식물의 휘발성 물질을 수집을위한 푸시풀 방식이 설명되어 있습니다. 방법은 herbivore 먹이, 외인성 메틸 jasmonate, 기계적 손상에 의해 유발되는 휘발성 물질의 비교를 허용합니다. 이 기술은 또한 블루베리 식물 이내 herbivore – 손상된 지점에서 휘발성 물질에 노출 피해가 가지의 휘발성 반응을 조사하는 데 사용됩니다.
Abstract
Herbivore 유도된 식물의 휘발성 물질 (HIPVs)은 일반적으로 herbivore 공격 1,2 후 식물에서 방출됩니다. 이러한 HIPVs은 주로 방어 식물 호르몬 jasmonic 산 (JA) 및 휘발성 메틸 유도체 jasmonate (MeJA) 3,4,5에 의해 규제됩니다. 지난 3 수십 연구자 이상 HIPVs이 격퇴하거나 유치 herbivores를 herbivores의 천적을 확보하고 경우에 그들은 이전 herbivore의 공격을 유발하거나 주요 공장 방어 수 수 문서화합니다. 최근 논문 6, 나는 다르게이라도, 블루베리 식물의 휘발성 물질의 배출을 유도 집시 나방의 유충, 외인성 MeJA 응용 프로그램, 그리고 기계적 손상에 의해 그 먹이를 발표했다. 또한, 블루베리 가지는 JA와 herbivores (즉, 직접 식물의 방어)에 저항의 수준을 증가하여 동일한 식물의 인접 지점에서 방출 HIPVs에 대응하고, 프라이밍 휘발성 배출하여 (즉, 간접 식물 방어). 찾을 유사ings는 쑥의 일종 7, 포플러 8, 리마 콩 9 최근에보고되었습니다 ..
자, 내가 herbivore (집시 나방) 먹이주기, 외인성 MeJA 응용 프로그램, 그리고 기계적 손상에 의해 유도된 블루베리 휘발성 물질을 수집을위한 푸시풀 방법을 설명합니다. 휘발성 수집 유닛은 4 L 휘발성 수집 챔버, 2 피스 단두대, 유입 공기를 정화 공기 공급 시스템 및 휘발성 물질 5,6,10를 수집하는 슈퍼 – Q 흡착제로 가득 함정에 연결된 진공 시스템으로 구성되어 있습니다 . 슈퍼 – Q 트랩에서 수집한 휘발성 물질은 dichloromethane과 eluted 후 분리 및 가스 크로마 토그래피 (GC)를 사용 계량입니다. 이 휘발성 징수 방법은 블루베리 식물 내에 herbivore – 손상된 지점에서 휘발성 물질에 노출 피해가 가지의 휘발성 반응을 조사하는 데 사용되는 N 제 연구 6되었습니다. 이러한 방법은 여기에 설명되어 있습니다. 간단히, 손상 블루베리 가지는 아프로 HIPVs에 노출되는같은 공장 내에서 m 근처 지점. 위에서 설명한 동일한 기술을 사용하여 HIPVs에 노출 후 지점에서 방출되는 휘발성 물질을 수집 분석하고 있습니다.
Protocol
1. 휘발성 물질의 유도 지역 : herbivore 손상 블루베리 식물의 두 가지가 잡아 늘인 폴리에스터 슬리브로 체포됩니다. 여섯 집시 나방의 유충은 (2 차 -3 층 instars) 가방 안에 사전 휘발성 컬렉션에 2 일간 식물에 피드를 사용할 수 있습니다. 제어 식물은 어떤 유충을받지 않습니다. 휘발성 배출량은 3 일 (그림 1)에서 (프로토콜 # 7) 아래?…
Discussion
푸시풀 휘발성 수집 장치는 식물 휘발성 물질의 헤드 스페이스 콜렉션을위한 표준 방법을 나타냅니다 여기서 설명했다. 이 장치는 집시 나방의 유충에 의해 herbivory에 블루베리 나뭇잎의 휘발성 응답을 결정하는 데 사용하며 나를 내부 식물 신호에 HIPVs의 역할에 대한 새로운 증거를 제공하기 위해 허용했다.
결과는 애벌레의 먹이 exogenously – 적용 MeJA를 보여 여기에 제시하고…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
저자는 기술 지원 로버트 Holdcraft 감사드립니다. 이 연구는 USDA CSREES 특별 권한 부여 (2009-34155-19957) 및 해치 자금 (NJ08192)에 의해 부분적으로 투자되었다.