Summary

Eksperimentel Endocarditis Model af Methicillin Resistent<em> Staphylococcus aureus</em> (MRSA) i rotte

Published: June 04, 2012
doi:

Summary

Eksperimentel rotte endocarditis model på grund af methicillin-resistente<em> S. aureus</em>.

Abstract

Endovaskulære infektioner, herunder endocarditis, er livstruende infektionssygdomme syndromer 1-3. Staphylococcus aureus er den mest almindelige verdensplan årsagen til sådanne syndromer med uacceptabelt høj morbiditet og mortalitet selv med passende antimikrobielle middel behandlinger 4-6. Stigningen i infektioner på grund af methicillin-resistente S. aureus (MRSA), de høje vancomycin kliniske behandling fejl og voksende problemer med linezolid og daptomycin modstand har alle yderligere kompliceret behandling af patienter med sådanne infektioner, og førte til høje udgifter til sundhedsvæsenet 7, 8. Desuden bør det understreges, at de seneste undersøgelser med antibiotika behandlingsresultater er baseret på kliniske indstillinger, og dermed kan meget vel blive påvirket af værtfaktorer varierende fra patient til patient. Derfor er en relevant dyremodel for endovaskulær infektion, hvor værtsfaktorer svarer fra dyr til dyr, er mereafgørende at undersøge mikrobiel patogenese, såvel som virkningen af ​​hidtil ukendte antimikrobielle midler. Endocarditis hos rotter er en veletableret eksperimentel dyremodel, der nøje tilnærmer human nativ ventil endocarditis. Denne model er blevet anvendt til at undersøge rollen af ​​visse stafylokok virulensfaktorer og effektiviteten af ​​antibiotika behandlingsregimer for stafylokok endocarditis. I denne rapport beskriver vi den eksperimentelle endocarditis modellen på grund af MRSA, der kunne bruges til at undersøge bakteriel patogenese og respons på antibiotisk behandling.

Protocol

1. Klargøring af MRSA-stammer for Infektion Inokulere en løkkefuld af MRSA kultur fra en bestand rør ved -80 ° C til en fåreblod Trypticase Soy Agar (TSA) plade (se tabel specifikke reagenser og udstyr), og der inkuberes ved 37 ° C natten over. Kontroller renheden af ​​kulturen på blodagar plade (tilsvarende koloni fænotyper) for at sikre, at der ikke er nogen forurening. Vælge en koloni fra fåreblod TSA plade og inokulere koloni i 5 ml Trypticase Soy Broth (TSB) i et 15 ml s…

Discussion

Rotten endocarditis er en vigtig og velkarakteriserede dyremodeller for in vivo-undersøgelser i patogenesen og antimikrobielle midler i behandlingen af bakterieinfektioner 9-11. Desuden repræsenterer rotte endocarditis model sammensat af akutte og sub-akutte infektioner, og nøje efterligner menneskelige modstykke og human indfødte ventil endocarditis. Desuden, ledsaget af en bolig kateter, det repræsenterer en klassisk biofilm-associeret infektion, en fælles og vanskeligt spørgsmål i kliniske…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Dette arbejde blev støttet af det amerikanske National Institutes of Health [tilskud R01AI-39.108 til ASB] og American Heart Association [tilskud SDG 0630219N og AID 09GRNT2180065 til YQX].

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
Blood agar plate, 5% sheep blood in Trypticase Soy agar(TSA) Hardy Diagnostics A10BX  
Trypticase Soy broth (TSB) Becton Dickinson 211825  
Shaking incubator Labnet I5311-DS  
Polyethylene tubing Becton Dickinson 427401  
Catheter introducer Becton Dickinson 6999  
       
Isofluorance Western Medical Suppy, Inc 2147 Follow safety and handling information
Surgical Instruments Fine Science Tools and Biomedical Research Instruments, Inc.   Find the instruments from the two companies for your needs

References

  1. Petti, C. A., Fowler, V. G. Staphylococcus aureus bacteremia and endocarditis. Cardiol. Clin. 21, 219-233 (2003).
  2. Bashore, T. M., Cabell, C., Fowler, V. Update on infective endocarditis. Curr. Probl. Cardiol. 31, 274-352 (2006).
  3. Fowler, V. G., Justice, A., Moore, C. Risk factors for hematogenous complications of intravascular catheter-associated Staphylococcus aureus bacteremia. Clin. Infect. Dis. 17, 313-320 (1993).
  4. Wisplinghoff, H., Bischoff, T., Tallent, S. M., Seifert, H., Wenzel, R. P., Edmond, M. B. Nosocomial bloodstream infections in US hospitals: analysis of 24,179 cases from a prospective nationwide surveillance study. Clin. Infect. Dis. 39, 309-317 (2004).
  5. Hoen, B. Special issues in the management of infective endocarditis caused by gram-positive cocci. Infect Dis. Clin. North Am. 16, 437-452 (2002).
  6. Moise, P. A., Hershberger, E., Amodio-Groton, M. I., Lamp, K. C. Safety and clinical outcomes when utilizing high-dose (> or =8 mg/kg) daptomycin therapy. Ann. Pharmacother. 43, 1211-1219 (2009).
  7. Sakoulas, G., Brown, J., Lamp, K. C., Friedrich, L. V., Lindfield, K. C. Clinical outcomes of patients receiving daptomycin for the treatment of Staphylococcus aureus infections and assessment of clinical factors for daptomycin failure: a retrospective cohort study utilizing the Cubicin Outcomes Registry and Experience. Clin. Ther. 31, 1936-1945 (2009).
  8. Xiong, Y. Q., Willard, J., Kadurugamuwa, J. L., Yu, J., Francis, K. P., Bayer, A. S. Real-time in vivo bioluminescent imaging for evaluating the efficacy of antibiotics in a rat Staphylococcus aureus endocarditis model. Antimicrob. Agents Chemother. 49, 380-387 (2005).
  9. Peerschke, E. I., Bayer, A. S., Ghebrehiwet, B., Xiong, Y. Q. gC1qR/p33 blockade reduces Staphylococcus aureus colonization of target tissues in an animal model of infective endocarditis. Infect. Immun. 74, 4418-4423 (2006).
  10. Ganesh, V. K., Rivera, J. J., Smeds, E. A structural model of the Staphylococcus aureus ClfA-fibrinogen interaction opens new avenues for the design of anti-staphylococcal therapeutics. PLoS Pathog. 4, e1000226 (2008).
  11. Boles, B. R., Horswill, A. R. Staphylococcal biofilm disassembly. Trends Microbiol. , (2011).
  12. Tseng, C. W., Sanchez-Martinez, M., Arruda, A., Liu, G. Y. Subcutaneous Infection of Methicillin Resistant Staphylococcus Aureus (MRSA). J. Vis. Exp. (48), e2528 (2011).
check_url/3863?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Hady, W. A., Bayer, A. S., Xiong, Y. Q. Experimental Endocarditis Model of Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) in Rat. J. Vis. Exp. (64), e3863, doi:10.3791/3863 (2012).

View Video