Kutan leishmaniasis i den dorsale hud af hamstere: en nyttig model til screening af Antileishmanial Drugs
Summary
Optimering af den eksperimentelle hamster-model for kutan leishmaniasis ved intradermal injektion af<em> Leishmania</em> Promastigoter i den dorsale hud. Denne fremgangsmåde er nyttig under inokulation, opfølgning, karakterisering af læsioner, anvendelse af behandlinger og opnåelse af kliniske prøver. Locomotion, søge efter mad og vand, leg og sociale aktiviteter bevaret.
Abstract
Traditionelt hamstere eksperimentelt inokuleret i snuden eller trædepuden. Imidlertid i disse sites et sår ikke altid forekommer, måling af læsionsstørrelse er en hård procedure og dyr viser vanskeligt at spise, ånde og bevæge sig på grund af læsionen. For at optimere hamster-model for kutan leishmaniasis, unge voksne mandlige og kvindelige guldhamstere (Mesocricetus auratus) blev injiceret intradermalt på den dorsale hud med 1 til 1,5 x L0 7 promastigoter af Leishmania arter og progression af efterfølgende læsioner blev evalueret i op til 16 uger efter infektion. Den gyldne hamster blev valgt, fordi det anses for passende bio-model til evaluering af lægemidler mod Leishmania, som de er modtagelige for infektion med forskellige arter. Kutan infektion af hamstere resulterer i kroniske, men kontrolleret læsioner, og et klinisk udvikling med tegn svarende til dem observeret hos mennesker. Derfor, etablering of omfanget af infektion ved måling af størrelsen af læsionen ifølge området indurations og sår er mulig. Denne fremgangsmåde har bevist sin alsidighed og nem håndtering under podning, opfølgning og karakterisering af typiske læsioner (sår), anvendelse af behandlinger gennem forskellige måder og opnåelse af kliniske prøver efter forskellige behandlinger. Ved hjælp af denne metode kvaliteten af dyrelivet med hensyn til bevægelse, søge efter mad og vand, leg og sociale aktiviteter isalso bevaret.
Protocol
Discussion
Kutan leishmaniasis er endemisk i troperne og nye verden. Det er ofte omtalt som en gruppe af sygdomme på grund af varierende spektrum af kliniske manifestationer, der spænder fra små kutane noduler grov slimhindevæv ødelæggelse. Mest tilgængelige lægemidler er dyre, kræver lange behandlingsforløb og bliver stadig ineffektive, hvilket nødvendiggør opdagelsen af nye lægemidler.
Musemodellen er almindeligt anvendt, men har nogle ulemper. Således for eksempel på grundlag af…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Denne undersøgelse blev støttet af tilskud fra Udvalget for forskning på University of Antioquia (CODI), Den colombianske institut for udvikling af videnskab og teknologi – COLCIENCIAS og Center for Udvikling af produkter mod tropesygdomme – CIDEPRO.
Materials
| Name of the reagent | Type | Company | Catalogue number |
| Ketamine | Reagent | Holliday –Scott S.A | |
| Xilacine | Reagent | Synthesis | |
| PBS | Reagent | GIBCO | 14190-136 |
| Digital caliper | Equipment | Fisher | 15-077-958 |
| Giemsa | Reagent | SIGMA | GS1L-1L |
| Formalin | Reagent | Nova lab | 11273 |
| Paraffin | Reagent | Pechiney Plastic Packaging | PM-996 |
| Haemotoxilin | Reagent | Nova lab | 10870103 |
| Eosin | Nova lab | 10870203 | |
| Kodak Ektachem dry chemistry | Equipment | Kodak Ektachem | DT-60 |
| meglumine antimoniate | Reagent | Aventis | |
| Microscopy | Equipment | Nikon | YS2-T |
References
- WHO. Control of the leishmaniasis. Report of a Meeting of the WHO Expert Committee on the Control of Leishmaniasis WHO. 949, (2010).
- Titus, R. G., Marchand, M., Boon, T., Louis, J. A. A limiting dilution assay for quantifying Leishmania major in tissues of infected mice. Parasite Immunol. 7, 545-555 (1985).
- Reynolds, K. M. The Kodak Ektachem dry layer technology for clinical chemistry. Upsala. J. Med. Sci. 91, 143-146 (1986).
- Handman, E., Ceredig, R., Mitchell, G. F. Murine cutaneous leishmaniasis: disease patterns in intact and nude mice of various genotypes and examination of some differences between normal and infected macrophages. Australian J. Exp. Biol. Med. Sci. 57, 9-29 (1979).
- Hanson, W., Chapman, W., Waits, V., Lovelace, J. Development of Leishmania (Viannia) panamensis lesions and relationship of numbers of amastigotes to lesion area antimony-treated and untreated hamsters. J. Parasitol. 77, 780-783 (1991).
- Henao, H. H., Osorio, Y., Saravia, N. G., Gómez, A., Travi, B. Efficacy and toxicity of pentavalentantimonials (Glucantime and Pentostam) in an American cutaneous leishmaniasis animal model: luminometry application. Biomédica. 24, 393-402 (2004).
- Travi, B. L., Martinez, J. E., Zea, A. Antimonial treatment of hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis: assessment of parasitological cure with different therapeutic schedules. Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 87, 567-569 (1993).
- Hommel, M., jaffe, C. L., Travi, B., Milon, G. Experimental models for leishmaniasis and for testing anti-leishmanial vaccines. Ann. Trop. Med. Parasitol. 89, 55-73 (1995).
- Travi, B. L., Osorio, Y., Saravia, N. G. The inflammatory response promotes cutaneous metastasis in hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis. J. Parasitol. 82, 454-457 (1996).
- Travi, B. L., Osorio, Y. Failure of Albendazole as an alternative treatment of cutaneous Leishmaniasis in the hamster model. Memorias Instituto Oswaldo. 93, 515 (1998).
- Travi, B. L., Osorio, Y., Melby, P. C., Chandrasekar, B., Arteaga, L., Saravia, N. G. Gender is a major determinant of the clinical evolution and immune response in hamsters infected with Leishmania spp. Infect Immun. 70, 2288-2296 (2002).
- Osorio, Y., Melby, P. C., Pirmez, C., Chandrasekar, B., Guarín, N., Travi, B. L. The site of cutaneous infection influences the immunological response and clinical outcome of hamsters infected with Leishmania panamensis. Parasite Immunol. 25, 139-148 (2003).
- Osorio, Y., Bonilla, D. L., Peniche, A. G., Melby, P. C., Travi, B. L. Pregnancy enhances the innate immune response in experimental cutaneous leishmaniasis through hormone-modulated nitric oxide production. J. Leukoc. Biol. 83, 1413-1422 (2008).
- Espitia, C. M., Zhao, W., Saldarriaga, O., Osorio, Y., Harrison, L. M., Cappello, M., Travi, B. L., Melby, P. C. Duplex real-time reverse transcriptase PCR to determine cytokine mRNA expression in a hamster model of New World cutaneous leishmaniasis. BMC Immunol. 22, 11-31 (2010).
