Bu makale, mineral yağ altında ekstrasellüler, ucu kayıtları üzerinden bireysel sensilla kimyasal stimülasyon izole bir elektrofizyolojik yöntem açıklanır.
Biz, kısa, duyusal sensilla 3,4 tahta gibi elektrofizyolojik araştırmak için, mevcut bir ucu kayıt tekniği 1,2 bir değişiklik açıklar. Bütün akrepler orta-ventral yüzey üzerinde yoğun alanlar var pektinler olarak adlandırılan iki ekleri, mekanik ve kimyasal-duyusal peg sensilla 5,6 . Bu sensilla chemoresponsiveness değerlendirilmesi için bir yöntem uçucu odorant duyusal alanında 5,7 olarak ekstraselüler sensillum içinde nöral aktiviteyi kayıt için bir tungsten elektrot kullanır. Bu yöntemin sınırlarını yavaş veri toplama ve kontrolsüz uyarıcı giriş ve Hazır Giyim alanında, kaldırılması içerir. Bu sınırlamaları aşmak için, biz, bireysel peg sensilla 8,9 su bazlı tastants sunmak için bir araç olarak apolar madeni yağ kullanan yeni bir ucu kayıt tekniği geliştirdi . Biz başarıyla sensillar chemoresponses, sitrik asit, etanol, ve tuz elde etmek için bu yöntemi uyguladık. Burada, böyle bir çalışma 9 için deney protokolünde açıklar . Biz bu yeni yöntem, bu böcekler 10, 11 ve 12 kabuklular de dahil olmak üzere diğer eklembacaklı kimyasal-duyusal sistemleri, tepki özelliklerini inceleyerek için yararlı olabilir düşünüyorum .
Yukarıdaki protokol elektrofizyolojik çalışma için bir çöl otlak akrep (Paruroctonus utahensis) nasıl hazırlanacağını açıklar. Özellikle, biz altında pectinal yağ kimyasal-duyusal nöronların kontrollü ekstrasellüler ucu kayıtları için nasıl bir oda inşa göstermektedir. Yağ ve su karışmaz, çünkü kimyasal stimülasyon (su bazlı uyarıcılar ile) tek sensilla izole etmek mümkündür. Vurgulamak gerekir ki, P. utahensis, görece küçük bir hayvan (≈ 2.5-5 cm) ve büyük hayvanların bu protokolü uygulayarak hayvanın platformu, odanın boyutu gibi birçok boyutu ayarlamaları ve uygulanan yağ miktarı gerekebilir. Biz su bazlı kimyasal uyarıcıların kontrollü teslimat için gerekli minimum miktarda yağ test etmek için pilot çalışmalar yapmanızı öneririz.
Ayrıca, yağ içinde pectinal sensilla 8 temel sinir aktivitesi üzerinde herhangi bir etkisi bulundu. Bu önce chemoresponsiveness değerlendirirken, aynı zamanda diğer model sistemler için teyit edilmelidir.
Bu yöntem chemoresponse duyusal alanında sensilla arasında etkileşim etkileri test etmek için başka bir yöntem ile birlikte kullanılabilir. Örneğin, bir sensillum ucu-record (yağ altında) mümkün olduğu gibi biz komşu bir sensillum 9 baz kayıt (tungsten elektrod aracılığıyla). Böyle bir kayıt yapılandırma tabanına kaydedilmiş sensillum nöral aktivitenin etkiler olsun ya da kimyasal bir sensillum uyarıcı değerlendirmek için kullanılıyor olabilir. Bugüne kadar hiç kimse bu akrep pectinal sensilla test etmiş ve bunun yanı sıra diğer kimyasal-duyusal sistemleri için açık bir soru kalır.
Özetlemek gerekirse, biz, petrol gelişmeler eklembacaklı tadında nöral temeli haline elektrofizyolojik araştırmalar kapsamı altında ucu-kayıt yöntemi düşünüyorum. Bu yazıda, biz bu yöntem için hayvan hazırlamak için bir protokol sağlamak ve periferik duyusal sinir sistemi daha fazla çalışma için sağlam bir temel sağlar umuyoruz.
The authors have nothing to disclose.
Biz Life fonu, Oklahoma Üniversitesi Lisans Eğitim ve Araştırma Olanakları Programı, ve bu işi finanse etmek için Zooloji Bölümü teşekkür ederim. Ayrıca Dr. Marielle Hoefnagels editoryal yardım için teşekkür ederim.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Lift-N-Press tab | Ted Pella, Inc. | 16082 | Doubled-sided adhesive | |
MicroFil | World Precision Instruments, Inc. | MF34G | Micropipette filler | |
Standard Glass Capillaries | World Precision Instruments, Inc. | 1B100F-6 | Glass pipettes | |
Microelectrode Holder | World Precision Instruments, Inc. | MEH3SBW10 |