Summary

İnsan Dil Mantar (Tat) papilla toplayın Tekniği

Published: September 18, 2010
doi:

Summary

Bilgi tat transdüksiyon altında yatan moleküler mekanizmaları son zamanlarda büyük ölçüde hayvan modelleri kullanarak, önemli gelişmeler kazanmıştır. Ancak, insan doku memeliler garanti çalışmalar arasında tat duyarlılığı ve özgüllüğü çeşitliliği. Biz insan dil üzerinde papilla yaşam tat hücreleri toplamak için biyopsi tekniği açıklar.

Abstract

Tat duygusu, insan hayatı için kritik öneme sahiptir. Bu vücudu potansiyel yutulur gıda kalitesi hakkında bilgilendirir ve sindirim için sindirim kanalı hazırlamak metabolik süreçleri harekete geçirir. Sabit ilerleme tat transdüksiyon (bir inceleme için, Breslin ve Spector, 2008 1) erken biyokimyasal ve moleküler olayların altında yatan anlayış doğru yapılmaktadır. Ancak, bugüne kadar kaydedilen ilerleme, büyük ölçüde hayvan modellerinde yol açmıştır. Ancak, reseptör özgüllüğü ve reseptör yoğunluğu belirgin farklılıklar, türler arasında değişiklik gösterir, insan tat transdüksiyon sadece insan tat doku kullanarak anlaşılmış olacaktır. Burada tat tomurcukları içeren çapı yaklaşık 0,5 mm yuvarlak pembe anterior yapılar gibi görünür insan mantarbiçim papilla, toplamak için bir biyopsi tekniği açıklar. Bu biyopsi papilla in situ hibridizasyon, immünhistokimya yaşayabilir tat tomurcuğu hücrelerinin izolasyonu ve moleküler biyoloji teknikleri ile, tat-özel yeni proteinlerin belirlenmesi de dahil olmak üzere birçok amaç için kullanılmaktadır.

Protocol

1. Giriş ve Genel Hususlar Genel prosedür ön dilin dorsal yüzeyi kavisli bir bahar mikro kullanarak bu anestezi alan mantarbiçim (tat) papilla bir sayı (6-8) kaldırılması ile takip (1 cm 2) küçük bir alanda, lokal anestezi gerektirir -makas (McPherson-tipi Vannas # SR 5603, Roboz, Rockville, MD). Kaldırıldı mantarbiçim papilla yaklaşık 0.25 mm 3 adet. Her bir papilla ile birlikte çıkarılır çok az olmayan papilla (tat) epitel doku vardır. Yeni papil…

Discussion

Bir önemli avantajı, insan hücreleri kullanarak, kendi özgünlüklerini. Burada ayrıntılı olarak açıklanan prosedürü insandan tat reseptör hücrelerinin izolasyonu için dil doku sağlar. Bu tat hücreleri tat bilgisini transdüksiyonu için önemli molekülleri keşfetmek isteyen moleküler çalışmalar için kullanılan, kalsiyum görüntüleme çalışmaları uyaranlara tat hücre aktivitesini izlemek için olabilir Ayrıca, bu yordamı tarafından sağlanan dil doku in situ hibridizasyon gibi i…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Bu çalışma NIH DC03969 R21-01 (JGB) tarafından desteklenmiştir. Biz, teknik yardım için Şekil 4B ve Sayın D. Bayley ve Bayan S. Alarcon gösterilen RT-PCR gerçekleştirmek için, tek bir tat tomurcuğu hücreleri, Dr. Tauf Huque yakalamak için Dr. Fritz Lischka teşekkür ederim. M. Yanina Pepino Tıp NIDAT32 DA07313 Washington Üniversitesi, St Louis, MO (Cottler LB PI) tarafından desteklenen bir adam.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
McPherson-Vannas. Curved, sharp cutting edge 5mm. Comb, tip width 0.2 mm overall length 3″   Roboz Surgical Instruments Co., Inc. Gaithersburg, MD 20898 RS-5603, Roboz  
Small Dumont forceps   Roboz Surgical Instruments Co. RS-4915, Roboz  

References

  1. Breslin, P. A., Spector, A. C. Mammalian taste perception. Curr Biol. 26 (4), R148-R155 (2008).
  2. Miller, I., Doty, R. I., Dekker, M. Anatomy of the peripheral taste system. Handbook of Olfaction and Gustation. , 521-547 (1995).
  3. . Figure 12.67. Gray’s Anatomy: The Anatomical Basis of Medicine and Surgery. , (1995).
  4. Huque, T., Cowart, B. J., Dankulich-Nagrudny, L., Pribitkin, E. A., Bayley, D. L., Spielman, A., Feldman, I., S, R., Mackler, . Sour ageusia in two individuals implicates ion channels of the ASIC and PKD families in human sour taste perception at the anterior tongue. PLoS One. 4 (10), e7347-e7347 (2009).
  5. MacDonald, J. F., Mody, I., Salter, M. W., Spielman, A. I., Spielman, A. I., Brand, J. G. Patch-clamping of taste cells in mouse. Experimental Cell Biology of Taste and Olfaction. , 329-332 (1995).

Play Video

Cite This Article
Spielman, A. I., Pepino, M. Y., Feldman, R., Brand, J. G. Technique to Collect Fungiform (Taste) Papillae from Human Tongue. J. Vis. Exp. (42), e2201, doi:10.3791/2201 (2010).

View Video