조합의 합성과 고분자 필름과 Nanoparticle 도서관에서 높은 처리량 단백질 출시
Summary
이 방법은 생분해 성 polyanhydride 필름과 nanoparticle 라이브러리의 조합 합성과 이러한 라이브러리의 단백질 릴리스의 높은 처리량 감지 기능을 설명합니다.
Abstract
Polyanhydrides 우수한 biocompatibility 및 약물 전달 기능을 갖춘 biomaterials의 클래스입니다. 그들은 함께 광범위하게 연구되어 있지만 기존의 한 샘플 – 타임에서 합성 기술, 더 최근의 높은 처리량 접근 방식은 polyanhydrides 1 큰 도서관의 합성 및 테스트를 가능하게 개발되었습니다. 이보다 효율적으로 최적화 및 약물 및 백신 전달 응용 프로그램에 대한 이러한 biomaterials의 설계 과정을 촉진합니다. 이 작품의 방법은 생분해 성 polyanhydride 필름과 nanoparticle 라이브러리의 조합 합성과 이러한 라이브러리의 단백질 릴리스의 높은 처리량 감지 기능을 설명합니다. 이 robotically 작동하는 방법 (그림 1)에서 선형 액츄에이터 및 주사기 펌프는 사용자 오류를 제거, 핸즈프리 자동화 프로토콜을 수 LabVIEW에 의해 제어됩니다. 또한,이 방법은 마이크로 스케일 폴리머 라이브러리의 급속한 제조, 빨간색 수multivariant 폴리머 시스템의 창조의 결과로 동안 배치 크기를 ucing. 고분자 합성이 조합 방식은 통상 한 고분자를 합성하기 위해 취할 것입니다 시간의 상응하는 금액의 15 가지의 폴리머까지의 합성을 촉진시킨다. 또한, 조합 폴리머 도서관 (나노 입자)을 비 용매로 또는 진공 건조 (필름 용)에 의한 용매 및 강수량의 영화 또는 폴리머 라이브러리의 해산시 나노 입자를 포함한 공백 또는 단백질로드 형상으로 가공 할 수 있습니다. 폴리머 라이브러리에 fluorochrome – 복합 단백질을로드되면, 단백질 릴리스 속도론는 이전에 한 설명한 바와 같이 형광 기반의 탐지 방법 (도 2 및도 3)를 사용하여 높은 처리량을 평가 할 수 있습니다. 이 조합 플랫폼은 기존 방법으로 검증 된 2 polyanhydride의 영화와 nanoparticle 라이브러리가와 특징되었습니다 <suP> 1 H NMR과 FTIR. 체외 세포 독성에 시토 킨 생산, 표면 마커 표현, 접착, 증식 및 분화; 라이브러리는 단백질 릴리스 속도론, 안정성 및 항원에 대한 검사를하고 있으며 생체 biodistribution과 mucoadhesion 1-11인치 본 개발 조합 방법은, 차례로, biomaterial 성능의 최적화를 위해 체외과 생체에서 상영 할 수 있습니다 단백질로드 nanoparticle 및 필름 라이브러리 높은 처리량 고분자 합성 및 제조를 할 수 있습니다.
Protocol
Discussion
필요한 합성 조건 및 합성되는 고분자의 유리 전이 온도 (T g들)의 지식은 도서관 제조에 필수적입니다. T g s는 실내 온도보다 낮은 경우, nanoparticle의 제조 단계는 고분자의 T g 아래의 제어 온도 환경에서 수행해야 할 수 있습니다. 또한주의는 높은 온도와 용제과 접촉 모든 장비가 해당 조건을 처리 할 적합한 있어야합니다 수 있도록주의해야한다. 이 프로토콜의 매개 변?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
저자는 재정 지원을위한 ONR – MURI 상 (NN00014-06-1-1176)과 미국 육군 의학 연구 및 Materiel 명령을 (부여 번호 W81XWH-10-1-0806)을 인정합니다. 본 자료는 교부금 번호 EEC 0,552,584 및 0,851,519 아래의 국립 과학 재단 (National Science Foundation)의 지원 작업에 기반을두고 있습니다.
Materials
| Name | Company | Catalog number |
| Motorized XYZ Stage: 3x T-LSM050A, 50 mm travel per axis | Zaber Technologies | T-XYZ-LSM050A-KT04 |
| NE-1000 Single Syringe Pump | New Era Pump Systems | NE-1000 |
| Pyrex* Vista* Rimless Reusable Glass Culture Tubes | Corning | 07-250-125 |
| Glass cuvettes | Scientific Strategies | G102 |
| LabVIEW | National Instruments | 776671-35 |
| SGE Gas Tight Syringes, Luer Loc | Sigma Aldrich | 509507 |
| U96 DeepWell Plates 1.3 ml & 2.0 ml | Thermo Scientific: Nunc | 278743 |
| Well cap mats | Thermo Scientific: Nunc | 276000 |
| Typhoon 9400 | GE Healthcare | 63-0055-79 |
| Whatman Grade 50 Circles 90 mm | Whatman | 1450-090 |
References
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