Summary

인간 혀에서 Fungiform (맛) 용의자를 수집하는 기술

Published: September 18, 2010
doi:

Summary

gustatory 전달을 기본 분자 메커니즘의 지식은 최근에 크게 인해 동물 모델을 사용하는, 상당한 발전을 즐기고있다. 그러나, 인간의 조직에있는 포유류 영장 연구 중에서 맛이 감도 및 특이성의 넓은 다양성. 우리는 인간의 혀 용의자의 생활 미각 세포를 수집하는 생검 방법을 설명합니다.

Abstract

맛의 감각은 인간 생활에 중요합니다. 그것은 잠재적으로 섭취한다 음식의 품질에 대한 본문을 알리고 소화에 대한 영양의 운하를 준비 신진 대사 과정을 자극. 꾸준한 진행 맛을 전달을 (검토를 위해, 브레슬린과 스펙터 2008 1) 기본 초기 생화학 및 분자 이벤트를 이해하는 방향으로 만들어지고있다. 그러나, 현재까지 진행 주로 동물 모델에서 발생했습니다. 수용체의 특이성과 수용체 밀도에 표시된 차이가 종 가운데 다르므 그러나, 인간의 맛을 전달은 인간의 미각 조직을 사용하여 이해합니다. 여기 우리는 입맛을 포함 직경 0.5 mm에 대한 반올림 핑크 앞쪽에 구조로 보이는 인간 fungiform 용의자를 수집하는 생검 방법을 설명합니다. 이러한 biopsied 용의자는 현장 하이브리드화, immunohistochemistry에서 가능한 미뢰 세포의 분리, 그리고 분자 생물학의 기술을 통해 맛을 특정 소설 단백질의 식별을 포함하여 여러 목적으로 사용됩니다.

Protocol

1. 소개 및 일반 고려 사항 일반적인 절차는 곡선 봄 마이크로를 사용하는 것을 anesthetized 지역에서 fungiform (미각) 용의자의 숫자 (6-8)의 제거 다음에 앞쪽에 혀 등의 표면의 작은 (1cm 2) 영역의 국소 마취를 포함 – 가위 (맥퍼슨 – Vannas 타입 SR # 5603, Roboz, 락빌, MD). 삭제 fungiform 용의자는 약 0.25 mm 3 각 수 있습니다. 각각의 유두와 함께 제거는 거의하지 않는 용의자 …

Discussion

인간의 세포를 사용하는 한 가지 주목할만한 장점은 자신의 특이성이다. 상세 여기에서 설명한 절차는 인간의 미각 수용체 세포의 격리를 위해 혀 조직을 제공합니다. 이러한 미각 세포가 미각 정보 전달에 중요한 분자를 발견하려는, 분자 연구에 사용하고, 자극에 맛을 세포 활동을 모니터링 칼슘 이미징 연구. 수 있습니다 또한,이 절차에 의해 제공 혀 조직은 현장 하이브리드화 이러?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

이 작품은 NIH R21 DC03969 – 01 (JGB)을 지원했다. 우리는 기술 지원을 그림 4B 씨와 D. 베일리 부인과 S. Alarcon에 표시된 RT – PCR을 수행하기위한 하나의 미뢰 세포 박사 Tauf Huque를 캡처 박사 프리츠 Lischka 감사합니다. M. 야니나 Pepino는 의학의 NIDAT32 DA07313 워싱턴 대학 학교, 세인트 루이스, MO (Cottler, LB PI)에 의해 지원하는 사람입니다.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
McPherson-Vannas. Curved, sharp cutting edge 5mm. Comb, tip width 0.2 mm overall length 3″   Roboz Surgical Instruments Co., Inc. Gaithersburg, MD 20898 RS-5603, Roboz  
Small Dumont forceps   Roboz Surgical Instruments Co. RS-4915, Roboz  

References

  1. Breslin, P. A., Spector, A. C. Mammalian taste perception. Curr Biol. 26 (4), R148-R155 (2008).
  2. Miller, I., Doty, R. I., Dekker, M. Anatomy of the peripheral taste system. Handbook of Olfaction and Gustation. , 521-547 (1995).
  3. . Figure 12.67. Gray’s Anatomy: The Anatomical Basis of Medicine and Surgery. , (1995).
  4. Huque, T., Cowart, B. J., Dankulich-Nagrudny, L., Pribitkin, E. A., Bayley, D. L., Spielman, A., Feldman, I., S, R., Mackler, . Sour ageusia in two individuals implicates ion channels of the ASIC and PKD families in human sour taste perception at the anterior tongue. PLoS One. 4 (10), e7347-e7347 (2009).
  5. MacDonald, J. F., Mody, I., Salter, M. W., Spielman, A. I., Spielman, A. I., Brand, J. G. Patch-clamping of taste cells in mouse. Experimental Cell Biology of Taste and Olfaction. , 329-332 (1995).

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Cite This Article
Spielman, A. I., Pepino, M. Y., Feldman, R., Brand, J. G. Technique to Collect Fungiform (Taste) Papillae from Human Tongue. J. Vis. Exp. (42), e2201, doi:10.3791/2201 (2010).

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