ऑप्टिकल आवृत्ति डोमेन की इमेजिंग<em> पूर्व vivo</em> पल्मोनरी लकीर नमूनों हिस्तोपैथोलोजी सहसंबंध छवि एक एक प्राप्त

Summary

एक छवि के लिए विधि<em> पूर्व vivo</em> ऑप्टिकल आवृत्ति डोमेन इमेजिंग (OFDI) के साथ फेफड़े लकीर नमूनों और ऊतक विज्ञान सटीक सहसंबंध प्राप्त वर्णित है, जो फेफड़े विकृति के लिए विशिष्ट OFDI व्याख्या मापदंड के विकास के लिए आवश्यक है. यह विधि अन्य प्रकार के ऊतक और इमेजिंग तकनीक के लिए लागू करने के लिए सही छवि व्याख्या और मूल्यांकन के लिए ऊतक विज्ञान सहसंबंध सटीक इमेजिंग प्राप्त है. इमेजिंग इस तकनीक के साथ स्थापित मानदंडों तो भविष्य में छवि का आकलन करने के लिए लागू होगा<em> Vivo में</em> अध्ययन करता है.

Abstract

Lung cancer is the leading cause of cancer-related deaths¹. Squamous cell and small cell cancers typically arise in association with the conducting airways, whereas adenocarcinomas are typically more peripheral in location. Lung malignancy detection early in the disease process may be difficult due to several limitations: radiological resolution, bronchoscopic limitations in evaluating tissue underlying the airway mucosa and identifying early pathologic changes, and small sample size and/or incomplete sampling in histology biopsies. High resolution imaging modalities, such as optical frequency domain imaging (OFDI), provide non-destructive, large area 3-dimensional views of tissue microstructure to depths approaching 2 mm in real time (Figure 1)^2-6. OFDI has been utilized in a variety of applications, including evaluation of coronary artery atherosclerosis^6,7 and esophageal intestinal metaplasia and dysplasia^6,8-10.

Bronchoscopic OCT/OFDI has been demonstrated as a safe in vivo imaging tool for evaluating the pulmonary airways^11-23 (Animation). OCT has been assessed in pulmonary airways^16,23 and parenchyma^17,22 of animal models and in vivo human airway^14,15. OCT imaging of normal airway has demonstrated visualization of airway layering and alveolar attachments, and evaluation of dysplastic lesions has been found useful in distinguishing grades of dysplasia in the bronchial mucosa^11,12,20,21. OFDI imaging of bronchial mucosa has been demonstrated in a short bronchial segment (0.8 cm)¹⁸. Additionally, volumetric OFDI spanning multiple airway generations in swine and human pulmonary airways in vivo has been described¹⁹. Endobronchial OCT/OFDI is typically performed using thin, flexible catheters, which are compatible with standard bronchoscopic access ports. Additionally, OCT and OFDI needle-based probes have recently been developed, which may be used to image regions of the lung beyond the airway wall or pleural surface¹⁷.

While OCT/OFDI has been utilized and demonstrated as feasible for in vivo pulmonary imaging, no studies with precisely matched one-to-one OFDI:histology have been performed. Therefore, specific imaging criteria for various pulmonary pathologies have yet to be developed. Histopathological counterparts obtained in vivo consist of only small biopsy fragments, which are difficult to correlate with large OFDI datasets. Additionally, they do not provide the comprehensive histology needed for registration with large volume OFDI. As a result, specific imaging features of pulmonary pathology cannot be developed in the in vivo setting. Precisely matched, one-to-one OFDI and histology correlation is vital to accurately evaluate features seen in OFDI against histology as a gold standard in order to derive specific image interpretation criteria for pulmonary neoplasms and other pulmonary pathologies. Once specific imaging criteria have been developed and validated ex vivo with matched one-to-one histology, the criteria may then be applied to in vivo imaging studies. Here, we present a method for precise, one to one correlation between high resolution optical imaging and histology in ex vivo lung resection specimens. Throughout this manuscript, we describe the techniques used to match OFDI images to histology. However, this method is not specific to OFDI and can be used to obtain histology-registered images for any optical imaging technique. We performed airway centered OFDI with a specialized custom built bronchoscopic 2.4 French (0.8 mm diameter) catheter. Tissue samples were marked with tissue dye, visible in both OFDI and histology. Careful orientation procedures were used to precisely correlate imaging and histological sampling locations. The techniques outlined in this manuscript were used to conduct the first demonstration of volumetric OFDI with precise correlation to tissue-based diagnosis for evaluating pulmonary pathology²⁴. This straightforward, effective technique may be extended to other tissue types to provide precise imaging to histology correlation needed to determine fine imaging features of both normal and diseased tissues.

Protocol

1. इमेजिंग सिस्टम OFDI की तकनीकी जानकारी 4-6 पहले से वर्णित किया गया है. परिधीय OFDI इमेजिंग गति प्रति सेकंड और 512 और 2048 पार के अनुभागीय परिपत्र छवि के प्रति axial गहराई प्रोफाइल के बीच 25 और 100 फ्रेम के बीच में आयोजित किया गया. कस्टम 2.4 फादर (0.8 मिमी व्यास) पेचदार स्कैनिंग इस अध्ययन में इस्तेमाल कैथेटर मानक bronchoscopes की पहुँच बंदरगाह के माध्यम से संचालित करने के लिए डिजाइन किए गए थे. कैथेटर एक आंतरिक ऑप्टिकल कोर के शामिल ब्रोन्कियल दीवार और एक एकल उपयोग बाहरी म्यान पर प्रकाश ध्यान केंद्रित. कैथेटर शरीर इमेजिंग के दौरान स्थिर रहे जबकि भीतरी कोर 25 और 100 हर्ट्ज और के बीच 1.25 और 5 मिमी / सेकंड की एक pullback गति में अनुवाद के बीच एक दर पर घुमाया था. प्रणाली के axial संकल्प ऊतकों में 6 मिमी और 7.3 4-6 मिमी की एक छवि लेकर गहराई प्रदान की. कैथिटर आधारित OFDI इस अध्ययन में प्रदर्शन किया गया था vivo bronchoscopic OFDI (फाई में दोहरानेgure 1). हालांकि, इस प्रोटोकॉल को भी एक बेंच टॉप ऑप्टिकल प्रणाली (चित्रा 3 और 4) के साथ इमेजिंग के लिए लागू किया जा. 2. इमेजिंग सेट अप सिस्टम इमेजिंग प्रणाली चालू सेट और इमेजिंग मानकों (घूर्णी गति, pullback गति, छवि अधिग्रहण दर, आदि) रिकॉर्ड. OFDI इमेजिंग प्रणाली इस अध्ययन में इस्तेमाल के लिए, छवियों 10-50 fps पर प्राप्त किया गया. रोटरी जंक्शन और pullback डिवाइस कैथेटर संलग्न. कैथेटर स्पिन और छवि गुणवत्ता के लिए जाँच करें. सिस्टम संरेखण समायोजित और ऑफसेट के रूप में की जरूरत है. 3. ऊतक तैयारी और पैड पर सेट फेफड़ों नमूना benchtop पर एक tabletop डिस्पोजेबल शोषक पैड रखें. एक मरीज ​​से एक शल्य पूर्व vivo नमूना इमेजिंग अगर, विकृतिविज्ञान विभाग से परामर्श करने के लिए सुनिश्चित करें कि सभी लकीर मार्जिन (ब्रोन्कियल, नाड़ी, और parenchymal हाशिये) का मूल्यांकन किया गया है, दस्तावेज, और / या एक Patho द्वारा हटा दिया यकीन होज्ञाता. ब्रोन्कियल नाभिका में लकीर नमूना दर्ज airway पहचानें. एक बोर सिरिंज का उपयोग कर airway के भीतर किसी भी दृश्य बलगम निकालें. यदि आवश्यक हो, चूषण airway के भीतर गहरे बोर सिरिंज के लिए प्लास्टिक टयूबिंग की एक लंबी खंड देते हैं. ब्याज की घाव की पहचान के लिए नमूना की बाहरी सतह टटोलना. एक ठीक धातु जांच का प्रयोग, कातर हित के घाव के पास जब तक ब्रोन्कियल पेड़ के माध्यम से नेविगेट. जांच के साथ airway खोलें जब तक ब्याज की घाव दिखाई या airway mucosa तहत स्पर्शनीय है. ध्यान से किसी भी रक्त बलगम या airway mucosa से एक कपास इत्तला दे दी applicator के साथ घाव overlying हटा दें. Airway mucosa ऊपर OFDI कैथेटर प्लेस और पुष्टि करने के लिए घाव airway mucosa अंतर्निहित है और ऊतक विज्ञान संबंध के लिए ब्याज की एक उच्च गुणवत्ता इमेजिंग क्षेत्र की पहचान करने के लिए एक छवि प्राप्त. 4. चिह्नित ऊतक <li> 3.8 चरण में पिछले इमेजिंग निष्कर्षों पर आधारित airway में रुचि के क्षेत्र का चयन करें. इमेजिंग के वांछित रेखा के साथ ऊतक पर दो अंक चुनें. »समानांतर (चित्रा 2) अनुदैर्ध्य या परिधीय airway (चित्रा 3) पहलू, वांछित परिणामों पर निर्भर करता है तो हो सकता है. अंतरिक्ष डॉट्स 1.5 सेमी से अधिक नहीं के अलावा इतना है कि ऊतक के भाग एक ऊतक विज्ञान ब्लॉक में प्रसंस्करण के लिए फिट हो सकता है. ऊतक विज्ञान जोड़े: यदि> 1.5 सेमी की एक ऊतक लंबाई की आवश्यकता है, तो कई 1.5 सेमी लंबे समय हित के क्षेत्रों करार एकाधिक मिलान इमेजिंग बनाने में ऊतक लंबाई विभाजित. एक ठीक डुबकी ऊतक में खुले बोर सुई (यानी 25 गेज 7/8 "लंबे समय के) इत्तला दे दी अंकन डाई (त्रिभुज बायोमेडिकल साइंसेज, डरहम, नेकां). ध्यान में सुई के बाहर से धुंध के साथ अतिरिक्त स्याही मिटा सुई के भीतर ही बोर ऊतक अंकन स्याही छोड़ने. पर airway mucosa ऊतक सीधा पंचरइमेजिंग की रेखा के साथ बात करने के लिए चुना है. 3.5 airway mucosa पर 2 बिंदु के लिए 3.3 चरणों को दोहराएँ. यदि स्याही mucosal सतह पर पंचर साइट से दूर रन, एक कपास का उपयोग applicator ध्यान से अतिरिक्त स्याही निकाल इत्तला दे दी. Airway mucosa की सतह पर एक कपास के साथ बलगम या रक्त निकालें applicator इत्तला दे दी, अगर वर्तमान. यदि स्याही डॉट्स circumferentially एक airway के भीतर रखा जाता है, के लिए खुला airway के दो पक्षों इमेजिंग क्षेत्र (चित्रा 3a) में ऊतक समतल पिन के लिए उपयोगी है. 5. ऊतक इमेजिंग प्रत्येक स्याही के निशान और करने के लिए सुनिश्चित करें के निशान पर दिखाई दे रहे हैं OFDI छवि पर OFDI कैथेटर रखें. मार्क्स अत्यधिक बिखरने कणों overlying और तेजी से संकेत क्षीणन है, जो पंचर साइट (चित्रा 3b, चित्रा 4a, चित्रा 4g के भीतर स्याही कणों से मेल खाती है अंतर्निहित ऊतक संरचना के भीतर केन्द्र अवरोधों के रूप में प्रकट करना चाहिए </strong>). यदि स्याही निशान (ओं) OFDI, दोहराने कदम 4.3 गैर दिखाई निशान के लिए 4.7 पर दिखाई नहीं देते हैं. यदि स्याही के निशान OFDI के साथ दिखाई दे रहे हैं, के लिए 5.3 कदम आगे बढ़ना. दो airway mucosal ऐसी है कि कैथेटर प्रकाशिकी 1 स्याही निशान (चित्रा 2b) से परे ऊतक overlie सतह पर स्याही के निशान कैथेटर समानांतर जगह. एंकरिंग एक हल्के वस्तु के साथ कैथेटर के समीपस्थ अंत और बाहर का अंत हासिल गति कलाकृतियों को कम करने में मदद कर सकते हैं. एक OFDI pullback संग्रह के साथ आगे बढ़ें. OFDI pullback छवियाँ देखें दोनों स्याही के निशान इमेजिंग में दिखाई दे रहे हैं और गति कलाकृतियों (3 चित्रा और चित्रा 4) के लिए जाँच करने के लिए सुनिश्चित करें. यदि के निशान दिखाई नहीं कर रहे हैं, 5.4 को 5.1 में कदम दोहराएँ. 6. संग्रह और प्रसंस्करण ऊतक Airway mucosal ऊतक पर एक हरे रंग की स्याही डॉट (त्रिभुज बायोमेडिकल साइंसेज, डरहम, नेकां) इमेजिंग स्कैन की शुरुआत, वें से 0.3 सेमी दूर उन्मुख करने के लिए जगहई स्याही निशान है कि इमेजिंग pullback (चित्रा 2c) में पहली बार दिखाई दिया. दो काली स्याही के निशान और हरे रंग की स्याही के निशान को शामिल ऊतक निकालें. ऊतक को छाँटो लिए एक मानक ऊतक विज्ञान प्रसंस्करण कैसेट में फिट करने के लिए. यदि ताजा ऊतक काटने मुश्किल है, तो ऊतक ऊतक विज्ञान के लिए ऊतकों को हटाने से पहले तय कर सकते हैं. एक ऊतक विज्ञान प्रसंस्करण और 10% कम से कम 48 घंटे के लिए formalin में कैसेट तय प्लेस में ऊतक. एक ऊतक प्रोसेसर में प्रक्रिया ऊतक, किसी भी ऊतक विज्ञान विभाग के माध्यम से उपलब्ध है. ऐसी है कि कटौती वर्गों दो airway सतह पर काली स्याही के निशान के लिए समानांतर होगा आयल में ऊतक एम्बेड करें. पैराफिन ब्लॉक का सामना जब तक या तो एक स्याही के निशान दिखाई देता है या पूरे ऊतक अनुभाग दिखाई देता है, जो भी पहले आता है एक ऊतक सूक्ष्म तक्षणी का उपयोग. एक बार दोनों काली स्याही के निशान दिखाई दे रहे हैं, एक 5 सुक्ष्ममापी मोटी अनुभाग में कटौती और एक गिलास स्लाइड पर माउंट. कटौती करने के लिए और हर 5 सुक्ष्ममापी मोटी वर्गों माउंट जारीकाली स्याही के निशान तक 50 सुक्ष्ममापी अब दिखाई ऊतक या समाप्त होता है, जो भी पहले आता है. मानक hematoxylin और लाल भामसान रंग (एच एंड ई) प्रोटोकॉल दाग और coverslip स्लाइड्स धुंधला का पालन करें. 7. इमेज प्रोसेसिंग अगर चित्र एक benchtop स्कैनर, या अन्य स्कैनिंग तकनीक जहां दोनों स्याही के निशान के पार के अनुभागीय एक छवि में दिखाई दे रहे थे के साथ हासिल किया गया है, तो छवि सीधे इसी ऊतक विज्ञान के साथ सहसंबद्ध किया जा सकता है. यदि बड़ा डेटासेट एक चक्करदार स्कैनिंग कैथेटर के साथ हासिल किया गया है, छवियों को फिर से इतना है कि एक एकल 2d छवि ऊतक विज्ञान के साथ संबंध के लिए दोनों स्याही के निशान bisects interpolated होने की आवश्यकता होगी. इस ImageJ या अन्य इमेज प्रोसेसिंग सॉफ्टवेयर के उपयोग से पूरा किया जा सकता है. कुछ उदाहरणों में, स्याही आसानी से दिखाई नहीं हो सकता है जो मामले में आसन्न वर्गों / स्लाइड जांच की जानी चाहिए.

Representative Results

काली स्याही के निशान के बीच होना चाहिए 1 – 1.5 सेमी के अलावा ब्याज की इमेजिंग क्षेत्र का संकेत. हरी स्याही के निशान इमेजिंग स्कैन की शुरुआत में रखा जाना चाहिए, पूरबी नमूना (2 चित्रा और चित्रा 3a) 1 काली स्याही निशान से पहले. ऊतक स्याही के निशान दोनों OFDI इमेजिंग और ऊतक विज्ञान (3 चित्रा और 4) पर दिखाई जानी चाहिए. सामान्य (3 चित्रा) सूअर और मानव airway (4 चित्रा) में, ठेठ airway layering दिखाई जानी चाहिए. उपकला (ई) एक पतली के रूप में दिखाई देता है, मध्यम घने, airway के luminal पहलू पर सजातीय परत का संकेत. लामिना propria के संकेत गरीब ऊतक, संकेत elastin और कोलेजन (ईएल) सहित तीव्र संयोजी ऊतकों के रूप में इस तरह के लामिना propria (LP) के विभिन्न घटकों के लिए इसी, और संकेत गरीब लार प्रकार ग्रंथियों के ऊतक संगठित संकेत तीव्र (G होते हैं ). कभी कभी दिखाई संकेत गरीब (डी) नलिकाओं respi traversingratory उपकला ब्रोन्कियल लुमेन के साथ कनेक्ट करने के लिए. चिकना मांसपेशी असंतत, interspersed चिकनी पेशी fascicles के रूप में प्रकट होता है और इस प्रकार OFDI में पहचान नहीं है. एच एंड ई और trichrome दाग, airway layering देखे जा (चित्रा 3c, 3 डी, 3f, 3 जी, 4b, 4C, 4e, और 4f) कर सकते हैं, सतही घने लोचदार और collagenous ऊतकों गहरे नीले और अंतर्निहित चिकनी पेशी दिखाई देते हैं, जहां पर trichrome दाग लाल (एस). उपास्थि छल्ले (सी) संकेत अच्छी तरह से परिभाषित सीमाओं, जो सूअर airway में ओवरलैप और मानव airway में ओवरलैप नहीं के साथ गरीब चंद्राकार ढांचे के रूप में दिखाई देते हैं. perichondrium आसपास उपास्थि छल्ले संकेत तीव्र संकेत गरीब उपास्थि छल्ले को शामिल ऊतक की एक पतली परत के रूप में प्रकट होता है. परिधीय मानव (चित्रा 4g और 4) वायुमार्ग, वायुकोशीय संलग्नक (A) पतली संकेत, संकेत शून्य वायुकोशीय रिक्त स्थान के साथ तीव्र जाली की तरह वायुकोशीय दीवारों के रूप में दिखाई दे रहे हैं. लामिना propria के भीतर संवहनी स्थान v रहे हैंसंकेत हल्के अंतर्निहित ग्रहण artifact (तीर) के साथ शून्य रेखीय या परिपत्र संरचनाओं के रूप isible. चित्रा 1. सूअर airway के OFDI vivo यांत्रिक वेंटीलेशन के तहत एक सूअर airway से प्राप्त चित्रों में. (क) ODFI समीपस्थ airway के पार अनुभाग. (ख) OFDI डिस्टल airway के पार अनुभाग. (ग) समीपस्थ airway के ODFI अनुदैर्ध्य अनुभाग, पैनल ई के उच्च लाल डाला क्षेत्र में बढ़ाई छवि. (घ) डिस्टल airway के OFDI अनुदैर्ध्य अनुभाग, पैनल ई हरी प्रकाश डाला क्षेत्र में उच्च बढ़ाई छवि. समीपस्थ (ई) ODFI airway के अनुदैर्ध्य अनुभाग डिस्टल (दाएं से बाएं). कैथेटर व्यास 0.8 मिमी है और टिक के निशान 0.5 मिमी वेतन वृद्धि का प्रतिनिधित्व करते हैं. हालांकि airway दीवार और वायुकोशीय संलग्नक की विभिन्न परतों OFDI छवियों में प्रत्यक्ष कर रहे हैं, यह मुश्किल है ठीक शारीरिक सह व्याख्यासीधे पंजीकृत ऊतक विज्ञान के बिना OFDI संकेतों के rrelate. ई: उपकला, एल.पी.: लामिना propria, एस.एम.: submucosa, ग: उपास्थि, एक: वायुकोशीय संलग्नक. चित्रा 2. सूअर airway के अंकन ऊतक (क) दो luminal सतह पर काली स्याही के निशान के साथ airway खोला airway के अनुदैर्ध्य पहलू, 1.5 सेमी अलग समानांतर रखा. (ख) OFDI दो काली स्याही पर रखा कैथेटर OFDI pullback के भीतर दोनों चिह्न शामिल निशान. (ग) अतिरिक्त हरी स्याही पूरबी निशान पर नमूना इमेजिंग स्कैन की शुरुआत के साथ Airway. चित्रा 3. OFDI और सूअर airway के ऊतक विज्ञान सटीक भ्रष्टाचार का प्रदर्शनऊतक का उपयोग अंकन संबंध. (क) दो luminal सतह पर काली स्याही के निशान के साथ airway खोला airway के घैरा पहलू के लिए समानांतर रखा. पिंस आगे airway (तीर) खोलने के लिए किया जाता है. (घ) सहसंबद्ध trichrome दाग (ख) दोनों स्याही के साथ सूअर airway के OFDI दिखाई (तारांकन) (ग) और एच ई के साथ ठीक सहसंबद्ध ऊतक विज्ञान दाग (काली स्याही के निशान श्वसन उपकला पर दिखाई तारांकन) के साथ निशान. स्केल पट्टी: 2 मिमी. (ङ) (च) इसी ऊतक विज्ञान और एच ई के साथ दाग और (छ) दाग सहसंबद्ध trichrome OFDI छवि के उच्च बढ़ाई दृश्य. ई: श्वसन उपकला, ईएल: घने कोलेजन और लोचदार ऊतकों, एसएम: चिकनी पेशी, सी: उपास्थि छल्ले (histological artifact उपास्थि के छल्ले के कृत्रिम जुदाई में बदल गया है), जी: लार ग्रंथि के ऊतकों, डी: लार वाहिनी उपकला में प्रवेश. स्केल पट्टी: 250 सुक्ष्ममापी. बड़ा आंकड़ा देखने के लिए यहां क्लिक करें . चित्रा 4. OFDI ऊतक विज्ञान और मानव airway के ऊतकों का उपयोग अंकन सटीक सहसंबंध प्रदर्शन (क) दोनों स्याही के साथ मानव समीपस्थ airway के OFDI दिखाई निशान (तारांकन). (ख) संक्षेप में एच एंड ई के साथ काली स्याही के साथ सहसंबद्ध ऊतक विज्ञान दाग श्वसन उपकला (तारांकन) पर दिखाई निशान और (ग) दाग सहसंबद्ध trichrome. स्केल पट्टी: 2 मिमी. (घ) उच्च OFDI छवि की बढ़ती देख सकते हैं और इसी ऊतक विज्ञान (ई) और एच ई और (च) trichrome साथ दाग. स्केल पट्टी: 250 सुक्ष्ममापी. ई: श्वसन उपकला, एल.पी.: लामिना propria, जी: लार ग्रंथि के ऊतकों, सी: उपास्थि के छल्ले, पीसी: perichondrium. मानव airway में, विशिष्ट layering दिख रहा है. ढीले संयोजी ऊतक के भीतर, वहाँ लाल धुंधला चिकनी पेशी के fascicles interspersed हैं (एसएम, पैनलों सी और एफ), जो एक सतत बैंड फार्म नहीं है और इस प्रकार OFDI में एक अलग परत के रूप में दिखाई नहीं देते हैं. (छ) मानव डिस्टल airway और (ज) ठीक सहसंबद्ध श्वसन उपकला (तारांकन) पर दिखाई काली स्याही के निशान के साथ ऊतक विज्ञान और एच ई के OFDI. स्केल पट्टी: 2 मिमी. वायुकोशीय संलग्नक (A) संकेत संकेत शून्य वायुकोशीय रिक्त स्थान के साथ गहन जाली की तरह वायुकोशीय दीवारों के रूप में दिखाई दे रहे हैं. लामिना propria के भीतर संवहनी रिक्त स्थान भी अंतर्निहित हल्के ग्रहण (तीर) के साथ संकेत शून्य संरचनाओं के रूप में दिखाई दे रहे हैं.

Discussion

जल्दी फेफड़ों दुर्दमताओं का आकलन बेहद लक्षण और जल्दी neoplastic परिवर्तन radiologically या bronchoscopically कल्पना करने में असमर्थता की कमी की वजह से चुनौतीपूर्ण हो सकता है. OFDI histologic संकल्प, असली ^2-6 समय में 3 आयामी ऊतक microstructure के विचारों के निकट बड़े क्षेत्र प्रदान करता है. एक सुरक्षित तकनीक है कि फेफड़े ^11-13 (एनिमेशन) वायुमार्ग में लंबी airway खंडों के उच्च संकल्प बड़ा डेटासेट प्राप्त करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है के रूप में Endobronchial OFDI रोगियों में प्रदर्शन किया गया है. हालांकि, केवल छोटे बायोप्सी vivo सेटिंग है, जो पर्याप्त संबद्ध फेफड़े विकृति के लिए इमेजिंग मापदंड के विकास के लिए प्रदान नहीं करते OFDI में histopathological समकक्षों के रूप में प्राप्त कर रहे हैं. आदेश में सही OFDI फुफ्फुसीय इमेजिंग में देखा सुविधाओं का आकलन करने के लिए, यह आवश्यक है ऊतक विज्ञान correlations ठीक मिलान छवि प्राप्त है. हम सटीक करने के लिए एक सरल और कारगर तरीका मौजूद है, ओ के लिए एकOFDI और ऊतक विज्ञान के बीच पूर्वोत्तर सहसंबंध पूर्व vivo फेफड़े लकीर नमूनों की airway इमेजिंग, जो लगभग किसी भी पूर्व vivo ऊतक प्रकार लागू करने के लिए लागू होता है. एक बार इमेजिंग मापदंड मिलान ऊतक विज्ञान एक से एक के साथ पूर्व vivo स्थापित किया गया है, इन मानदंडों को तो vivo इमेजिंग में लागू कर सकते हैं सकता है.

ऊतक के लिए ब्याज की इमेजिंग क्षेत्र को चिह्नित करने के लिए प्रयोग किया जाता डाई दोनों OFDI और ऊतक विज्ञान में स्पष्ट रूप से दिखाई देता है. पूरबी सरल तकनीक का उपयोग करके ऊतक, स्याही के निशान दोनों इमेजिंग और ऊतक विज्ञान OFDI सुविधाओं और ऊतक विज्ञान के निष्कर्ष में से एक के लिए एक तुलना ऊतक विकृति की पहचान इमेजिंग विशेषताओं को निर्धारित करने की अनुमति में सहसंबद्ध किया जा सकता है. तकनीक सस्ती और व्यावहारिक है, इस प्रकार यह कई ऑप्टिकल इमेजिंग अनुप्रयोगों में उपयोगी बनाने.

में vivo सेटिंग में, अंकन लेजर जैसे तरीकों ऊतक ²⁵ उन्मुखीकरण के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. हालांकि टी,वह ब्रोन्कियल बायोप्सी के छोटे आकार अभी भी vivo अध्ययन में उपयोग करने के लिए फेफड़े विकृति के लिए विशिष्ट इमेजिंग मानदंड विकसित करने में एक सीमित कारक है. हालांकि पूर्व vivo अध्ययन vivo इमेजिंग में एक पर्याप्त वैकल्पिक के रूप में सेवा करते हैं, वहाँ कुछ सीमाएं हैं पूर्व vivo फेफड़ों के नमूनों uninflated कर रहे हैं और अक्सर शल्य चिकित्सा प्रेरित श्वासरोध, जो सामान्य वायुकोशीय संरचनाओं की उपस्थिति बदल प्रदर्शन. ऊतक विज्ञान संबंध के लिए अंकन ऊतक के साथ शल्य चिकित्सा resected फेफड़े के ऊतकों बढ़ाना तकनीकी रूप से चुनौतीपूर्ण है के रूप में सबसे अधिक शल्य फेफड़ों के नमूनों विकृति जमे हुए खंड मूल्यांकन के बाद प्राप्त कर रहे हैं जिसके दौरान फुफ्फुस सतह बाधित है, नमूना मुद्रास्फीति के साथ हस्तक्षेप. गैर वैकृत श्वासरोध एक में vivo सेटिंग में देखा विरूपण साक्ष्य नहीं है, इस प्रकार इस सीमा vivo फेफड़े इमेजिंग में करने के लिए उचित नहीं होगा. इसके अतिरिक्त, रक्त के पूर्व vivo नमूनों में जहाजों के भीतर कमी यह distingu के लिए मुश्किल बना सकता हैअन्य संकेत शून्य संरचनाओं से संवहनी संरचनाओं ish. Vivo सेटिंग में, डॉपलर अक्टूबर / OFDI ^26-28 की संरचनात्मक / अक्टूबर OFDI अलावा जहाजों की पहचान में सहायता करेगा.

गति कलाकृतियों vivo में देखा जा सकता है जहां वे वर्तमान पूर्व vivo नहीं कर रहे हैं. यह संभावित समस्याग्रस्त मानक अक्टूबर प्रणालियों में धीमी अधिग्रहण की दर के साथ हो सकता है. हालांकि, OFDI प्रणालियों के तेजी से फ्रेम दर वर्तमान में कर रहे हैं: 200 ^29-31 fps. इस प्रकार, यह उम्मीद नहीं है कि गति artifact एक महत्वपूर्ण मुद्दा होगा. Vivo अक्टूबर और OFDI इमेजिंग अध्ययन में पिछले सफल ठीक इमेजिंग ^14,15,18,19 सुविधाओं के दृश्य का प्रदर्शन किया है.

इस अध्ययन में हम फेफड़े विकृति के मूल्यांकन के लिए ऊतक आधारित निदान के लिए सटीक संबंध के साथ बड़ा OFDI प्रदर्शन किया है. वर्णित प्रक्रिया ठीक मिलान ऊतक विज्ञान प्रदान करने के लिए सोने standa के रूप में इस्तेमाल किया जा इरादा हैOFDI छवि व्याख्या के लिए तीसरी.

फेफड़े विकृति विज्ञान के लिए एक बार विशिष्ट इमेजिंग मानदंड विकसित किया गया है और मिलान ऊतक विज्ञान एक से एक के साथ पूर्व vivo मान्य मापदंड तो vivo इमेजिंग अध्ययन में बाद में हो सकता है इमेजिंग के एक सोने के मानक मूल्यांकन के रूप में लागू एक ब्रोन्कियल बायोप्सी के उपयोग के साथ सुविधाओं देखा. इस तकनीक फेफड़े लकीर नमूनों को एक आवेदन के रूप में प्रस्तुत किया जाता है, लेकिन लगभग किसी भी ऊतक प्रकार ऊतक विज्ञान दोनों सामान्य और रोग के ऊतकों के ठीक इमेजिंग सुविधाओं का निर्धारण करने के लिए जरूरत सहसंबंध सटीक इमेजिंग प्रदान करने के लिए लागू किया जा सकता है.

Materials

Name of the reagent	Company	Catalogue number	Comments (optional)
Tissue marking dye	Triangle Biomedical	TMD-BK, TMD-G