Plasmoniska pincett och fotoniska nanostrukturer kristaller visas att producera användbara förbättringar i effektivitet och orientering kontroll av optiskt fånga mikro-och nano-partiklar.
En metod för att manipulera position och orientering submicron partiklar icke-förstörande skulle vara ett otroligt användbart verktyg för grundläggande biologisk forskning. Kanske den mest använda fysiskt våld för att uppnå icke-invasiv manipulation av små partiklar har dielectrophoresis (DEP). 1 saknar dock DEP på egen hand den mångsidighet och precision som önskas när manipulera celler eftersom det traditionellt gjort med stationära elektroder. Optisk pincett, som utnyttjar en tredimensionell lutning elektromagnetiska fält för att utöva krafter på små partiklar, uppnå detta önskade mångsidighet och precision. 2 är dock en stor nackdel med denna metod den höga strålningen intensitet som krävs för att uppnå den nödvändiga kraft för att fälla en partikel som kan skada biologiska prov 3 En lösning som gör att fångst och sortering med lägre optisk intensitet är optoelektronisk pincett (OET) men OET s har begränsningar med fina manipulation av små partiklar,.. är DEP-baserad teknik också lägger hinder för egendom av lösningen 4 , 5
Denna video artikeln kommer att beskriva två metoder som minskar intensiteten av den strålning som behövs för optisk manipulation av levande celler och även beskriva en metod för orientering kontroll. Den första metoden är plasmoniska pincett som använder en slumpmässig guld nanopartiklar (AuNP) array som ett substrat för provet som visas i figur 1. Den AuNP array omvandlar incidenten fotoner till lokaliserade ytan plasmoner (LSP) som består av resonanta dipolmoment som utstrålar och genererar en mönstrad strålfält med en stor lutning i cellen lösningen. Inledande arbete på ytan plasmon ökad fångst av Righini et al och våra egna modeller har visat fält som genereras av plasmoniska substrat minskar den initiala intensiteten som krävs genom att öka lutningen fält som fällor partikeln. 6,7,8 Den plasmoniska tillvägagångssätt gör det möjligt för fina orientering kontroll över ellipsoidisk partiklar och celler med låg optisk intensitet på grund av effektivare optiska energin omvandlas till mekanisk energi och en dipol beroende strålfältet. Dessa fält visas i figur 2 och den låga fångsten intensitet beskrivs i siffror 4 och 5. De största problemen med plasmoniska pincett är att LSP är generera en betydande mängd värme och fångsten är bara tvådimensionell. Denna värme genererar konvektiva flöden och thermophoresis som kan vara tillräckligt kraftfull för att driva ut submicron partiklar från fällan. 9,10 Den andra metoden som vi kommer att beskriva är att utnyttja periodisk dielektrisk nanostrukturer att sprida infallande ljus mycket effektivt i diffraktion lägen, som visas i figur 6 11. Helst skulle man göra denna struktur ur ett dielektriskt material för att undvika samma värme problem med plasmoniska pincett, men i vårt förhållningssätt en aluminium-belagd diffraktionsgitter används som en endimensionell periodisk dielektrisk nanostruktur. Även om det inte är en halvledare, gjorde det upplever inte signifikant uppvärmning och effektivt fångade små partiklar med låg fånga intensitet, som visas i figur 7. Anpassningen av partiklar med gallret substrat validerar begreppsmässigt påståendet att en 2-D fotoniska kristaller kan ge exakt rotation av icke-sfäriska micron stora partiklar. 10 Effektivitetsvinsterna av dessa optiska fällor är ökade på grund av den förbättrade fält som produceras av nanostrukturer som beskrivs i detta dokument.
Betydelsen av dessa fångstmetoder är att de minskar den optiska intensiteten nödvändiga för en hållbar fångst från någonstans i storleksordningen 10 3 μW / ìm 2 till någonstans i storleksordningen 10 μW / ìm 2. 10,11 Begränsningarna för dessa tekniker är att guldet nanopartiklar rad upplevelser värme problem som måste övervinnas. För att lösa detta problem kan en 2D fotoniska kristaller struktur som består av ett dielektriskt material användas. En sådan struktur …
The authors have nothing to disclose.
Vi vill också tacka Xiaoyu Miao och Ben Wilson för att utveckla de flesta av de metoder som beskrivs inom. Detta arbete har finansierats av National Science Foundation (DBI 0.454.324) och National Institute of Health (K21 EB005183) och PHS NRSA T32 GM07270 från NIGMS till Eck.
Material Name | Type | Company | Catalog Number | Comment |
Axio Imager Microscope | D1M | Zeiss | D1M | Zeiss Axio Imager.D1M |
Microscope Objective | 50x/0.55 | Zeiss | LD EC Epiplan – NEOFLUAR 50x/0.55 HD DIC | |
Zeiss Microscope Camera | AxioCam MRc | Zeiss | ||
Helium Neon Laser | 35 mW | Research Electro-Optics | ||
Variable Attenuator | Continuously Variable ND | ThorLabs | NDC-100C-4M | For adjusting microscope intensity |
Zeiss Filter Set | Filter Set #17 | Zeiss | 488017-9901-000 | Filter Set #17 |
Microscope Slides | 0.5 mm thickness | VWR | ||
3T3 mouse cell nuclei | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Store as cold as possible | ||
Acridine Orange dye | Fred Hutchinson Cancer Research Center | |||
Bovine Serum Albumin | 1 to 10 ration in PBS | Fred Hutchinson Cancer Research Center | ||
454 nm polystyrene latex spheres | Polysciences, Inc. | |||
carbodiimide hydrochloride (EDC) | 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) | G-Biosciences | BC25-1 | |
gold (for deposition) | ||||
Reflective ruled diffraction grating | Edmund Optics | |||
Phosphate Buffered Saline (PBS) | Dulbecco’s Phosphate-Buffered Saline (D-PBS) (1X) | Invitrogen | 14190-144 |