Summary

Experimentell Endokardit Modell av Meticillinresistenta<em> Staphylococcus aureus</em> (MRSA) i råtta

Published: June 04, 2012
doi:

Summary

Experimentell rått endokardit modellen på grund av meticillin-resistenta<em> S. aureus</em>.

Abstract

Endovaskulära infektioner, inklusive endokardit, är livshotande infektioner syndrom 1-3. Staphylococcus aureus är den vanligaste världen orsaken till dessa syndrom med oacceptabelt hög sjuklighet och dödlighet även med lämplig antimikrobiell agent behandlingar 4-6. Ökningen i infektioner orsakade av meticillinresistenta S. aureus (MRSA), de höga vankomycin kliniska misslyckade behandlingar och växande problem med linezolid och daptomycin motståndet har alla mer komplicerade behandling av patienter med sådana infektioner, och ledde till höga sjukvårdskostnader 7, 8. Dessutom bör det framhållas att de senaste studierna med antibiotikabehandling resultat har sin bas i kliniska miljöer, och därmed kan mycket väl påverkas av värd faktorer varierar från patient till patient. Därför är en relevant djurmodell för endovaskulära infektion som värd faktorer är likartade från djur till djur meravgörande för att undersöka Microbial Pathogenesis, såväl som effekten av nya antimikrobiella medel. Endokardit i råtta är en väletablerad experimentell djurmodell som nära approximerar mänskliga infödda ventil endokardit. Denna modell har använts för att undersöka betydelsen av särskilda stafylokock virulensfaktorer och effekt av antibiotika behandlingsregimer för stafylokock endokardit. I denna rapport beskriver vi den experimentella endokardit modellen på grund av MRSA som kan användas för att undersöka bakteriell patogenes och svar på antibiotikabehandling.

Protocol

1. Förbereda MRSA-stammar för Infection Ympa en full ögla av MRSA kultur från en lager rör vid -80 ° C till en fårblod Trypticase Soy Agar (TSA)-platta (se tabell av specifika reagens och utrustning) och inkubera vid 37 ° C under natten. Kontrollera renheten av kulturen på blodagarplatta (liknande koloni fenotyper) se till att det inte finns någon förorening. Välja en koloni från fårblod TSA plattan och inokulera kolonin i 5 ml trypticase sojabuljong (TSB) i en 15 ml snäpp-p…

Discussion

Råttan endokardit är en viktig och väl karakteriserad djurmodell för in vivo-studier i patogenes och antimikrobiella medel vid behandling av bakteriella infektioner 9-11. Dessutom representerar rått endokardit modellen en komposit av akut och subakut infektioner och nära efterliknar mänskliga motsvarighet och mänskliga infödda ventil endokardit. Dessutom åtföljas av en bostad kateter, innebär det en klassisk biofilm-associerad infektion, en vanlig och svår fråga i kliniska situationer <…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Detta arbete stöddes av amerikanska National Institutes of Health [bidraget R01AI-39.108 till ASB] och American Heart Association [bidrag SDG 0630219N och biståndseffektivitet 09GRNT2180065 till YQX].

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
Blood agar plate, 5% sheep blood in Trypticase Soy agar(TSA) Hardy Diagnostics A10BX  
Trypticase Soy broth (TSB) Becton Dickinson 211825  
Shaking incubator Labnet I5311-DS  
Polyethylene tubing Becton Dickinson 427401  
Catheter introducer Becton Dickinson 6999  
       
Isofluorance Western Medical Suppy, Inc 2147 Follow safety and handling information
Surgical Instruments Fine Science Tools and Biomedical Research Instruments, Inc.   Find the instruments from the two companies for your needs

References

  1. Petti, C. A., Fowler, V. G. Staphylococcus aureus bacteremia and endocarditis. Cardiol. Clin. 21, 219-233 (2003).
  2. Bashore, T. M., Cabell, C., Fowler, V. Update on infective endocarditis. Curr. Probl. Cardiol. 31, 274-352 (2006).
  3. Fowler, V. G., Justice, A., Moore, C. Risk factors for hematogenous complications of intravascular catheter-associated Staphylococcus aureus bacteremia. Clin. Infect. Dis. 17, 313-320 (1993).
  4. Wisplinghoff, H., Bischoff, T., Tallent, S. M., Seifert, H., Wenzel, R. P., Edmond, M. B. Nosocomial bloodstream infections in US hospitals: analysis of 24,179 cases from a prospective nationwide surveillance study. Clin. Infect. Dis. 39, 309-317 (2004).
  5. Hoen, B. Special issues in the management of infective endocarditis caused by gram-positive cocci. Infect Dis. Clin. North Am. 16, 437-452 (2002).
  6. Moise, P. A., Hershberger, E., Amodio-Groton, M. I., Lamp, K. C. Safety and clinical outcomes when utilizing high-dose (> or =8 mg/kg) daptomycin therapy. Ann. Pharmacother. 43, 1211-1219 (2009).
  7. Sakoulas, G., Brown, J., Lamp, K. C., Friedrich, L. V., Lindfield, K. C. Clinical outcomes of patients receiving daptomycin for the treatment of Staphylococcus aureus infections and assessment of clinical factors for daptomycin failure: a retrospective cohort study utilizing the Cubicin Outcomes Registry and Experience. Clin. Ther. 31, 1936-1945 (2009).
  8. Xiong, Y. Q., Willard, J., Kadurugamuwa, J. L., Yu, J., Francis, K. P., Bayer, A. S. Real-time in vivo bioluminescent imaging for evaluating the efficacy of antibiotics in a rat Staphylococcus aureus endocarditis model. Antimicrob. Agents Chemother. 49, 380-387 (2005).
  9. Peerschke, E. I., Bayer, A. S., Ghebrehiwet, B., Xiong, Y. Q. gC1qR/p33 blockade reduces Staphylococcus aureus colonization of target tissues in an animal model of infective endocarditis. Infect. Immun. 74, 4418-4423 (2006).
  10. Ganesh, V. K., Rivera, J. J., Smeds, E. A structural model of the Staphylococcus aureus ClfA-fibrinogen interaction opens new avenues for the design of anti-staphylococcal therapeutics. PLoS Pathog. 4, e1000226 (2008).
  11. Boles, B. R., Horswill, A. R. Staphylococcal biofilm disassembly. Trends Microbiol. , (2011).
  12. Tseng, C. W., Sanchez-Martinez, M., Arruda, A., Liu, G. Y. Subcutaneous Infection of Methicillin Resistant Staphylococcus Aureus (MRSA). J. Vis. Exp. (48), e2528 (2011).
check_url/3863?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Hady, W. A., Bayer, A. S., Xiong, Y. Q. Experimental Endocarditis Model of Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) in Rat. J. Vis. Exp. (64), e3863, doi:10.3791/3863 (2012).

View Video