Summary

Eksperimentell Endokarditt Modell av Meticillin Resistent<em> Staphylococcus aureus</em> (MRSA) i Rat

Published: June 04, 2012
doi:

Summary

Eksperimentell rotte endokarditt modell på grunn av meticillinresistente<em> S. aureus</em>.

Abstract

Endovaskulære infeksjoner, inkludert endokarditt, er livstruende smittsomme syndromer 1-3. Staphylococcus aureus er den vanligste verdensomspennende årsak til slike syndromer med uakseptabelt høy sykelighet og dødelighet selv med egnede antimikrobielt middel behandlinger 4-6. Økningen i infeksjoner på grunn av meticillinresistente S. aureus (MRSA), den høye forekomsten av vankomycin kliniske behandlingssvikt og voksende problemer av linezolid og daptomycin motstand har all videre komplisert behandling av pasienter med slike infeksjoner, og førte til høye helsekostnader 7, 8. I tillegg bør det understrekes at de fleste nyere studier med antibiotika behandlingsresultatene har vært basert på kliniske settinger, og dermed kan godt være påvirket av vertsfaktorer varierende fra pasient til pasient. Derfor er en relevant dyremodell av endovaskulær infeksjon der vertsfaktorer er lik fra dyr til dyr meravgjørende for å undersøke mikrobiell patogenese, samt effekten av nye antimikrobielle midler. Endokarditt i rotte er en veletablert eksperimentell dyremodell som tett tilnærmet menneskelig innfødt ventil endokarditt. Denne modellen har blitt brukt til å undersøke hvilken rolle spesielle stafylokokker virulensfaktorer og effekten av antibiotika behandlingsregimer for stafylokokk endokarditt. I denne rapporten beskriver vi den eksperimentelle endokarditt modellen på grunn av MRSA som kan brukes til å undersøke bakteriell patogenese og respons på antibiotikabehandling.

Protocol

1. Klargjøre MRSA stammer til infeksjon Inokuler en loopful av MRSA kultur fra et lager rør ved -80 ° C til en saueblod Trypticase Soy agar (TSA) plate (se tabell over spesifikke reagenser og utstyr), og inkuber ved 37 ° C for natten. Sjekk renhet av kulturen på blod agar plate (tilsvarende kolonistimulerende fenotyper) å sørge for at det ikke er forurensning. Plukk en koloni fra saueblod TSA plate og inokuler kolonien i 5 ml Trypticase Soy kjøttkraft (TSB) i en 15 ml snap-capped t…

Discussion

Rotta endokarditt er en viktig og godt karakterisert dyremodell for in vivo studier i patogenese og antimikrobielle midler i behandlingen av bakterielle infeksjoner 9-11. I tillegg representerer rotte endokarditt modell sammensatt av akutte og sub-akutte infeksjoner, og etterligner menneskelige motstykke og menneskelige innfødte ventil endokarditt. Dessuten ledsaget av en i boligen kateter, representerer det en klassisk biofilm-assosierte infeksjon, en vanlig og vanskelig sak i kliniske settinger <s…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Dette arbeidet ble støttet av det amerikanske National Institutes of Health [bevilgning R01AI-39108 til ASB] og American Heart Association [tilskudd SDG 0630219N og AID 09GRNT2180065 til YQX].

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
Blood agar plate, 5% sheep blood in Trypticase Soy agar(TSA) Hardy Diagnostics A10BX  
Trypticase Soy broth (TSB) Becton Dickinson 211825  
Shaking incubator Labnet I5311-DS  
Polyethylene tubing Becton Dickinson 427401  
Catheter introducer Becton Dickinson 6999  
       
Isofluorance Western Medical Suppy, Inc 2147 Follow safety and handling information
Surgical Instruments Fine Science Tools and Biomedical Research Instruments, Inc.   Find the instruments from the two companies for your needs

References

  1. Petti, C. A., Fowler, V. G. Staphylococcus aureus bacteremia and endocarditis. Cardiol. Clin. 21, 219-233 (2003).
  2. Bashore, T. M., Cabell, C., Fowler, V. Update on infective endocarditis. Curr. Probl. Cardiol. 31, 274-352 (2006).
  3. Fowler, V. G., Justice, A., Moore, C. Risk factors for hematogenous complications of intravascular catheter-associated Staphylococcus aureus bacteremia. Clin. Infect. Dis. 17, 313-320 (1993).
  4. Wisplinghoff, H., Bischoff, T., Tallent, S. M., Seifert, H., Wenzel, R. P., Edmond, M. B. Nosocomial bloodstream infections in US hospitals: analysis of 24,179 cases from a prospective nationwide surveillance study. Clin. Infect. Dis. 39, 309-317 (2004).
  5. Hoen, B. Special issues in the management of infective endocarditis caused by gram-positive cocci. Infect Dis. Clin. North Am. 16, 437-452 (2002).
  6. Moise, P. A., Hershberger, E., Amodio-Groton, M. I., Lamp, K. C. Safety and clinical outcomes when utilizing high-dose (> or =8 mg/kg) daptomycin therapy. Ann. Pharmacother. 43, 1211-1219 (2009).
  7. Sakoulas, G., Brown, J., Lamp, K. C., Friedrich, L. V., Lindfield, K. C. Clinical outcomes of patients receiving daptomycin for the treatment of Staphylococcus aureus infections and assessment of clinical factors for daptomycin failure: a retrospective cohort study utilizing the Cubicin Outcomes Registry and Experience. Clin. Ther. 31, 1936-1945 (2009).
  8. Xiong, Y. Q., Willard, J., Kadurugamuwa, J. L., Yu, J., Francis, K. P., Bayer, A. S. Real-time in vivo bioluminescent imaging for evaluating the efficacy of antibiotics in a rat Staphylococcus aureus endocarditis model. Antimicrob. Agents Chemother. 49, 380-387 (2005).
  9. Peerschke, E. I., Bayer, A. S., Ghebrehiwet, B., Xiong, Y. Q. gC1qR/p33 blockade reduces Staphylococcus aureus colonization of target tissues in an animal model of infective endocarditis. Infect. Immun. 74, 4418-4423 (2006).
  10. Ganesh, V. K., Rivera, J. J., Smeds, E. A structural model of the Staphylococcus aureus ClfA-fibrinogen interaction opens new avenues for the design of anti-staphylococcal therapeutics. PLoS Pathog. 4, e1000226 (2008).
  11. Boles, B. R., Horswill, A. R. Staphylococcal biofilm disassembly. Trends Microbiol. , (2011).
  12. Tseng, C. W., Sanchez-Martinez, M., Arruda, A., Liu, G. Y. Subcutaneous Infection of Methicillin Resistant Staphylococcus Aureus (MRSA). J. Vis. Exp. (48), e2528 (2011).
check_url/3863?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Hady, W. A., Bayer, A. S., Xiong, Y. Q. Experimental Endocarditis Model of Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) in Rat. J. Vis. Exp. (64), e3863, doi:10.3791/3863 (2012).

View Video