Bu video, immün yetmezlik modelindeki bir sıçanda, insan damarı (IMA) kullanılarak stent yerleşimi sonrası intimal hiperplazi gelişimini inceleyen bir modeli göstermektedir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
İnsan internal meme arter (İMA) Transplantasyon ve Stent: In-Stent Restenozis Geliştirme Eğitim Bir İnsan Modeli
Bu makalede
Özet
Özet
Damar stentlemesi sonrası intimal hiperplazi gelişimindeki patobiyolojik ve patofizyolojik süreçleri araştırmak için kullanılan preklinik in vivo araştırma modelleri, translasyonel yaklaşımlar için kritik öneme sahiptir1,2.
Sıkça kullanılan hayvan modelleri arasında fareler, sıçanlar, tavşanlar ve domuzlar yer almaktadır3-5. Bununla birlikte, bu biyolojik süreçler hayvan damarlarında halihazırda çalışılmış olmasına rağmen insan araştırma modellerinde daha önce hiç uygulanmadığından, bu modellerin klinik ortamlara aktarılması zor olmaya devam etmektedir6,7. Bu videoda, bu translasyonel boşluğu gidermek için geliştirilen yeni bir insanize modeli sunuyoruz. Gösterilen prosedür tekrarlanabilir, kolay ve hızlı uygulanabilir olup, intimal hiperplazi gelişimini ve çeşitli stentlerin uygulanabilirliğini incelemek için uygundur.
Bu video, insan damarlarında stent tekniğinin nasıl uygulanacağını ve ardından immunodeficient sıçanlara transplantasyon işlemini göstermekte ve çoğalan hücrelerin kaynağının insan olduğunu tanımlamaktadır.
Protokol
1. İnternal Mammary Arter (IMA) Hazırlığı
- Arteriyel endotelyum, 2-french Fogarty arteriyel embolektomi kateterinin (Baxter Healthcare, Deerfield, IL, USA) geçirilmesiyle soyulur. Endotelyal hasarın sağlandığından emin olmak için kateter, tüm damar boyunca iki kez çekilir.
- 8 mm uzunluğunda ve 2,5 mm-3 mm çapında herhangi bir insan stenti (örneğin Translumina, Yukon stent) kullanın. UYARI: Stent öncesi ve sonrası stenozu önlemek için stentin çapı, damar çapını %10'dan fazla aşmamalıdır. UYARI: Aynı çalışma içinde stentin uzunluğunu değiştirmeyin.
- İstenilen çapı elde etmek için uygun balon basıncını (stent paketinde belirtilen) kullanarak ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Stent yerleşimi sonrası intimal hiperplazi gelişimini incelemek için farklı in vivo araştırma modelleri mevcut olsa da, bu modeller hala aşılması gereken translasyonel engellerle karşı karşıyadır. Ayrıca, büyük hayvan modelleri maliyetlidir; özel barındırma koşulları ve cerrahi ekipmanlar tüm laboratuvarlarda mevcut değildir.
İnsan intimal proliferasyonunun ve stent içi restenozun gelişimini incelemek için insan IMA'sı kullanımı daha önce organ kültürlerinde ex situ olarak ça.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Herhangi bir çıkar çatışması beyan edilmemiştir.
Teşekkürler
Yazarlar, katkılarından dolayı Christiane Pahrmann'a teşekkür ederler. Sütür materyallerini sağladıkları için Ethicon, Norderstedt, Hamburg'a (Almanya) özel teşekkürler sunulur.
Finansman
Sonja Schrepfer, Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) kurumundan araştırma bursu (SCHR992/3 1 ve SCHR992/4-1) almıştır. Bu çalışma, ISHLT Shumway Kariyer Geliştirme Bursu 2010 ve Falk Araştırma Fonu (Stanford Üniversitesi) tarafından desteklenmiştir.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 2 French Fogarty kateteri | Baxter Internationl Inc. | 120602F | |
| Yukon Stent | Translumina GmbH, Hechingen, Germany | Çalışma protokolünüze göre seçtiğiniz stenti kullanın | |
| RPMI besiyeri | Biochrom AG | Nr.F1275 | |
| heparin | Baxter Internationl Inc. | 2B0953 | |
| izofluran | Abbott Laboratories | B506 | |
| Provo-Iodine | Betadine Puredue Pharma | EAN:5995327165830 | |
| 80% etanol | Geyer | ETV 80/0500 | |
| Mikro klemps | Harvard Apparatus | PY2-61-0186 | |
| 8-0 Sütürler | Johnson & Johnson | 2808G | |
| 6-0 Sütürler | Johnson & Johnson | 1698 H | |
| Karprofen | Feizer Vet | PZN:0110208 | |
| Metamizol | Ratiopharm | ||
| Hedef geri kazanım çözeltisi, pH9 | Dako | S2368 | |
| Image-iT FX sinyal artırıcı | Invitrogen | I36933 | |
| fare monoklonal anti-GFP antikoru | BD Biosciences | 632381 | |
| primer antikor dilüent | Dako | S3022 | |
| keçi anti-fare IgG, Alexa Fluor 488 | Invitrogen | A11017 | |
| sekonder antikor dilüent | Dako | S0809 | |
| tavşan poliklonal anti-düz kas α-aktin | Abcam | ab5694 | |
| keçi anti-tavşan IgG, Alexa Fluor 555 | Invitrogen | A21430 | |
| Prolong Gold solma önleyici reaktif | Invitrogen | P36930 |
Kaynaklar
- Deuse, T., Ikeno, F., Robbins, R. C., Schrepfer, S. Imaging In-Stent Restenosis: An Inexpensive, Reliable, and Rapid Preclinical Model. J. Vis. Exp. (31), e1346(2009).
- Oyamada, S. Trans-iliac rat aorta stenting: a novel high throughput....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
