इंसुलिन इंजेक्शन और Hemolymph निकालना वयस्क में इंसुलिन संवेदनशीलता उपाय ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em
Summary
संरक्षित इंसुलिन संकेतन फल मक्खी में पाया रास्ते<em> ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em> इस जीव चयापचय प्रकार द्वितीय मधुमेह सहित विकारों मॉडलिंग के लिए एक संभावित उपकरण बनाने. यह अंत करने के लिए, यह शारीरिक assays स्थापित करने के लिए प्रभावी रूप से वयस्क मक्खी में परिधीय ग्लूकोज निपटान में प्रणालीगत इंसुलिन कार्रवाई को मापने के लिए महत्वपूर्ण है.
Abstract
संरक्षित पोषक तत्व संवेदन तंत्र स्तनपायी और फल मक्खी जहां पेप्टाइड्स स्तनधारी इंसुलिन और ग्लूकागन, क्रमशः समारोह के लिए विकास लार्वा चरणों 1,2 के दौरान ग्लूकोज homeostasis को बनाए रखने जैसी के बीच मौजूद हैं. बड़े पैमाने पर बाद mitotic वयस्क मक्खियों पर अध्ययन इंसुलिन की तरह (आईएलपी) पेप्टाइड कोशिकाओं (IPCs) 3 उत्पादन के आनुवंशिक पृथक के परिणाम के रूप में ग्लूकोज homeostasis के गड़बड़ी का पता चला है . इस प्रकार, वयस्क फल मक्खियों के प्रकार द्वितीय मधुमेह सहित चयापचय विकारों के लिए एक उपयुक्त आनुवंशिक मॉडल प्रणाली के रूप में महान वादा पकड़. आगे फल मक्खी प्रणाली विकसित करने के लिए, तुलनीय शारीरिक ग्लूकोज और स्तनधारियों में इंसुलिन संवेदनशीलता सहिष्णुता को मापने के लिए इस्तेमाल किया assays स्थापित किया जाना चाहिए. यह अंत करने के लिए, हम हाल ही में वयस्क मक्खी में मौखिक शर्करा सहिष्णुता प्रतिक्रिया को मापने के लिए एक उपन्यास प्रक्रिया में वर्णित और ग्लूकोज homeostasis 4,5 को बनाए रखने में वयस्क IPCs के महत्व का प्रदर्शन किया. यहाँ, हम के लिए इंसुलिन इंजेक्शन 6 पहले से वर्णित प्रक्रिया को संशोधित किया है और यह एक उपन्यास hemolymph निष्कर्षण विधि वयस्क मक्खी में परिधीय इंसुलिन संवेदनशीलता को मापने के साथ संयुक्त . विशिष्ट, हमारे प्रोटोकॉल वयस्क मक्खी के लिए इंसुलिन इंजेक्शन, है कि बनाता है यह संभव करने के लिए इंसुलिन संकेत म्यूटेंट और संभावित हस्तक्षेप वयस्क मक्खी में ग्लूकोज और इंसुलिन संवेदनशीलता सहिष्णुता को प्रभावित विशेषताएँ एक पद्धति पर एक परिधीय ग्लूकोज लोड के निपटान की क्षमता का प्रत्यक्ष शारीरिक माप की अनुमति देता है.
Protocol
Discussion
इस रिपोर्ट में वर्णित तकनीक संभावित किसी भी अध्ययन है कि ड्रोसोफिला hemolymph संरचना में detectable परिवर्तन में जिसके परिणामस्वरूप शारीरिक प्रक्रियाओं की जांच में उपयोगी है . इस तरह से इंजेक्शन और hemolymph संग्रह…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
यह काम एनआईए से YW.CF (AG31086 AG21068) अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था.
Materials
| Name of the reagent/equipment | Company | Catalogue number |
|---|---|---|
| Bovine insulin | Sigma | I5500 |
| Infinity Glucose Reagent | Thermo Electron Corporation | TR1541 |
| Manual microinjector | Sutter Instrument | |
| P-87 Flamming/Brown micropipette puller | Sutter Instrument | |
| Single barrel borosilicate capillary glass | A-M Systems | 626000 |
| FD&C Blue No. 1 | McCormick & Company | |
| 1 μl microcapillary tubes | Drummond | |
| Three-axis manual micromanipulator and base | World Precision Instruments |
References
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