Teknik för att samla Fungiform (smak) papiller från Human Tongue
Summary
Kunskap om molekylära mekanismer som ligger bakom smak transduktion har nyligen haft betydande framsteg, mycket tack vare hjälp av djurmodeller. Men den stora mångfalden i smak sensitivitet och specificitet hos däggdjur teckningsoptioner studier i mänsklig vävnad. Vi beskriver en biopsi tekniken för att samla in celler lever smak från papiller om mänskliga tungan.
Abstract
Den smaksinne är avgörande för mänskligt liv. Den informerar kroppen om kvaliteten på maten som kommer att vara potentiellt intas och stimulerar metaboliska processer som förbereder matsmältningskanalen för matsmältningen. Stadiga framsteg har gjorts för att förstå den tidiga biokemiska och molekylära händelser underliggande smak transduktion (för en översyn, Breslin och Spector, 2008 1). Framstegen har dock hittills berodde främst på djurmodeller. Men eftersom stora skillnader i receptor specificitet och receptor tätheten varierar mellan arter, kommer mänskligt smaka transduktion bara förstås genom att använda mänskliga smak vävnad. Här beskriver vi en biopsi tekniken för att samla människor fungiform papiller, syns som runda rosa främre strukturer, ca 0,5 mm i diameter som innehåller smaklökar. Dessa biopsier papiller används för flera syften, inklusive isolering av livskraftiga celler smaklökar, in situ hybridisering, immunohistokemi och genom tekniker för molekylärbiologi, identifiering av smak-specifika nya proteiner.
Protocol
Discussion
En anmärkningsvärd fördel med att använda mänskliga celler är deras specificitet. Det förfarande som beskrivs här i detalj ger tungan vävnad för isolering av celler smak receptorer från människa. Dessa smaka celler kan användas för molekylära studier och försöker upptäcka molekyler viktigt för transduktion av smak information och kalcium imaging studier som övervakar aktiviteten smak cell till stimuli. Dessutom kan tungan vävnad som detta förfarande analyseras med olika tekniker såsom immunohistok…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Detta arbete stöddes av NIH R21 DC03969-01 (till JGB). Vi tackar Dr Fritz LISCHKA för att fånga upp enskilda celler smaklökar, Dr Tauf Huque för att utföra RT-PCR visas i figur 4B och Mr D. Bayley och Ms S. Alarcon för tekniskt stöd. M. Yanina Pepino är en karl som stöds av en NIDAT32 DA07313 Washington University School of Medicine, St Louis, MO (Cottler, LB PI).
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| McPherson-Vannas. Curved, sharp cutting edge 5mm. Comb, tip width 0.2 mm overall length 3″ | Roboz Surgical Instruments Co., Inc. Gaithersburg, MD 20898 | RS-5603, Roboz | ||
| Small Dumont forceps | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-4915, Roboz |
References
- Breslin, P. A., Spector, A. C. Mammalian taste perception. Curr Biol. 26 (4), R148-R155 (2008).
- Miller, I., Doty, R. I., Dekker, M. Anatomy of the peripheral taste system. Handbook of Olfaction and Gustation. , 521-547 (1995).
- . Figure 12.67. Gray’s Anatomy: The Anatomical Basis of Medicine and Surgery. , (1995).
- Huque, T., Cowart, B. J., Dankulich-Nagrudny, L., Pribitkin, E. A., Bayley, D. L., Spielman, A., Feldman, I., S, R., Mackler, . Sour ageusia in two individuals implicates ion channels of the ASIC and PKD families in human sour taste perception at the anterior tongue. PLoS One. 4 (10), e7347-e7347 (2009).
- MacDonald, J. F., Mody, I., Salter, M. W., Spielman, A. I., Spielman, A. I., Brand, J. G. Patch-clamping of taste cells in mouse. Experimental Cell Biology of Taste and Olfaction. , 329-332 (1995).
