Gnagare Stereotaxic Kirurgi och välbefinnande Förbättringar Utfall för Behavioral Neuroscience
Summary
Stereotaxic kirurgi på gnagare möjliggör riktad behandling med läkemedel eller elektrisk stimulering och inspelningar i vaken, beter djur. I den här videon presentationen kommer vi att visa de senaste processuella förbättringar av denna långvariga förfarande som framgångsrikt förbättrat överlevnad och minskad postoperativ viktminskning.
Abstract
Stereotaxic operation för implantation av kanyler in i specifika delar av hjärnan har under många decennier varit en mycket framgångsrik experimentell teknik för att undersöka effekterna av lokalt manipulerade neurotransmittorer och signalvägar i vaken, beter djur. Dessutom har stereotaxic implantation av elektroder för elektrofysiologiska stimulans och studier inspelning varit avgörande för vår nuvarande förståelse av neuroplasticitet och nätverk hjärnan beter djur. Ständigt ökande kunskap om optimering av kirurgiska tekniker hos gnagare 1-4, allmänhetens medvetenhet om djurskydd och strängare lagstiftning (t.ex. 2010 EU direktiv om användning av försöksdjur 5) fick oss att förfina dessa kirurgiska ingrepp, särskilt med avseende att genomföra nya rutiner för syre tillskott och kontinuerlig övervakning av blodets syresättning och hjärtat nivåer takt under operationen samtinföra ett standardiserat protokoll för postoperativa vården. Våra observationer tyder på att dessa ändringar resulterade i en ökad överlevnad och en förbättring av det allmänna tillståndet av djuren efter operationen (t.ex. mindre viktminskning och en mer aktiv djur). Denna video presentation kommer att visa den allmänna förfarandena i denna typ av stereotaxic kirurgi med särskild hänsyn till våra flera ändringar. Vi kommer att belysa dessa kirurgiska ingrepp hos råttor, men det är också möjligt att utföra denna typ av kirurgi hos möss eller andra smådjur laboratorium med hjälp av speciella adaptrar för stereotaxic apparater 6.
Protocol
Discussion
Det huvudsakliga syftet med denna video presentation är att bekanta beteende neuroforskare med de grundläggande principerna för stereotaxic kirurgi. Forskare som redan utför stereotaxic kirurgi kan också dra nytta av denna video och fundera några av de processuella förbättringar för användning i sina egna laboratorium. En ständigt ökande kunskap om optimering av kirurgiska tekniker 1-3, utveckling av nya narkosmedel och smärtstillande medel för användning i human-och veterinärmedicin 4,12…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Författarna tackar Dr Peter Gerrits för ritningar som används i videon.
Materials
| Name of the reagent | Company |
| Alcohol 70% | VWR |
| Antisedan (atipamezole) | Orion |
| Atropine sulfate 0,5 | Pharmachemie BV |
| Bulldog haemostatic clamp | Aesculap |
| Cannulas | Component Supply Co. |
| Chlorhexidine 0.5% | AppepPharma |
| Cleaning powder | Alconox |
| Cotton sticks | Hartmann BV |
| Dexdomitor (dexmedetomidine) | Orion |
| Drill | Dremel 8000 |
| Duratears Z | Alcon |
| Durogrip Naaldvoerder converse 130mm | Aesculap |
| Durotip Fijne schaar ret.sp/st 110 mm | Aesculap |
| Gauze | Medicomp (5×5) |
| Heating pad | Harvard Apparatus |
| Insect pins (stylets) | Entosphinx (Czech Republik) |
| Ketamine 10% (ketamine) | Alfasan |
| Micro-halsted straight tip | Aesculap-vet |
| Molinea | Hartmann BV |
| NaCl 0,9% | Baxter |
| Needles (25G) | Terumo |
| Oximeter | Edan Instruments, Inc. |
| Pentobarbital | Pharmacy of the UMCG |
| Rimadyl | Pfizer |
| Scalpel blade No. 23 | Swann Morton |
| Scalpelholder NR. 4 133 mm | Aesculap |
| Screw driver | conventional Hardware Store |
| Simplex Rapid (dental cement) | Kemdent |
| Skull screws | Component Supply Co. |
| Spatula | VWR |
| Spongestan special | Johnson & Johnson |
| Stereotacts | Kopf Instruments |
| Surgical forceps 100mm | Aesculap |
| Suture material Safil 5/0 | Aesculap |
| Syringe 10 ml | Omnifix |
| Syringe 1ml | Terumo |
| Syringe 5ml | Omnifix |
| Xylocaine (lidocaine/adrenaline) | Astra Zeneca |
References
- Russell, W. M. S., Burch, R. L. . The Principles of Humane Experimental Technique. , (1959).
- Richardson, C. A., Flecknell, P. A. Anaesthesia and post-operative analgesia following experimental surgery in laboratory rodents: are we making progress?. Altern. Lab Anim. 33, 119-127 (2005).
- Stokes, E. L., Flecknell, P. A., Richardson, C. A. Reported analgesic and anaesthetic administration to rodents undergoing experimental surgical procedures. Lab Anim. 43, 149-154 (2009).
- Flecknell, P. A. . Laboratory Animal Anaesthesia – A Practical Introduction for Research Workers and Technicians. , (2009).
- . DIRECTIVE 2010/63/EU OF THE EUROPEAN PARLIAMENT AND OF THE COUNCIL of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes. Official Journal of the European Union. , (2010).
- Geiger, B. M., Frank, L. E., Caldera-Siu, A. D., Pothos, E. N. Survivable Stereotaxic Surgery in Rodents. J. Vis. Exp. (20), e880-e880 (2008).
- Hellebrekers, L. J., Booij, L. H. D. J., Flecknell, P. A., Van Zutphen, L. F. M., Baumans, V., Beynen, A. C. Anaesthesia, analgesia and euthanasia. Principles of Laboratory Animal Science. , 277-311 (2001).
- Walantus, W., Elias, L., Kriegstein, A. In utero intraventricular injection and electroporation of E16 rat embryos. J. Vis. Exp. (6), e236-e236 (2007).
- Paxinos, G., Watson, C. . The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates. , (1986).
- Paxinos, G., Watson, C. . The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates. , (2007).
- Swanson, L. W. . Brain Maps: Structure of the Rat Brain. , (1992).
