एक जाग माउस के तंत्रिका प्रतिक्रियाएँ रिकॉर्डिंग और tracers इंजेक्शन के लिए तैयार
Summary
इस neuronal प्रतिक्रियाओं का electrophysiological लक्षण वर्णन मस्तिष्क समारोह को समझने के लिए और मार्ग अनुरेखण के लिए रंगों के स्थान का मार्गदर्शन करने के लिए महत्वपूर्ण है. हालांकि, कई अध्ययन संवेदनाहृत पशुओं में प्रदर्शन कर रहे हैं. Anesthetics के बिना मस्तिष्क समारोह को समझते हैं, हम एक के लिए neuronal प्रतिक्रिया गुण रिकॉर्ड और जाग माउस में रंगों इंजेक्षन विधि विकसित की है.
Abstract
यह सर्वविदित है कि संज्ञाहरण मस्तिष्क के विभिन्न क्षेत्रों में तंत्रिका प्रतिक्रिया गुण बदल 13. श्रवण प्रणाली में मौलिक सीमा, आवृत्ति, विशिष्टता, और निरोधात्मक sidebands सहित brainstem न्यूरॉन्स की प्रतिक्रिया गुण 1-2 संज्ञाहरण के तहत महत्वपूर्ण तरीके में बदल रहे हैं. इन टिप्पणियों physiologists संज्ञाहरण के contaminating के प्रभाव के बिना एक न्यूरॉन्स से रिकॉर्ड करने के तरीकों की तलाश के लिए प्रेरित किया. एक परिणाम एक गहन निश्चेतना तैयारी, जहां brainstem पूरी तरह से 4 midbrain के स्तर पर transected था. इस तैयारी की कमियां एक दुर्जेय सर्जरी के, अग्रमस्तिष्क से उतरते अनुमानों के उन्मूलन, और संवेदी उत्तेजना का उपयोग को मध्यमस्तिष्क ऊपर संरचनाओं की जांच करने में असमर्थता हैं. एक अलग रणनीति के लिए इलेक्ट्रोड arrays के प्रत्यारोपण लंबे समय एकल न्यूरॉन्स और multiunit समूहों से रिकॉर्ड जानवर जाग और / या 5,6 बर्ताव किया गया है </sup>. इन तकनीकों लेकिन 1 electrophysiologically मस्तिष्क संरचना निस्र्पक के बाद ट्रेसर रंजक इंजेक्शन के साथ संगत नहीं हैं. Anesthetics के साथ तंत्रिका प्रतिक्रिया गुणों फेरबदल करते हुए एकल न्यूरॉन्स से electrophysiological प्रतिक्रिया गुण रिकॉर्डिंग से बचने के लिए, हम एक सिर संयम लंबे समय तक 7-9 चमगादड़ में 10-12 माउस के लिए तकनीक का इस्तेमाल किया अनुकूलित है. इस पद्धति का उपयोग करके, हम करने के लिए unanesthetized माउस में कई दिनों से अधिक electrophysiological रिकॉर्डिंग आचरण कर रहे हैं. रिकॉर्डिंग सत्र के अंत में, हम तो एक रंग इंजेक्षन करने के लिए इलेक्ट्रोड पदों और रिकॉर्डिंग साइटों के पुनर्निर्माण या एक अनुरेखक इंजेक्षन इतना है कि करने के लिए और रिकॉर्डिंग loci से रास्ते जा सकता है निर्धारित कर सकते हैं. इस पद्धति का उपयोग anesthetics के बिना कई दिनों से अधिक अच्छी तरह से अलग एक न्यूरॉन रिकॉर्डिंग के लिए अनुमति देता है.
Protocol
Discussion
माउस में electrophysiological और neuroanatomical प्रयोगों के लिए सिर के बाद संयम प्रणाली का लाभ यह है कि प्रयोगों unanesthetized, जाग चूहों के साथ आयोजित किया जा सकता है, संभावित प्रतिक्रिया चतनाशून्य करनेवाली औषधि दवाओं के कारण संदू?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
NSF के अनुदान 0920060, एनआईएच DC004395 अनुदान, में NHMRC 1,009,482 अनुदान, विज्ञान और चिकित्सा अनुसंधान के कार्यालय एनएसडब्ल्यू, और Garnett गायब हो चुकी है और रॉडने विलियम्स मेमोरियल फाउंडेशन द्वारा समर्थित है.
Materials
| Name | Company | Catalogue number | Comments |
| Etch gel for cleaning skull prior to dental cement | Henry Schein | 101-5396 | 12/pk with 1.2 mL syringes |
| Primer for dental cement | Kerr Optibond | 25881 | 8 mL bottle |
| Adhesive for dental cement | Kerr Optibond | 25882 | 8 mL bottle |
| Applicators for dental cement | Kerr Optibond | 24680 | 200/pk |
| Dental Cement | Charisma, Heraeus Kulzer | 66000085 | 4gm Syringe Refill |
| Tungsten Rod (Ground Pin) | A-M Systems | 717200 | 0.010″ diameter |
| Economy UV Curing Light | Henry Schein | CU-80 | |
| Head-post | Built in-house | ||
| Mounting bar | Built in-house | ||
| Mounting block | Built in-house | ||
| Stereotaxic Frame | David Kopf Instruments | 902 | |
| Mouse and Neonatal Rat Adaptor | Stoelting | 51625 | |
| Deltaphase Isothermal Pad | Braintree Scientific, Inc. | 39DP |
References
- Evans, E. F., Nelson, P. G. The responses of single neurones in the cochlear nucleus of the cat as a function of their location and the anaesthetic state. Exp. Brain Res. 17, 402-427 (1973).
- Joris, P. X. Response classes in the dorsal cochlear nucleus and its output tract in the chloralose-anesthetized cat. J. Neurosci. 18, 3955-3966 (1998).
- Populin, L. C. Anesthetics change the excitation/inhibition balance that governs sensory processing in the cat superior colliculus. J. Neurosci. 25, 5903-5914 (2005).
- Young, E. D., Brownell, W. E. Responses to tones and noise of single cells in dorsal cochlear nucleus of unanesthetized cats. J. Neurophysiol. 39, 282-300 (1976).
- Donoghue, J. P. Contrasting properties of neurons in two parts of the primary motor cortex of the awake rat. Brain Res. , 333-3173 (1985).
- Westby, G. W., Wang, H. A floating microwire technique for multichannel chronic neural recording and stimulation in the awake freely moving rat. J. Neurosci. Methods. 76, 123-133 (1997).
- Suga, N., O’Neill, W. E., Manabe, T. Cortical neurons sensitive to combinations of information-bearing elements of biosonar signals in the mustache bat. Science. 200, 778-781 (1978).
- O’Neill, W. E., Suga, N. Target range-sensitive neurons in the auditory cortex of the mustache bat. Science. 203, 69-73 (1979).
- Suga, N., O’Neill, W. E., Manabe, T. Harmonic-sensitive neurons in the auditory cortex of the mustache bat. Science. 203, 270-274 (1979).
- Portfors, C. V., Felix, R. A. 2nd Spectral integration in the inferior colliculus of the CBA/CaJ mouse. Neuroscience. , 136-1159 (2005).
- Felix, R. A., Portfors, C. V. Excitatory, inhibitory and facilitatory frequency response areas in the inferior colliculus of hearing impaired mice. Hear Res. 228, 212-229 (2007).
- Portfors, C. V., Jonson, K. G., Roberts, P. D. Over-representation of species-specific vocalizations in the awake mouse inferior colliculus. Neuroscience. 162, 486-500 (2009).
- Franklin, K. B. J., Paxinos, G. . The Mouse Brain in Stereotaxic Coordinates. , (2007).
