Summary

磁気共鳴イメージング、体積CT画像と超音波を用いた乳がんの骨転移のヌードラットモデルにおける血管新生のマルチモーダルイメージング

Published: August 14, 2012
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Summary

骨転移の病態に、血管新生は重要なプロセスであるため、イメージングおよび治療の標的を表しています。ここでは、サイト固有の乳癌骨転移のラットモデルを提示し、非侵襲的に画像の血管新生への戦略を説明<emin vivoでの></em>磁気共鳴イメージング、体積CT検査と超音波を用いた。

Abstract

血管新生は癌の増殖と転移形成に不可欠な機能です。骨転移では、血管新生因子は、腫瘍細胞の骨髄腔の増殖だけでなく、地元の骨破壊をもたらす腫瘍や骨細胞の相互作用のために重要である。私たちの目的は、非侵襲的イメージング技術を用いた骨格病変における血管新生 in vivo評価できます。実験的骨転移のモデルを開発することでした。

この目的のために、我々はそれぞれの後肢1以外の体の部分に転移の成長を妨げ浅腹壁動脈、中に10 5 MDA-MB-231ヒト乳癌細胞を注入した。腫瘍細胞接種後25-30日後に、サイト固有の骨転移は、遠位大腿骨、脛骨近位端および近位腓骨を1に制限され、開発しています。血管新生の形態学的および機能的な側面は、骨メタで長手方向に調べることができます磁気共鳴イメージング(MRI)、体積CT検査(VCT)と超音波(米国)を使用してstasisの複数形。

MRIは、最初に骨髄腔に限局して進行していく中で続いて皮質骨を超えている骨転移の軟組織の一部に形態学的情報が表示されます。使用してダイナミック造影MRI(DCE-MRI)機能地域の血液量などのデータ、血流と血管の透過性が得られ、2-4を定量することができる。骨破壊は、形態学的VCTイメージングを使用して高解像度でキャプチャされます。 MRI所見と相補的な、溶骨性病変は髄内腫瘍の増殖部位に隣接して配置することができます。造影剤を塗布した後、VCT血管造影では、高解像度の骨転移でmacrovesselアーキテクチャを明らかにし、DCE-VCTは、これらの病変5,6の微小循環に洞察することができます。米国による骨病変から形態学的および機能的特徴を評価するために適用されます皮質骨の局所骨溶解。 B-モードおよびドップラー技術を用いて、軟部組織の転移の構造と血流は、それぞれ評価することができます。 DCE-USは、バブル7の注入後の骨転移における血管新生のリアルタイムイメージングを可能にします。

結論としては、サイト固有の乳癌の骨のモデルではMRI、VCTと米国を含むマルチモーダルイメージング技術を転移形態とこれらの骨病変における血管新生の機能的なパラメータの補完的な情報を提供します。

Protocol

1。細胞培養 10%FCS(Sigma社、ドイツ)を補充したRPMI-1640培養におけるMDA-MB-231ヒト乳癌細胞(アメリカンタイプカルチャーコレクション)(Invitrogen社製、ドイツ)。すべての標準的な条件下で培養(37℃、加湿雰囲気、5%CO 2)と通路細胞週2-3回は、それら対数増殖に保つために保管してください。以下に説明する動物モデルでは、腫瘍テイク率が90%以上の1であるよ?…

Discussion

撮像法との組み合わせでここで紹介する実験的な骨転移を誘導する方法は、長手方向にヌードラットでは溶骨性病変をフォローアップすることができます。私たちのモデルでは、MDA-MB-231ヒト乳癌細胞は、pudendoepigastricトランクと大腿動脈を経由して腸骨動脈との間の吻合であるSEAに注入される。その結果、膝関節の供給領域に血流は海のライゲーション後も維持されています。に比べて骨転?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

この作品は、ドイツ学術振興(SFB-TR 23およびSFB-TR 79、TBとDK)によってサポートされていました。著者らは、優れた技術支援をLeottaとリサSeylerカリン、レナーテBangertに感謝します。

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number
MDA-MB-231 human breast cancer cells American Type Culture Collection (ATCC) HTB-26
RPMI-1640 Invitrogen 61870
FCS Invitrogen 10270
Trypsin-EDTA Invitrogen 25300
Carprofen Rimadyl Pfizer PZN 110208
Magnevist Bayer-Schering PZN 6961516
Imeron 400 MCT Bracco PZN 228654
SonoVue Bracco PZN 1567358
Papaverin Alfa Aesar L 04152
Isofluran Baxter HDG 9623
Symphony (Magnetic resonance imaging) Siemens  
Volume CT (Volumetric computed tomography) Siemens  
Acuson Sequioa 512 (Ultrasound) Siemens-Acuson  

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Bäuerle, T., Komljenovic, D., Berger, M. R., Semmler, W. Multi-modal Imaging of Angiogenesis in a Nude Rat Model of Breast Cancer Bone Metastasis Using Magnetic Resonance Imaging, Volumetric Computed Tomography and Ultrasound. J. Vis. Exp. (66), e4178, doi:10.3791/4178 (2012).

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