Summary

FDG micro-PET/CT साथ चूहे में ब्राउन फैट की कार्यात्मक इमेजिंग

Published: November 23, 2012
doi:

Summary

माउस ब्राउन वसा ऊतकों (बैट) कार्यात्मक इमेजिंग की एक विधि का वर्णन है जिसमें 18F-fluorodeoxyglucose की ठंड उत्तेजित में बैट (FDG) तेज साथ मूल्यांकन एक मानकीकृत micro-PET/CT प्रोटोकॉल गैर invasively. इस विधि मजबूत और संवेदनशील माउस मॉडल में बैट गतिविधियों में अंतर का पता लगाने है.

Abstract

ब्राउन वसा ऊतकों (बैट) अपने असतत स्थान और एक भूरे लाल अमीर vascularization और mitochondria की उच्च घनत्व के कारण रंग सफेद वसा ऊतकों (WAT) से अलग है. बैट ऊर्जा खर्च और गैर – कांप thermogenesis नवजात स्तनधारियों में के रूप में के रूप में अच्छी तरह से वयस्कों 1 में एक प्रमुख भूमिका निभाता है. बैट की मध्यस्थता thermogenesis अत्यधिक सहानुभूति तंत्रिका तंत्र द्वारा नियंत्रित किया जाता है, मुख्य रूप से β एड्रीनर्जिक रिसेप्टर 2, 3 के माध्यम से. हाल के अध्ययनों से पता चला है कि मानव वयस्कों में बैट गतिविधियों नकारात्मक शरीर मास इंडेक्स (बीएमआई) और अन्य मधुमेह 4-6 मापदंडों के साथ सहसंबद्ध होते हैं. बैट इस प्रकार anti-obesity/anti-diabetes उपचार ऊर्जा संतुलन 6-8 की मॉडुलन पर ध्यान केंद्रित करने के लिए एक संभावित लक्ष्य के रूप में प्रस्तावित किया गया है. जबकि कई ठंड चुनौती आधारित पोजीट्रान उत्सर्जन टोमोग्राफी तरीकों (पीईटी) मानव 9-13 बैट का पता लगाने के लिए स्थापित कर रहे हैं, वहाँ अनिवार्य रूप से इमेजिंग और quantif के लिए कोई मानकीकृत प्रोटोकॉल हैचूहों के रूप में छोटे पशु मॉडल में बैट के ication. यहाँ हम एक मजबूत पीईटी / सीटी चूहों में बैट के कार्यात्मक मूल्यांकन के लिए इमेजिंग विधि का वर्णन है. संक्षेप में, वयस्क C57BL/6J चूहों 4 घंटे की अवधि के लिए उपवास की शर्तों के तहत इलाज से पहले वे 18 एफ fluorodeoxyglucose (FDG) के एक खुराक प्राप्त ठंड थे. चूहों ठंड में एक अतिरिक्त घंटे के बाद FDG इंजेक्शन के लिए रह रहे थे, और फिर एक छोटे micro-PET/CT पशु समर्पित प्रणाली के साथ स्कैन. हासिल कर ली पीईटी छवियों संरचनात्मक संदर्भ के लिए सीटी छवियों के साथ सह से पंजीकृत है और interscapular बैट क्षेत्र में FDG तेज बैट गतिविधि को पेश करने के लिए विश्लेषण थे. यह ठंड उपचार मानकीकृत और इमेजिंग प्रोटोकॉल औषधीय हस्तक्षेप के दौरान परीक्षण बैट गतिविधियों के माध्यम से मान्य किया गया है, उदाहरण के लिए, β adrenoceptor 15 14, प्रोप्रानोलोल प्रतिपक्षी, या β3 agonist 16 BRL37344 द्वारा बढ़ाया बैट सक्रियण के उपचार से दबा दिया बैट सक्रियण. विधि desयहाँ cribed दवाओं / यौगिकों है कि बैट गतिविधि मिलाना, या जीन / रास्ते कि बैट और विभिन्न preclinical और बुनियादी पढ़ाई में विकास और विनियमन में शामिल कर रहे हैं की पहचान करने के लिए स्क्रीन के लिए लागू किया जा सकता है.

Protocol

1. पशु तैयारी और शीत उपचार पता लगाएँ और एक 4 डिग्री सेल्सियस ठंडे कमरे कि प्रयोगशाला चूहों को समायोजित करने के लिए अनुमोदित किया गया है का निरीक्षण किया. पूर्व सर्द पशु पिंजरों ठंडे कमरे में रात भ…

Representative Results

माउस बैट के micro-PET/CT इमेजिंग का एक उदाहरण चित्रा 1 में दिखाया गया है. जबकि सीटी इमेजिंग संरचनात्मक जानकारी प्रदान करता है, पीईटी इमेजिंग वितरण और पूरे शरीर में मात्रा 18 एफ FDG तेज encodes. ये इमेजिंग डेटा…

Discussion

इस अध्ययन में एक micro-PET/CT-based इमेजिंग विधि वयस्क चूहों में बैट गतिविधियों जो सिर्फ एक ठंडे उपचार की आवश्यकता है और एक के इंजेक्शन वाणिज्यिक 18 F-FDG का पता लगाने के लिए विकसित किया गया है. पूरी प्रक्रिया एक इ?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

लेखकों के लिए इस विधि को विकसित करने में उनकी टिप्पणी मददगार है और तकनीकी सहायता के लिए लौरा Diaz, केविन फिलिप्स, Willa ए Hsueh, और राजा सी. ली धन्यवाद देना चाहूंगा.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments (optional)
Micro-PET/CT Imaging System Siemens Medical Solutions USA, Inc. Inveon Dedicated PET System and Inveon Multimodality CT/SPECT System (docked)
Propranolol Sigma P0884
BRL 37344 Sigma B169
18F-FDG Cyclotope Inc.
C57BL/6J Male Mice Jackson Laboratory 000664 3-4 months old

References

  1. Cypess, A. M., Kahn, C. R. The role and importance of brown adipose tissue in energy homeostasis. Curr. Opin. Pediatr. 22, 478-484 (2010).
  2. Cannon, B., Nedergaard, J. Brown adipose tissue: function and physiological significance. Physiol. Rev. 84, 277-359 (2004).
  3. Collins, S., Surwit, R. S. The beta-adrenergic receptors and the control of adipose tissue metabolism and thermogenesis. Recent Prog. Horm. Res. 56, 309-328 (2001).
  4. Ouellet, V., et al. Outdoor temperature, age, sex, body mass index, and diabetic status determine the prevalence, mass, and glucose-uptake activity of 18F-FDG-detected BAT in humans. J. Clin. Endocrinol. Metab. 96, 1115-1125 (2011).
  5. Cypess, A. M. Identification and importance of brown adipose tissue in adult humans. N. Engl. J. Med. 360, 1509-1517 (2009).
  6. Fruhbeck, G., Becerril, S., Sainz, N., Garrastachu, P., Garcia-Velloso, M. J. BAT: a new target for human obesity. Trends Pharmacol. Sci. 30, 387-396 (2009).
  7. Cypess, A. M., Kahn, C. R. Brown fat as a therapy for obesity and diabetes. Curr. Opin. Endocrinol. Diabetes Obes. 17, 143-149 (2010).
  8. Virtanen, K. A., et al. Functional brown adipose tissue in healthy adults. N. Engl. J. Med. 360, 1518-1525 (2009).
  9. van Marken Lichtenbelt, W. D., et al. Cold-activated brown adipose tissue in healthy men. N. Engl. J. Med. 360, 1500-1508 (2009).
  10. Cohade, C., Mourtzikos, K. A., Wahl, R. L. “USA-Fat”: prevalence is related to ambient outdoor temperature-evaluation with 18F-FDG PET/CT. J. Nucl. Med. 44, 1267-1270 (2003).
  11. Garcia, C. A. Reduction of brown fat 2-deoxy-2-[F-18]fluoro-D-glucose uptake by controlling environmental temperature prior to positron emission tomography scan. Mol. Imaging Biol. 8, 24-29 (2006).
  12. Saito, M. High incidence of metabolically active brown adipose tissue in healthy adult humans: effects of cold exposure and adiposity. Diabetes. 58, 1526-1531 (2009).
  13. Agrawal, A., Nair, N., Baghel, N. S. A novel approach for reduction of brown fat uptake on FDG PET. Br. J. Radiol. 82, 626-631 (2009).
  14. Soderlund, V., Larsson, S. A., Jacobsson, H. Reduction of FDG uptake in brown adipose tissue in clinical patients by a single dose of propranolol. Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. 34, 1018-1022 (2007).
  15. Zhao, J., Cannon, B., Nedergaard, J. Thermogenesis is beta3- but not beta1-adrenergically mediated in rat brown fat cells, even after cold acclimation. Am. J. Physiol. 275, 2002-2011 (1998).
  16. Rowland, D. J., Garbow, J. R., Laforest, R., Snyder, A. Z. Registration of [18F]FDG microPET and small-animal MRI. Nucl. Med. Biol. 32, 567-5672 (2005).

Play Video

Cite This Article
Wang, X., Minze, L. J., Shi, Z. Functional Imaging of Brown Fat in Mice with 18F-FDG micro-PET/CT. J. Vis. Exp. (69), e4060, doi:10.3791/4060 (2012).

View Video