Coloration immunohistochimique de B7-H1 (PD-L1) sur la paraffine Diapositives de tissus adénocarcinome pancréatique

Elaine Bigelow; Katherine M. Bever; Haiying Xu; Allison Yager; Annie Wu; Janis Taube; Lieping Chen; Elizabeth M. Jaffee; Robert A. Anders; Lei Zheng

doi:10.3791/4059

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Article de méthode

Coloration immunohistochimique de B7-H1 (PD-L1) sur la paraffine Diapositives de tissus adénocarcinome pancréatique

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DOI :

10.3791/4059

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3 janvier 2013

Elaine Bigelow¹^,² , Katherine M. Bever¹^,² , Haiying Xu¹^,²^,³ , Allison Yager¹ , Annie Wu¹^,²^,⁴ , Janis Taube³^,⁵ , Lieping Chen⁶ , Elizabeth M. Jaffee¹^,²^,⁵^,⁷^,⁸ , Robert A. Anders¹^,²^,⁵^,⁸ , Lei Zheng¹^,²^,⁴^,⁵^,⁷

¹The Sidney Kimmel Comprehensive Cancer Center, The Johns Hopkins University School of Medicine, ²Department of Oncology, The Johns Hopkins University School of Medicine, ³Department of Dermatology, The Johns Hopkins University School of Medicine, ⁴Department of Surgery, Johns Hopkins University School of Medicine, ⁵The Sol Goldman Pancreatic Cancer Center, The Johns Hopkins University School of Medicine, ⁶Yale Cancer Center, Yale School of Medicine, ⁷The Skip Viragh Center for Pancreatic Cancer, The Johns Hopkins University School of Medicine, ⁸Department of Pathology, The Johns Hopkins University School of Medicine

Dans cet article

Résumé

B7-H1 (PD-L1) et sa liaison au PD-1 fournissent une importante induite par la tumeur de signal immunosuppresseur dans le micro de la tumeur. Une technique de coloration immunohistochimique pour caractériser l'expression et la localisation de B7-H1 dans l'adénocarcinome pancréatique est décrite ici.

Résumé

B7-H1/PD-L1, un membre de la famille B7 du système immunitaire réglementaires protéines de surface cellulaire, joue un rôle important dans la régulation négative des réponses à médiation cellulaire immunitaire grâce à son interaction avec son récepteur, la mort programmée-1 (PD -1) ^1,2. La surexpression de B7-H1 par les cellules tumorales a été observée dans un certain nombre de cancers humains, y compris le mélanome, le glioblastome et les carcinomes du poumon, du sein, du côlon, de l'ovaire, et des cellules rénales, et a été montré pour affecter anti-tumorales T- ^3-8 immunité cellulaire.

Récemment, B7-H1 expression par les tissus adénocarcinome pancréatique a été identifié comme un marqueur pronostique potentiel de ^9,10. De plus, le blocage de B7-H1 dans un modèle murin de cancer du pancréas a été montré pour produire une réponse anti-tumorale ^11. Ces données suggèrent l'importance de la B7-H1 comme une cible thérapeutique potentielle. Anticorps blocus anti-B7-H1 sont donc l'objet d'essais cliniques pour le mulsieurs tumeurs solides humaines, y compris le mélanome et le cancer du poumon, du côlon, du rein, de l'estomac et du pancréas ^12.

Pour finalement être en mesure d'identifier les patients qui bénéficieront de B7-H1 ciblage des thérapies, il est essentiel d'étudier la corrélation entre l'expression et la localisation de B7-H1 et la réponse du patient au traitement avec des anticorps blocus B7-H1. Examiner l'expression de B7-H1 dans les tissus humains adénocarcinome pancréatique par immunohistochimie vous donnera une meilleure compréhension de la façon dont cette molécule de signalisation co-inhibiteur contribue à la suppression de l'immunité anti-tumorale dans le micro de la tumeur. L'anticorps anti-B7-H1 monoclonal (clone 5H1) développé par Chen et ses collègues a été montré pour produire des résultats fiables dans cryosections coloration de plusieurs types de tissus humains néoplasiques ^4,8, mais des taches sur paraffine diapositives a été un défi que récemment ^13-18. Nous avons devenfuie le protocole de coloration B7-H1 pour les diapositives inclus en paraffine des tissus adénocarcinome pancréatique. Le protocole de coloration B7-H1 décrit ici produit conforme coloration membranaire et cytoplasmique de B7-H1 avec petit retour en arrière.