Anjiyogenez Çalışması Kornea Cep Testi Fare Modeli
Summary
Kornea vasküler dokularda yoksun olduğunu eşsizdir. Ancak, güçlü bir anjiyojenik faktörler tarafından güçlü bir kan damarı büyümesi ve hayatta kalma kornea uyarılabilir. Bu nedenle, kornea bizimle anjiyogenik çalışmalar için değerli bir araç sağlayabilir. Bu protokol, kornea cep tahlil ve nasıl anjiyogenik faktörleri kullanarak bu model ile indüklenen anjiyogenez değerlendirmek için fare modeli gerçekleştirmek için nasıl kullanılacağını gösterir.
Abstract
Normal kornea vasküler dokuların açıktır. Ancak, kan damarları, büyümek ve hayatta kalmak için güçlü anjiogenik faktörler 1 yönetilmektedir kornea uyarılabilir . Bu teklik kornea cep tahlil anjiyogenez çalışmalar için en çok kullanılan modeller biri yaptı. Kornea hücrelerinin çoklu katmanlar oluşturur. Bu nedenle, anjiyogenik etkisi 2,3 araştırmak için kornea ilgi anjiogenik faktör içeren bir pelet gömmek mümkündür. Burada, (I) anjiogenik faktör içeren pelet (II) (III) ilgi anjiogenik faktör tarafından tetiklenen anjiyogenez analiz pelet kornea içine gömün üretmek için nasıl bir adım adım gösteri sağlar. Temel fibroblast büyüme faktörü (bFGF), en güçlü anjiogenik faktörler 4 biri olarak bilindiğinden, korneada anjiyogenez ikna etmek için kullanılır .
Protocol
Discussion
Fare kornea cep tahlil modeli, ilk olarak Muthukkaruppan VR ve Auerbach R 6 1979 yılında tarif edilmiştir. Detaylı protokolleri farklı laboratuvarlar 2,3,7,8 tarafından yayınlanmıştır. Laboratuvarımız, uzun yıllar 4 için modifiye edilmiş ve çalışmalarımız bu yöntem kullanılır . Fare kornea cep testi büyük tekrarlanabilirlik ile nispeten basit bir model. Bu modelin bir diğer avantajı, kornea, kan damarlarının normal yoksun olması nedeniyle, bu testte arka pla…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bizim araştırma NIH, Ulusal Göz Enstitüsü İntramural Araştırma Programı tarafından desteklenmektedir.
Materials
| Equipment | Company | Catalog number |
|---|---|---|
| Dissecting microscope | World Precision Instruments | PZMIV-BS |
| Von Graefe cataract knife (1.5x25mm blade, flat) | Ambler Surgical | 3401E |
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11252-50 |
| Slit lamp | Zeiss | 30 SL-M |
Table 1. Equipments
| Reagent | Company | Catalog# | Comments |
|---|---|---|---|
| bFGF (basic fibroblast growth factor) | PEPROTECH INC. | 100-18B | |
| Sucralfate (Sucrose octasulfate–aluminum complex) | Sigma | S0652 | 10% in PBS |
| poly-HEMA (Poly(2-hydroxyethyl methacrylate)) | Sigma | P3932 | 12% in Ethanol |
Table 2. Reagents and materials
References
- Cao, Y., Linden, P., Shima, D., Browne, F., Folkman, J. In vivo angiogenic activity and hypoxia induction of heterodimers of placenta growth factor/vascular endothelial growth factor. The Journal of clinical investigation. 98, 2507-2511 (1996).
- Rogers, M. S., Birsner, A. E., D’Amato, R. J. The mouse cornea micropocket angiogenesis assay. Nature. 2, 2545-2550 (2007).
- Poche, R. A., Saik, J. E., West, J. L., Dickinson, M. E. The mouse cornea as a transplantation site for live imaging of engineered tissue constructs. Cold Spring Harbor protocols. , 5416-54 (2010).
- Zhang, F. VEGF-B is dispensable for blood vessel growth but critical for their survival, and VEGF-B targeting inhibits pathological angiogenesis. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. , 106-6152 (2009).
- Tong, S., Yuan, F. Dose response of angiogenesis to basic fibroblast growth factor in rat corneal pocket assay: I. Experimental characterizations. Microvascular research. 75, 10-15 (2008).
- Muthukkaruppan, V., Auerbach, R. Angiogenesis in the mouse cornea. Science. 205, 1416-1418 (1979).
- Ziche, M. Corneal assay for angiogenesis. Methods in molecular medicine. 46, 131-142 (2001).
- Ziche, M., Morbidelli, L. The corneal pocket assay. Methods in molecular biology. 467, 319-329 (2009).
