Характеристика Изолированные, вентилируемый и легких мыши Instrumented озарен пульсирующего потока
Summary
Следующий протокол описывает процесс выделения, вентиляции и инструментальных мыши легких для измерения постоянного или пульсирующего легочного сосудистого давления потока отношения для количественной оценки последствий кровотока, поток воздуха, дыхательных путей изменения и сосудистые изменения на правом постнагрузки левого желудочка.
Abstract
Изолированные, вентилируемые и подготавливается мыши легких препарата позволяет устойчиво и пульсационного легочного сосудистого давления потока отношения должны быть измерены с независимый контроль над легочной артериальной расход, сигнал расхода, давления в дыхательных путях и давление в левом предсердии. Легочного сосудистого сопротивления рассчитывается на основе многоточечного, постоянное давление потока кривых; легочного сосудистого сопротивления рассчитывается исходя из пульсирующего давления потока кривых, полученных в диапазоне частот. Как теперь признается клинически, импеданс превосходной мерой право постнагрузки желудочков, чем сопротивления, потому что она включает в себя эффекты сосудистых соответствия, которые нельзя не учитывать, особенно в малом круге кровообращения. Три важных показателей импеданса – нулевой Гц Импеданс Z 0, характеристическое сопротивление Z С, а индекс отражения волны R W – дать представление о дистального артериального площадь поперечного сечения для потока, проксимальных артериальной жесткости и вверх-вниз по течению сопротивление Несоответствие, соответственно. Все результаты, полученные в изолированных, вентиляцией и перфузией легких не зависят от симпатической нервной системы тонус, объем статуса и последствий наркоза. Мы использовали эту технику, чтобы количественно оценить влияние эмболией легочной артерии и хронической гипоксии на сопротивление и сопротивление, и дифференцировать между сайтами действия (т.е. проксимальные против дистального) вазоактивных веществ и заболеваний с использованием давления зависимость Z C. Кроме того, когда эти методы используются с легкими генно-инженерного штамма мышей, эффекты на молекулярном уровне дефектов на легочного сосудистого структуры и функции может быть определена.
Protocol
Discussion
Критические шаги в хирургии
Очень важно, чтобы внимание уделяется при резке грудную клетку от легких. Легкие должны быть отремонтированы и не стесняясь окружающих тканей во время инфляции, но не были повреждены в процессе изоляции. Использование плоского объекта, как зад…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Работа выполнена при поддержке Национального института здоровья грант R01HL086939 (НКК).
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 1 ml syringe | Fisher Sci | 14-829-10F | ||
| 10 ml syringe | Fisher Sci | 14-823-2A | ||
| 60 ml syringe | Fisher Sci | 13-689-8 | ||
| RPMI with GLN 6/PK | Fisher Sci | MT10040CV | ||
| Bottle Top Filters | Fisher Sci | 09-761-57 | ||
| Ficoll PM 70 | Sigma-Aldrich | F2878-100g | ||
| Heparin | Sigma-Aldrich | |||
| Y27632 | Sigma-Aldrich | Y0503 | ||
| Angled Ball Iris scissors | Fine Science Tools | 14109-09 | ||
| Vannas Spring Scissors – 4mm Blades | Fine Science Tools | 15018-10 | ||
| Fine Iris Scissors – straight | Fine Science Tools | 14106-09 | ||
| Dumont #5/45 Forceps | Fine Science Tools | 11251-35 | ||
| Dumont Medical Biology Forceps | Fine Science Tools | 11254-20 | ||
| Lauda E100 ECO-line 003 | VWR | Comparable to Lauda-Brinkmann E-103, 62400-922 | ||
| IL-1 Isolated perfused mouse lung system | Harvard Apparatus | 739904 | ||
| Blood Pressure Transducer P75 for PLUGSYS Module | Harvard Apparatus | 730020 | ||
| TS410 Flow Modules | Transonic | TS410 | ||
| ME 4 PXN Precision PXN Inline Flowsensors | Transonic | ME 4 PXN | ||
| Cole-Parmer Multi-Syringe Pumps | Cole-Parmer | EW-74900-20 | ||
| Nembutal 50MG/ML 20ML Vial | Amatheon |
References
- Pace, J. Sympathetic control of pulmonary vascular impedance in anesthetized dogs. Circ Res. 29, 555-568 (1971).
- Ewalenko, P., Stefanidis, C., Holoye, A., Brimioulle, S., Naeije, R. Pulmonary vascular impedance vs. resistance in hypoxic and hyperoxic dogs: effects of propofol and isoflurane. J Appl Physiol. 74, 2188-2193 (1993).
- Nichols, W. W., O’Rourke, M. F., Hartley, C., McDonald, D. A. . McDonald’s blood flow in arteries : theoretical, experimental, and clinical principles. , (2005).
- Tuchscherer, H. A., Webster, E. B., Chesler, N. C. Pulmonary Vascular Resistance and Impedance in Isolated Mouse Lungs: Effects of Pulmonary Emboli. Annals of Biomedical Engineering. 34, 660-668 (2006).
- Tuchscherer, H. A., Vanderpool, R. R., Chesler, N. C. Pulmonary vascular remodeling in isolated mouse lungs: Effects on pulsatile pressure-flow relationships. Journal of Biomechanics. 40, 993-1001 (2007).
- Vanderpool, R., Naeije, R., Chesler, N. Impedance in Isolated Mouse Lungs for the Determination of Site of Action of Vasoactive Agents and Disease. Ann Biomed Eng. , (2010).
- Vanderpool, R., Kim, A., Molthen, R., Chesler, N. Effects of acute rho kinase inhibition on chronic hypoxia-induced changes in proximal and distal pulmonary arterial structure and function. Journal of Applied Physiology. , (2010).
- El-Bizri, N. Smooth muscle protein 22alpha-mediated patchy deletion of Bmpr1a impairs cardiac contractility but protects against pulmonary vascular remodeling. Circ Res. 102, 380-388 (2008).
- Champion, H., Michelakis, E., Hassoun, P. Comprehensive invasive and noninvasive approach to the right ventricle-pulmonary circulation unit: state of the art and clinical and research implications. Circulation. 120, 992-1007 (2009).
- Gan, C. Noninvasively assessed pulmonary artery stiffness predicts mortality in pulmonary arterial hypertension. Chest. 132, 1906-1912 (2007).
- Mahapatra, S., Nishimura, R., Sorajja, P., Cha, S., McGoon, M. Relationship of pulmonary arterial capacitance and mortality in idiopathic pulmonary arterial hypertension. J Am Coll Cardiol. 47, 799-803 (2006).
- Bogaard, H. Chronic pulmonary artery pressure elevation is insufficient to explain right heart failure. Circulation. 120, 1951-1960 (2009).
