Summary

凍結保存サンプルの回復のための日曜大工のデバイスが誤って低温貯蔵タンクに落とし

Published: May 11, 2012
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Summary

ここでは、液体窒素を充填したデュワータンクからサンプル取得のための低コスト、耐久性のあるcryotolerantデバイスを提示します。装置の構成とモジュール設計のしやすさ、安全かつ容易に極低温タンクからのサンプル取得のプロセスになります。

Abstract

液体窒素の圧力下に置かれ、無色、無臭、非常に冷たい(-196℃)で液体である。それは一般的に、血液、細胞や組織の1,2のような生物学的物質の長期保存のための極低温流体として使用されます。液体窒素の低温の性質は、サンプルの保存のための理想的な一方、接触のライブの組織の急速凍結を引き起こす可能性があります- '凍傷' 2として知られている、密接にストレージ、デュアーからのサンプルの取得に関係者に重度の凍傷につながる可能性があります。さらに、液体窒素が蒸発としては、特に限られたスペース2に、空気中の酸素濃度を低減し、窒息を引き起こす可能性があります。

研究室で、生物学的サンプルは、多くの場合、デュワータンク1内のステンレス製ラックに積み重ねcryovialsまたはcryoboxesに格納されています。これらのストレージラックは、ラックからも抜けボックスを防止するために、長いシャフトととの底面に用意されていますルーチン処理時のデュアー。すべて余りに頻繁に、しかし、貴重なサンプルのボックスまたはバイアルに抜け出し、液体窒素を充填タンクの底に沈む。そのような場合には、サンプルがうんざりするほどのスペア容器または廃棄するに液体窒素を転送した後に取得することができます。箱やバイアルは、比較的安全に空にデュワーから回収することができる。しかし、液体窒素とその膨張率の低温性質が沈没したサンプルの取得危険になります。それは一般的にサンプルの検索が一人で行っ決してすることが安全局によって推奨されています。別の方法としては、バイアル3を取り出して、市販のクールグラバーやトングを使用することです。しかし、暗い液体充填デュアー内の限られた可視性は、それらの使用に大きな制限が課される。

本稿では、安全な両方の極低温流体を含むデュワーからのサンプルの取得を行うCryotolerant DIYの取得、デバイスの構造を記述する簡単に購入する。

Protocol

1。 Cryoboxesの検索のためのCryotolerantデバイスの組立ペンチを使用して、 図1Bに示すように、強力なネクタイLは形にする( 図1A)3面の強いタイの一面をまっすぐ注:強力なネクタイの寸法は、デュワーの首の直径に応じて選択することができます。 図3(AB)に示すようにCryoscoop基盤を形成するために、クラウンのボルトナット…

Discussion

デュワータンクの底からcryoboxesとcryovialsを取得する最も一般的な方法の1つは、予備容器に液体窒素をデカントし、デカントし、液体窒素中でフラスコまたはフローティングに残っているサンプルを引き出すことです。しかし、これは、液体窒素蒸気に長時間さらされる2による低温火傷や窒息を引き起こす可能性があり危険な習慣です。落ちcryovialsの取得他の一般的な方法は、クライ…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

DIY極検索装置は、プロジェクトがん研究プログラムは、科学のバージニア州アカデミーのメアリー·ルイーズ·アンドリュース·アワード主催の "バイオインフォマティクスと分子のアプローチを用いて真核細胞のモデル化細菌タンパク質のプレニル化"、 "プラズマ中のRNA編集の生理的意義の過程でテストされていたトーマスF. JeffressとケイトミラーJeffressメモリアルトラストと国家契約16.740.11.0364(科学と教育省、ロシア)が主催する樹状細胞 "。我々は、RNAの完全性実験の支援についてはベスオムに感謝します。

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
Hillman Group Plated Slotted Flat 1-3/8 x 4 feet; 14 Gauge Local Hardware shop N/A 1 unit required
Crown Bolt Stainless Steel #6 – 32 x 3/8 in. Oval Head Phillips Drive Machine Screw Local Hardware shop Model # 42281 4 units required
Crown Bolt 3/8 in. x 1-1/2 in. Zinc-Plated Steel Fender Washers Local Hardware shop Model # 20122 4 units required
Crown Bolt Zinc Plated #8-32 Machine Screw Nut Local Hardware shop Model # 18512 4 units required
Simpson Strong-Tie BC40Z 4 In.x4 in. Half Base Local Hardware shop Model # BC40Z 2 units required
Simpson Strong-Tie 6 in. x 6 in. T Strap Local Hardware shop Model # 66T 1 unit required
Oneida 6″ Mesh Strainer Local Grocery shop Model # 7859W 1 unit required
The Hillman Group Galvanized Hex Nuts 3/8-16 Local Hardware shop Model #:810509 6 units required
The Hillman Group Galvanized Hex Bolts 3/8- 16 Local Hardware shop   4 units required
Foam for insulation Local Hardware shop   1 unit required
Screw Driver Local Hardware shop   1 unit required
Pliers Local Hardware shop   1 unit required

References

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  2. Edeskuty, F. J., Walter, F. . Stewart Safety in the handling of cryogenic fluids. , (1996).
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Cite This Article
Mehta, R., Baranova, A., Birerdinc, A. Do-It-Yourself Device for Recovery of Cryopreserved Samples Accidentally Dropped into Cryogenic Storage Tanks. J. Vis. Exp. (63), e3903, doi:10.3791/3903 (2012).

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