우리는 생쥐에서 모델을 하역 alternant hindlimb을 개발했습니다. 종래의 모리 – 홀턴 꼬리 – 견인 기술을 통해 우리 hindlimb 하역 테일 링 방식의 주요 장점은 동물에 스트레스를 최소화하는 간단한 간단한 절차입니다.
모리 – 홀턴 hindlimb 하역 (HU) 메소드는 널리 인정 국립 항공 우주국 (NASA) 설치류 4-6으로 쓰지 않음 – 위축을 공부를위한 지상 기반의 모델입니다. 우리의 연구는 생쥐의 황금 표준 모리 – 홀턴 HU 꼬리 – 견인 기술로 alternant 방법을 평가했다. 피프티 개 여성 생쥐 (4-8 모.) 14 일 동안 HU (n은 = 34) 또는 28일 (n은 = 20)했다. HU에서 복구 HU (n은 = 22) 다음과 같은 일반적인 케이지 ambulation 3 일 후에 평가되었다. 세 일치하는 생쥐 (N = 76) 무게 – 베어링 컨트롤을 역임했습니다.
이전 HU에 꼬리 반지는 5 일, 6 일 또는 7 일 간 척추 디스크 공간 통과하고 생쥐가 일시 중지되었습니다하는 고리 모양으로되었다 2-0 살균 수술 강철 와이어로 형성되었다. 꼬리 링을위한 척추 위치를 적절하게 깨끗하게 함 방해하지 않고 동물의 체중의 균형을 위해 선택되었다.
우리는 HU, soleus 위축의 정도, 그리고 부신 대량 다음 HU 전후의 체중을 평가하여이 소설 HU 기술의 성공을 결정. 이전 HU (24.3 ± 2.9g)에 쥐의 체중은 크게 (24.0 ± 1.8g) HU의 14d (22.7 ± 1.9g), HU의 28d (21.3 + 2.1g) 후 3 일 복구 직후 감소하지 않았 . Soleus 근육 질량은 크게 각각 십사일 28 일 동안 HU (P는 <0.001) 다음 (-39.1 %, -46.6 및 %) 감소했다. 복구 soleus의 질량에 따라 3 일 크게 제어 값의 74 %로 증가했다. HU 마우스의 부신 체중 조절 마우스에 비해 다양한되지 않았습니다.
우리 소설 HU 방법의 성공은 기대 문학 값에 해당 HU, 2, 7, 8 다음 동물 체중, 비교 부신의 무게와 soleus 위축의 유지 보수에 의해 입증됩니다. 이 HU 방법의 주요 장점은 다음과 같습니다 서스펜션 동안 꼬리 시험 1) 용이성, 2) 자주 꼬리 – 찍어 HU와 관찰 청색증, 염증, 및 / 또는 괴사성 꼬리의 가능성을 감소, 3) 마우스의 가능성은 견인을 씹는 없습니다 테이프 및 정지 장치 나오는, 바로 HU 후 4) 신속한 복구 및 정상 케이지 활동.
우리는 매우 성공적인 것으로 판단 hindlimb 하역 생쥐의 대체 방법을 평가했다. 여기에 설명된 꼬리 링 방법은 장기 hindlimb 서스펜션에 사용되었고, 복구 다음 HU를 연구하기 위해 서요. 이러한 조건의 각에서 안정적인 음식 섭취, 신체 중량과 생쥐의 부신 무게에 의해 입증으로 적응 실패의 증거가 없었다. 이 꼬리 링 HU 기술은 수행하는 간단하고 쉽게 아주 작은 수술 연습 포함될 수 있습니다.
전통 모리 – 홀턴 5, 6 방법에 비해 꼬리 링 방식의 몇 가지 장점이 있습니다. 문제는 그것이 정학 기간의 끝에, 그냥 바로 분명하지 발생한다면 첫째, 그 꼬리에있는 피부와 고리 주입 사이트는 항상 볼 수 있습니다. 둘째, 동물은 데이터 집합에서 마우스 또는하지를 유지할지 여부를 결정하기 위해 필요 obviating, HU 동안 언제든지 정지 장치 나갈 수 없습니다. 또한, 마우스는 반지 장치 방해하지 않고 그들이 복구를 위해 HU에서 출시 때, 그들은 HU에 따라 완벽한 복구 단계에 대한 수 있도록, 그들의 꼬리로 조작하지 않습니다. 마지막으로, 꼬리 링 방식 hindlimb 하역 생쥐는 모리 – 홀턴 꼬리 – 견인 기술에 의해 언로 드 쥐 hindlimb보다 자신의 체중을 유지합니다. 우리 손에 HU 14 일 이후 우리는 신체 – 질량에있는 작은 (-6.8 %)하지만, 이외의 상당한 손실을 관찰했다. 잉갈스 외가. 모리 – 홀턴 방법 3 HU 날로부터 14 일 후 마우스의 체중에서 상당한 -12 %의 감소를 관찰 반면. 잉갈스은 부신 무게를 신고하지 못했지만, 우리의 꼬리 링 방법은 마우스 (우리 HU 마우스의 부신 무게가 컨트롤 다를되지 않습니다)과 hindlimb 내리기 기간 동안 체중보다 관리에 덜 스트레스를 수여가 나타납니다.
요약, hindlimb 하역의 꼬리 링 방법 개발, 14 및 28 일 동안 생쥐 HU에서 테스트하고, 생쥐에 대한 HU 후 3 일 동안 케이지 회복으로 반환되었습니다. 부신 무게, 신체 질량 및 식품 섭취량을 바탕으로, 생쥐는 꼬리 링 장치에 잘 적응하도록 나타납니다. 방법을 하역 꼬리 링 hindlimb은 전통 모리 – 홀턴 hindlimb 하역 기술에 대한 유용하고 간단한 대안입니다.
The authors have nothing to disclose.
저자는 자신의 기술 지원과 동물을 돌보는 위해 앤드류 J 던, 우리 연구실에 탁월한 연구 학부 학생을 감사드립니다. 건강 부여 HD058834와 미주리 생명 과학 원정대의 대학의 국립 연구소는이 작품을 후원.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
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Wire cutters/pliers | Ace Hardware | 84-056 | ||
Gauze | Fisher Scientific | 22-037-901 | ||
Heating pad | Sunbeam | Z-1228-001 | ||
Silver nitrate applicators | ARZOL | 0001-2 | ||
Isoflurane,USP | Novaplus | NDC 0409-3292-49 | ||
Chlorhexidine Gluconate 4% | Purdue Products L.P | NDC 67618-200-01 | ||
Sterile 2-0 surgical steel suture | Ethicon | SS-28 | ||
25 X 5/8 A gauge needle | Terumo | NN 2516R | ||
Hemostat/ needle holder | Fine Science Tools | 12500-12 | ||
Size 10-24 X 4 machine screws | Hillman The Fastener Center | 90272 | ||
Nylon lock nut size 10 X 24 | Hillman The Fastener Center | 180141 | ||
Wing nut size 10 X 24 | Hillman The Fastener Center | 180243 | ||
Fender Washer size ¼ X 1 | Hillman The Fastener Center | 290012 | ||
Fishing swivel with snap hook size #6, 1-11/16” | Bass Pro Shop | 38-481-554-01 | ||
Metal sewing machine bobbin. | Singer | 45785 | ||
Paper clip | Office Depot | 221720 | ||
2” black paper binder clamps. | Office Depot | 308957 | ||
Scotch Multi-Use Duct Tape | Office Depot | 790710 | ||
1-3/8” Plated slotted steel bar | Home Depot | 548932 | Extends slightly beyond the full length of the cage | |
50cm X 40cm X 20cm cage (rat cage | Alternative Design Manufacturing | RC88D-PC | ||
Water Bottle | Alternative Design Manufacturing | WB16FS | ||
Stainless Steel wire | Small Parts, Inc | SWX-4029 | U-shaped wire to support water bottle |