Den Xpert MTB / RIF test integrerer prøven dekontaminering, handsfree, on-board prøvebehandling, og ultra-sensitive Hemi-nestet PCR for samtidig påvisning av<em> Mycobacterium tuberculosis</em> Og rifampicin resistens, enten i hoste sputum eller konsentrerte sputum sedimenter, i cirka to timer. Testing er standardisert og krever kun moderat laboratorium infrastruktur og opplæring.
Tuberkulose (TB) på grunn av Mycobacterium tuberculosis (MTB) er fortsatt et stort folkehelseproblem: infeksjonen rammer opptil en tredel av verdens befolkning en, og nesten to millioner mennesker er drept av tuberkulose hvert år to Universell tilgang til høy kvalitet. er pasient-sentrert behandling for alle tuberkulosepasienter understreket av WHOs Stop TB Strategi. 3 Den raske påvisning av MTB i luftveiene prøver og medikamentell behandling basert på pålitelige legemiddelresistens testresultatene er en forutsetning for en vellykket gjennomføring av denne strategien. Men i mange områder av verden, avhengig TB diagnose fortsatt på ufølsomme, dårlig standardiserte sputum mikroskopi metoder. Ineffektiv TB påvisning og fremveksten og overføring av resistente MTB stammer stadig true global TB kontrollaktiviteter. 2
Effektiv diagnosen pulmonal tuberkulose krever tilgjengelighet – på en global skala – av stativardized, enkel å bruke, og robust diagnostiske verktøy som ville tillate direkte påvisning av både MTB kompleks og resistens mot viktige antibiotika som rifampicin (RIF). Sistnevnte Resultatet kan tjene som markør for multiresistent MTB (MDR TB) og har blitt rapportert hos> 95% av MDR-TB isolater. 4, 5 Den raske tilgjengeligheten av pålitelige testresultater er sannsynlig å direkte oversette til lyd pasientbehandling avgjørelser som til syvende og sist vil kurere den enkelte pasient og bryte den kjede av TB overføring i samfunnet. 2
Cepheid s (Sunnyvale, CA, USA) Xpert MTB / RIF 6 analysen, 7 oppfyller kravene skissert ovenfor i en bemerkelsesverdig måte. Det er en nucleic-syrer forsterkning test for 1) påvisning av MTB komplekse DNA i sputum eller konsentrerte sputum sedimenter, og 2) påvisning av RIF motstand-assosierte mutasjoner i rpoB genet 8 Den er utviklet for bruk med Cepheid sin GeneXpert Dx. System thved integrerer og automatiserer prøvebehandling, nukleinsyre forsterkning, og påvisning av målet sekvenser med real-time PCR og revers transkriptase PCR. Systemet består av et instrument, personlig datamaskin, strekkodeleser, og forhåndslastet programvare for å kjøre tester og vise resultatene. 9 Det sysselsetter én bruke engangs Xpert MTB / RIF patroner som holder PCR reagenser og vert PCR-prosessen. Fordi patronene er selvforsynt, er krysskontaminering mellom prøvene eliminert. 6 Gjeldende nukleinsyre forsterkning metoder som brukes for å oppdage MTB er sammensatte, arbeidskrevende, og teknisk krevende. Den Xpert MTB / RIF analysen har potensial til å bringe standardisert, følsom og veldig spesifikk diagnostisk testing for både tuberkulose og resistens til universell tilgang point-of-care innstillinger 3, forutsatt at de vil kunne ha råd til det. For å lette tilgangen, har Stiftelsen for Innovative New Diagnostics (FINN) forhandlet betydeligvesentlige prisreduksjoner. Gjeldende FINN-forhandlede priser, sammen med listen over land kvalifiserte for rabatter, er tilgjengelig på Internett. Ti
Den Xpert MTB / RIF-analysen integrerer prøve dekontaminering, handsfree, on-board prøvebehandling, og ultra-sensitive Hemi-nestet PCR for samtidig påvisning av MTB og RIF motstand, enten i hoste sputum eller konsentrerte sedimenter, i ett , lett å bruke systemet. Analysen analytiske deteksjonsgrensen ble funnet å være 131 CFU / ml av sputum. 6 Loggen-lineær sammenheng mellom Ct verdier og antall MTB celler presentere gjelder fra 10 februar til 10 juli CFU / ml av sputum. Som klinisk relevante MTB konsentrasjoner alle fall innenfor den lineære området av analysen, gir analysen semi-kvantitative estimater av den bakterielle belastningen. 7 Analysen krever kun moderat laboratorium infrastruktur og opplæring. Deteksjonsgrensen ligger minst to størrelsesordener lavere enn for konvensjonelle mikroskopi. 6 Spesifisitet er utmerket. Videre samtidig påvisning av RIF-resistant MTB er en betydelig fordel i innstillingen av point-of-care testing i tid med multiresistent tuberkulose. 3
Hittil kun begrensede publiserte data på analysen ytelse for diagnostisering pulmonal tuberkulose i kliniske settinger er tilgjengelig 12;. 13. Xpert MTB / RIF-analysen samlede kliniske sensitiviteten oppdage MTB i sputum av pasienter med mistanke om pulmonal tuberkulose var 97,6% sammenlignet med kultur som referanse. Dette var funnene i en prospektiv multi-senter studie som involverte fem studiesteder (Lima, Peru, Baku, Aserbajdsjan, Cape Town og Durban, Sør Afrika, Mumbai, India) og totalt 1462 pasienter. Den samlede pre-test sannsynlighet for kultur-bekreftet TB i studien befolkningen var 50,7%. Sensitiviteten var 99,8% for smear-og kultur-positive saker og 90,2% for smøre-negative, kultur-positive tilfeller. Blant HIV-positive pasienter med pulmonal tuberkulose, var sensitiviteten for MTB / RIF test 93,9%, sammenlignet med 98,4% i. HIV-negative pasienter 12 I en innstilling av lav TB prevalens, var den samlede avtalen for å avdekke MTB 89% sammenlignet med kultur, følsomheten var 98% for smear-positive og 72% for smøre-negative prøver, henholdsvis, og spesifisitet var utmerket. 13 Det var ingen signifikant forskjell i følsomhet mellom tester på ubehandlet sputum og de på konsentrerte sedimenter. 12. I den samme studien, MTB / RIF test korrekt oppdaget RIF motstand i 209 av 211 pasienter (99,1% sensitivitet) og i alt 506 pasienter med RIF følsomhet (100% spesifisitet), da sekvensering resultater ble tatt hensyn til. tolv Forfatterne fant at ytelsen for både sak deteksjon, og diskriminering av RIF motstand, var lik på tvers av ulike nettsteder, noe som tyder på at funnene er trolig være allment gjeldende. tolv Videre konsentrerte sedimenter av respiratoriske prøver andre enn sputum, som broncho-alveolar lavage og bronkierl sekreter, ble testet med sammenlignbare sensitivitet og spesifisitet. 13 Data om analysen prestasjon ved testing ekstra-pulmonal TB fremstår. 15
Global TB kontroll desperat behov for effektive verktøy som tillater rask diagnose av nye TB tilfeller og påvisning av RIF-resistente MTB i universell tilgang point-of-care innstillinger. 3 Gjeldende nukleinsyre forsterkning metoder som brukes for å oppdage MTB er sammensatte, arbeidskrevende, og teknisk krevende. Den Xpert MTB / RIF analysen har potensial til å bringe standardisert, følsom og veldig spesifikk diagnostisk testing for både TB og narkotika motstand mot disse innstillingene, forutsatt at de vil kunne ha råd til det. For å lette tilgangen, har Stiftelsen for Innovative New Diagnostics (FINN) fremforhandlet betydelige prisreduksjoner for Xpert MTB / RIF test. Gjeldende FINN-forhandlede priser, sammen med listen over land kvalifiserte for rabatter, er tilgjengelig på Internett. Ti </sup>
The authors have nothing to disclose.
Forfatterne erkjenner WJ Looney for nøye gjennomgang av manuskriptet.
Reagent/Equipment | Company | Catalogue number |
Xpert MTB/RIF test | Cepheid | GXMTB/RIF-10 |
Transfer pipettes | Sarstedt | 86.1172.001 |
Conical tubes, 15 ml, 120 x 17 mm, PS | Sarstedt | 62.553.542 |