Ändrad Teknik för kransartärligering hos möss

Summary

Den kirurgiska proceduren för att inducera experimentell hjärtinfarkt hos möss börjar med vänster torakotomi mellan den tredje och fjärde ribbor för att visualisera den främre ytan av hjärtat och vänster lunga. Den vänstra koronarartären ligeras, är bröstet stängd och musen fick återhämta spontant.

Abstract

Hjärtinfarkt (MI) är ett av de viktigaste orsakerna till dödlighet hos människor ^1-3. För att förbättra sjuklighet och dödlighet hos patienter med MI Vi behöver bättre kunskap om patofysiologin för myokardischemi. Denna kunskap kan vara värdefullt att definiera nya terapeutiska mål för innovativa kardiovaskulära behandlingar ^4. Experimentell MI-modellen i möss är ett allt populärare små djurmodell inom preklinisk forskning där MI induceras med hjälp av permanenta eller tillfälliga ligering av vänstra kranskärlet (LCA) ^5. I den här videon beskriver vi steg för steg-metoden för hur man inducera experimentell MI i möss.

Djuret först bedövas med 2% isofluran. Den omedvetna musen sedan intuberas och ansluten till en ventilator för artificiell ventilation. Den vänstra bröst rakas och 1,5 cm snitt längs mitten axillarlinjen görs i huden. Den vänstra pectoralis major muskeln är rent ut dissociated tills revbenen är utsatta. Muskeln skikten dras åt sidan och fäst med ett ögonlock-upprullningsdon. Efter dessa förberedelser är vänster torakotomi utförs mellan de tredje och fjärde ribbor för att visualisera den främre ytan av hjärtat och vänster lunga. Det proximala segmentet av LCA artär ligeras därefter med en 7-0 Ethilon sutur som typiskt inducerar ett infarktstorlek ~ 40% av vänster kammare. Vid slutet, är bröstkorgen stängd och djuren erhåller postoperativ analgesi (Temgesic, 0,3 mg/50 ml, ip). Djuren hålls i en varm bur till spontan återhämtning.

Protocol

1. Protokoll text Innan du fortsätter till operation, bedöva en manlig mus (C57BL / 6) som är 6 veckor gamla eller äldre genom inandning av 2-5% isofluran. Gör en tå nypa för att bekräfta att djuret är tillräckligt sövd. Den omedvetna mus placeras på rygg på en varm dyna för att upprätthålla en konstant temperatur av 37 ° C. Den prekordial bröstet på vänster sida är rakat. Fäst musen en intubering enhet med en isofluran fylld kammare. Sätt ett rör med 0,2 innerdiame…

Representative Results

Instrument Funktionsbeskrivning Blunt-tip sax Används för att skära huden, interkostal bröstmuskeln och suturer Eye upprullningsdon Används för att exponera kirurgisk vy Blunt-tip pincett Används för att greppa hud och muskler Nålhållare För att hålla en nål 5-0 sutur Används för att sy huden <…

Discussion

Det kirurgiska ingreppet för LCA ligering vilket framgår i denna rapport är en pålitlig och reproducerbar metod för induktion av experimentell MI i möss ^{3, 6.} Ligering av LCA enligt detta protokoll inducerar myokardischemi engagerande normalt ~ 40% av vänster kammare ^3. Detta inducerar betydande EKG-förändringar i ST-segmentet ⁷ och synlig blekhet på den främre ytan av hjärtat. På grund av den stora hjärtinfarkt, kan dödligheten uppgå till 30% ^{8, 9.} En anteckni…