Summary

Kutan leishmaniasis i rygghuden för Hamsters: en användbar modell för screening av Antileishmanial Drugs

Published: April 21, 2012
doi:

Summary

Optimering av de experimentella hamstermodell för kutan leishmanios genom intradermal injektion av<em> Leishmania</em> Promastigoter vid den dorsala huden. Detta tillvägagångssätt är användbart under ympning, uppföljning, karakterisering av lesioner, tillämpning av behandlingar och erhållande av kliniska prover. Locomotion, söka efter mat och vatten, lek och sociala aktiviteter bevaras.

Abstract

Traditionellt hamstrar experimentellt inokuleras i nosen eller i trampdynan. Men i dessa platser ett sår inte alltid sker, är mätning av lesionsstorleken en hård förfarande och djur visar svårighet att äta, andas och flytta på grund av skadan. För att optimera hamster modell för kutan leishmaniasis, unga vuxna manliga och kvinnliga guldhamstrar (Mesocricetus auratus) injicerades intradermalt på rygghuden med 1 till 1,5 x l0 7 promastigoter av Leishmania arter och progression av efterföljande skador utvärderades upp till 16 veckor efter infektion. Den gyllene hamster valdes eftersom det anses adekvat Bio-modellen för att utvärdera läkemedel mot Leishmania som de är mottagliga för infektion av olika arter. Kutan infektion i hamstrar resulterar i kroniska men kontrollerad skador och en klinisk Evolution med skyltar som liknar dem som observerats hos människa. Därför etablering of omfattningen av infektionen genom att mäta storleken av lesionen efter området förhårdnader och ulcus är genomförbart. Detta tillvägagångssätt har visat sin mångsidighet och enkel hantering vid ympning, följa upp och karakterisering av typiska lesioner (sår), tillämpning av behandlingar genom olika sätt och erhållande av kliniska prover efter olika behandlingar. Genom att använda denna metod kvaliteten på djurlivet om rörelseförmåga, söka efter mat och vatten, lek och sociala aktiviteter isalso bevarade.

Protocol

1. Infektion av hamstrar 1. Djur Inavlade kvinnliga och manliga guldhamstrar (Mesocricetus auratus), 6-8 veckor, vägde 140-160 g används. De är inrymda i djuranläggningen i temperaturreglerade mm, matas med standard gnagare torkades mat och försedd med vatten ad libitum. Alla som deltar i djurförsök godkänns av institutionella etiska kommittén för experimentell djur. Innan experimentell infektion med dermotropic Leishmania parasite…

Discussion

Kutan leishmaniasis är endemisk i tropikerna och tropiska regionen. Det är ofta som en grupp av sjukdomar på grund av varierande spektrum av kliniska manifestationer, som sträcker sig från små kutana knutor grov slemhinnevävnad förstörelse. De flesta tillgängliga läkemedel är dyra, kräver långa behandlingsregimer och blir alltmer ineffektiv, vilket nödvändiggör upptäckten av nya läkemedel.

Musmodellen används allmänt, men har vissa nackdelar. Således till exempel på gr…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Denna studie har finansierats med bidrag från kommittén för forskning vid universitetet i Antioquia (Codi) Den colombianska Institutet för utveckling av vetenskap och teknik – COLCIENCIAS och Centrum för utveckling av produkter mot tropiska sjukdomar – CIDEPRO.

Materials

Name of the reagent Type Company Catalogue number
Ketamine Reagent Holliday –Scott S.A  
Xilacine Reagent Synthesis  
PBS Reagent GIBCO 14190-136
Digital caliper Equipment Fisher 15-077-958
Giemsa Reagent SIGMA GS1L-1L
Formalin Reagent Nova lab 11273
Paraffin Reagent Pechiney Plastic Packaging PM-996
Haemotoxilin Reagent Nova lab 10870103
Eosin   Nova lab 10870203
Kodak Ektachem dry chemistry Equipment Kodak Ektachem DT-60
meglumine antimoniate Reagent Aventis  
Microscopy Equipment Nikon YS2-T

References

  1. WHO. Control of the leishmaniasis. Report of a Meeting of the WHO Expert Committee on the Control of Leishmaniasis WHO. 949, (2010).
  2. Titus, R. G., Marchand, M., Boon, T., Louis, J. A. A limiting dilution assay for quantifying Leishmania major in tissues of infected mice. Parasite Immunol. 7, 545-555 (1985).
  3. Reynolds, K. M. The Kodak Ektachem dry layer technology for clinical chemistry. Upsala. J. Med. Sci. 91, 143-146 (1986).
  4. Handman, E., Ceredig, R., Mitchell, G. F. Murine cutaneous leishmaniasis: disease patterns in intact and nude mice of various genotypes and examination of some differences between normal and infected macrophages. Australian J. Exp. Biol. Med. Sci. 57, 9-29 (1979).
  5. Hanson, W., Chapman, W., Waits, V., Lovelace, J. Development of Leishmania (Viannia) panamensis lesions and relationship of numbers of amastigotes to lesion area antimony-treated and untreated hamsters. J. Parasitol. 77, 780-783 (1991).
  6. Henao, H. H., Osorio, Y., Saravia, N. G., Gómez, A., Travi, B. Efficacy and toxicity of pentavalentantimonials (Glucantime and Pentostam) in an American cutaneous leishmaniasis animal model: luminometry application. Biomédica. 24, 393-402 (2004).
  7. Travi, B. L., Martinez, J. E., Zea, A. Antimonial treatment of hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis: assessment of parasitological cure with different therapeutic schedules. Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 87, 567-569 (1993).
  8. Hommel, M., jaffe, C. L., Travi, B., Milon, G. Experimental models for leishmaniasis and for testing anti-leishmanial vaccines. Ann. Trop. Med. Parasitol. 89, 55-73 (1995).
  9. Travi, B. L., Osorio, Y., Saravia, N. G. The inflammatory response promotes cutaneous metastasis in hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis. J. Parasitol. 82, 454-457 (1996).
  10. Travi, B. L., Osorio, Y. Failure of Albendazole as an alternative treatment of cutaneous Leishmaniasis in the hamster model. Memorias Instituto Oswaldo. 93, 515 (1998).
  11. Travi, B. L., Osorio, Y., Melby, P. C., Chandrasekar, B., Arteaga, L., Saravia, N. G. Gender is a major determinant of the clinical evolution and immune response in hamsters infected with Leishmania spp. Infect Immun. 70, 2288-2296 (2002).
  12. Osorio, Y., Melby, P. C., Pirmez, C., Chandrasekar, B., Guarín, N., Travi, B. L. The site of cutaneous infection influences the immunological response and clinical outcome of hamsters infected with Leishmania panamensis. Parasite Immunol. 25, 139-148 (2003).
  13. Osorio, Y., Bonilla, D. L., Peniche, A. G., Melby, P. C., Travi, B. L. Pregnancy enhances the innate immune response in experimental cutaneous leishmaniasis through hormone-modulated nitric oxide production. J. Leukoc. Biol. 83, 1413-1422 (2008).
  14. Espitia, C. M., Zhao, W., Saldarriaga, O., Osorio, Y., Harrison, L. M., Cappello, M., Travi, B. L., Melby, P. C. Duplex real-time reverse transcriptase PCR to determine cytokine mRNA expression in a hamster model of New World cutaneous leishmaniasis. BMC Immunol. 22, 11-31 (2010).
check_url/3533?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Robledo, S. M., Carrillo, L. M., Daza, A., Restrepo, A. M., Muñoz, D. L., Tobón, J., Murillo, J. D., López, A., Ríos, C., Mesa, C. V., Upegui, Y. A., Valencia-Tobón, A., Mondragón-Shem, K., RodrÍguez, B., Vélez, I. D. Cutaneous Leishmaniasis in the Dorsal Skin of Hamsters: a Useful Model for the Screening of Antileishmanial Drugs. J. Vis. Exp. (62), e3533, doi:10.3791/3533 (2012).

View Video