集するために生検の手法を説明します。

Abstract

味の感覚は、人間の生活にとって非常に重要です。それは潜在的に摂取される食品の品質について、身体を通知し、消化のために消化管を準備する代謝プロセスを刺激する。着実な進歩は、味覚変換を(確認のため、Breslinさんとスペクター、2008年)の基礎となる初期の生化学的および分子事象の理解に向けて作られている。しかし、現在までの進捗状況は、主に動物モデルに起因している。まだ、受容体の特異性と受容体密度の著しい違いが種間で異なるため、人間の味覚変換は、人間の味覚組織を使用することによって理解されるであろう。ここでは、味蕾を含む直径約0.5mm角の丸いピンクの前部構造など目に見える人間の茸状乳頭に、、収集する生検法を説明します。これらの生検乳頭は、in situハイブリダイゼーション、免疫組織化学実行可能な味蕾細胞の分離、そして、分子生物学の技法により、味に固有の新規タンパク質の同定を含む、いくつかの目的のために使用されています。

Protocol

1。導入と一般的な考慮事項一般的な手順は、湾曲したバネマイクロを使用して、その麻酔領域から茸(味)乳頭の数(6-8)の除去に続いて前方舌の背側表面の小さな(1cm 2の )領域、の局所麻酔を行います – はさみ(マクファーソン- Vannasタイプ#SR 5603、Roboz、ロックビル、MD)。削除された茸状乳頭は、約0.25 mm 3にそれぞれです。各乳頭と共に除去はほ?…

Discussion

ヒト細胞を使用する1つの顕著な利点は、それらの特異性です。詳細にここで説明する手順は、人間からの味覚受容体細胞の単離のための舌組織を提供します。これらの味細胞は味覚情報の伝達のための重要な分子を発見しようとする、分子の研究に使用し、刺激する味細胞の活動を監視するカルシウムイメージング研究のために。することができますさらに、このプロシージャによって提供…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

この作品は、NIH R21 DC03969 – 01(国債の)によってサポートされていました。我々は技術支援については、図4Bと氏D.ベイリー氏とS.アラルコンに示すようにRT – PCRを行うための単一味蕾細胞、博士Tauf Huqueを取り込むための博士フリッツリシュカに感謝。 M.ヤペピーノは、医学のNIDAT32 DA07313ワシントン大学、セントルイス、MO(Cottler、LB PI)によってサポートされている仲間です。

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
McPherson-Vannas. Curved, sharp cutting edge 5mm. Comb, tip width 0.2 mm overall length 3″   Roboz Surgical Instruments Co., Inc. Gaithersburg, MD 20898 RS-5603, Roboz  
Small Dumont forceps   Roboz Surgical Instruments Co. RS-4915, Roboz  

References

  1. Breslin, P. A., Spector, A. C. Mammalian taste perception. Curr Biol. 26 (4), R148-R155 (2008).
  2. Miller, I., Doty, R. I., Dekker, M. Anatomy of the peripheral taste system. Handbook of Olfaction and Gustation. , 521-547 (1995).
  3. . Figure 12.67. Gray’s Anatomy: The Anatomical Basis of Medicine and Surgery. , (1995).
  4. Huque, T., Cowart, B. J., Dankulich-Nagrudny, L., Pribitkin, E. A., Bayley, D. L., Spielman, A., Feldman, I., S, R., Mackler, . Sour ageusia in two individuals implicates ion channels of the ASIC and PKD families in human sour taste perception at the anterior tongue. PLoS One. 4 (10), e7347-e7347 (2009).
  5. MacDonald, J. F., Mody, I., Salter, M. W., Spielman, A. I., Spielman, A. I., Brand, J. G. Patch-clamping of taste cells in mouse. Experimental Cell Biology of Taste and Olfaction. , 329-332 (1995).

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Cite This Article
Spielman, A. I., Pepino, M. Y., Feldman, R., Brand, J. G. Technique to Collect Fungiform (Taste) Papillae from Human Tongue. J. Vis. Exp. (42), e2201, doi:10.3791/2201 (2010).

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