Summary
В этом докладе, мы предлагаем новое применение светоотверждаемых стоматологических смол для монтажа базе электродных или микродиализа зонды в хронических опытах. Этот материал позволяет осуществлять прямую связь с черепом.
Abstract
В хронических опытах записи, само-лечения стоматологических акриловых смол были использованы в качестве монтажной базы электродов или микродиализа-зондов. Так как эти акрил не связываться с костью, винты были использованы в качестве якоря. Тем не менее, в небольших экспериментальных животных, как зяблики или мыши, их черепа очень хрупкие и не может успешно провести якорей. В этом докладе, мы предлагаем новое применение светоотверждаемых стоматологических смол для монтажа базе электродных или микродиализа зонды в хронических опытах. Этот материал позволяет осуществлять прямую связь с черепом. Таким образом, анкерные болты не требуется и хирургическое поле может быть значительно снижена. Прошлый опыт показывает, что эффект сцепления поддерживает более 2 месяцев. Обычные окна смолы времени, когда материалы гибкой и работоспособным в течение нескольких минут. Тем не менее, окно рабочего времени для этих стоматологических адгезивов значительно шире и могут регулироваться.
Protocol
Шаг 1. Подготовка зонда имплантации
- Анестезия (не показано на видео)
Обезболить каждая птица с interperitoneal инъекции кетамина (12,5 мг / кг массы тела) и ксилазина (25 мг / кг) смеси для производства устойчивый уровень хирургической анестезии.
- Fix головы до стереотаксической кадра
Используйте Xylocaine (TM), желе, чтобы уменьшить местные боли давление уха баров. Глава птицы зафиксирован в стереотаксической аппарат, состоящий из уха баров и клюв держатель, который держит голову под углом 45 °. Во время стереотаксической хирургии для имплантации, теплое тело птицы хирургическим площадка с тепловым контролем (при температуре 34 ~ 36 ° C).
- Лечить хирургической области
Лечить операционного поля с isodine (TM) до хирургического вмешательства.
Шаг 2. Стереотаксической позиционирования
- Выравнивание Ориентир
Совместите манекен зонд (стеклянные микропипетки) для Lambda (Y-точка) и знак Y-точка с красителем заполненные пипетки. Оставшиеся Декстран-ПМР последнего исследования трассирующими был использован в видео.
- Разрез кожи
Удалить кожу и выставить поверхности черепа. Затем очистить поверхность черепа с ватные тампоны.
- Позиционирование манекен канюли (в горизонтальном направлении)
Перемещение манекена канюли на целевой сайт (AP оси и боковые координация)
- Малый трепанации черепа и разрез твердой мозговой оболочки.
Использование тонких щипцов для трепанации черепа и тонкой иглой для инъекций (30 G) для разреза твердой мозговой оболочки. Затем очистить поверхность черепа.
- Заключительные позиционирования (имплантация) подставных канюли
Найдите кончик канюли руководство на 0,30 мм выше микродиализа пробного предназначен регионе цель. Наконец, чистая поверхность черепа снова, потому что чистую и сухую поверхность требуется для жестких связей.
Шаг 3. Предварительная обработка поверхности черепа
(Аналогичная процедура для "прямого заполнения восстановление» стоматологической продукции должен быть использован.)
- Грунтовка лечения
- Смешайте PRIMAR жидкости с B на блюдо.
- Нанесите смесь на поверхности черепа с маленькой кистью.
- Оставьте на 30 секунд.
- Сухие с легкой воздушного потока. (Не стирать.)
- Применение связующего
- Применение связующего на поверхности черепа с маленькой кистью.
- Применить струю воздуха. (Не стирать.)
- Светло-лечение в течение 20 секунд.
Шаг 4. Монтаж композитной смолы
- Горы смолы с простым штопфер
Если обычная штопфер недоступен, микро-шпатель может быть использован вместо.
- Фотополимеризации
- Дополнительные установки
Дополнительная установка рекомендуется для обеспечения полной реакция смолы.
Для дополнительных монтажа, применяют связующего перед каждым монтажа.
- Mold композитные смолы и светоотверждаемых для окончательного твердения.
- Конец операции
Чистая хирургических области, применяются антибиотики (гентамицин мазь), и удалить животное от стереотаксической пламени. Затем, держать животное в термо-контролируемое камере (при температуре 33-35 ° С) для последующей анестезией восстановления.
Как показано на видео, не аномальное поведение наблюдалось ни в одном из животных на следующий день после операции.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
По сравнению с применением обычных само лечение акриловые смолы, введен метод имеет ряд важных преимуществ:
1. Прямая связь:
Я акриловые отверждения могут быть прикреплены к кости некоторое время, но оно не прилипает к кости. Таким образом, винты крепления должны исправить монтажное основание (см. Рисунок 2А). В противоположность этому, свет смолы отверждения могут связываться с костной прямо так винтов не требуется (Рис. 2В). Таким образом, размер монтажное основание может быть значительно снижена. Кроме того, легкие смол отверждение также придерживается некоторые металлы, если вы использовали "металла грунтовкой" с ним. Эта функция связывания переменной материалов позволяет широкий спектр применения.
На рисунке 2 показана имплантация с использованием обычных акриловых само лечение (в 2А) и имплантации с помощью светового отверждения клея смол (в 2B). В 2А, якорь винт для фиксации монтажного основания. В 2B, размер монтажное основание может быть значительно снижена из-за того, что свет смолы лечения придерживаться черепа и такие винты не требуются. 
Рисунок 2
2. Легкость в обращении:
Время обработки обычных смолы окна относительно короткий, в течение нескольких минут. Он имеет высокую текучесть и это не легко обрабатывать в первую очередь. Однако, как только началась химическая реакция, реакция ускоряется при экзотермических тепла и смол стало сложнее в короткие сроки. Время обработки окна для фотополимеризации смолы значительно шире и могут регулироваться. В основном, смолах поддерживать постоянную эластичность от начала и до момента, когда он легкий вылечить.
3. Реакция не генерирует тепла:
Лечение реакции твердения смолы экзотермической. Когда монтажное основание толстая, это тепло накапливается и может привести к повреждению тканей. Реакция отверждения смол свет не генерирует тепла и биосовместимого материала.
4. Ручной светодиодный свет:
Стоимость материалов и специального оборудования, как свет устройство может быть проблема. На рисунке 3, введем ручной светодиодный блок, который не будет стоить много. Это ручной свет единицу лечения могут быть использованы в качестве заменителей дорогие коммерческие устройства.
На рис.3 показана схема света устройства. Рис 3B показывает три светодиода клееного параллельно друг другу, и вставляется в держатель белый маркер доски. 
Рисунок 3 - Принципиальная схема (в) и фотографии (в В) ручной свет блок
Эта техника применима к хроническому имплантации электродов или микродиализа зонда в других экспериментальных животных, таких как рыбы, мыши, кролики, кошки и обезьяны.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Эксперименты были проведены в соответствии с руководящими принципами для экспериментов на животных мозга научный институт, RIKEN (RIKEN BSI-) и института животного комитет по этике одобрил их.
Acknowledgments
Мы благодарим наших коллег в RIKEN BSI-за их любезно поддерживает и плодотворной советы во время этой работы. Я хотел бы выразить искреннюю признательность профессору Сигэми Мори, профессор G бор Juh SZ, д-ра. Kiyoji Мацуяма, Каталин АК Кеши и гр г Dobolyi который посоветовал мне учиться микродиализа метод во время аспирантуру в Высшей Университета передовых исследований, Япония. Наконец, мы благодарим г-н Крис Sarnecky и доктор Akitsugu Такасу за их поддержку в видеозаписи.
Materials
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| Bengalese finches | Animal | Two adult male , Body weight: 14.2 g and 14.8 g | ||
| Microdialysis probe | Tool | EICOM | total weight of probe, guide cannula, cap nut and dental adhesive resin: 0.65 to 0.78 g. | |
| Light-cured dental adhesive resin system | Kuraray Medical Inc | +Light cured composite resin (CLEARFIL AP-X). +Dual-cure dental adhesive system with the self-etching primer and bonding agent (CLEARFIL Liner Bond IIΣ). | ||
| Surgical instruments | Stereotaxic frame, surgical microscope, thermal controlled surgical pad and thermal controlled recovery chamber. Plain plugger for handling composite resin. Microspatula or sharp curette to ablate periosteum and muscles.Injection syringe and needle (30G) for inducing anesthesia.Small scissors. Fine forceps for making small craniotomy. | |||
| Light-unit | Rolence Enterprise Inc | Ultra-Lite 500E | ||
| Microscope | Konan Medical | KOM300 | with C-mount adaptor | |
| 3- CCD camera | Tool | Hitachi | HV-D30 |
References
- Adell, A., Artigas, F. In vivo Brain microdialysis: Principles and applications. In Vivo Neuromethods: Neuromethods. Boulton, A., Baker, G., Bateson, A. 32, Humana Press Inc. Totowa. 325-357 (1998).
- Kendrick, K. Microdialysis in large unrestrained animals: neuroendocrine and behavioral studies of acetylcholine, amino acid, monoamine and neuropeptide release in the sheep. Microdialysis in the Neuroscience. Robinson, T., Justice, J., Bateson, A. 7, Elsevier. Amsterdam. 327-348 (1991).
- Oakley, B., Schafer, R. Experimental Neurobiology: A laboratory Manual. , University of Michigan Press. Ann Arbor. (1978).
- Okumura, T., Yamashita, Y., Okanoya, K., Tani, J. Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese Finch I. A Biological study. Soc. Neurosci Abst. 33, (2007).
- Boulton, A., Baker, G. The relation of brain electrical activity to behavior. In Vivo Neuromethods: Neuromethods. Robinson, T., Bateson, A. 32, Humana Press Inc. Totowa. 325-357 (1998).
- Yamashita, Y., Okumura, T., Okanoya, K., Tani, J. Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese finch. Proceeding of the 2nd International Symposium on Mobiligence, , 101-104 (2007).
